Leica BIOSYSTEMS DS9477 Mode D'emploi page 33

ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND
Каталожен №: DS9477
Предназначение
Тази система за откриване е за употреба при in vitro диагностика.
ChromoPlex 1 Dual Detection е конюгираща система за антитела без биотин, с линкер полимерна хрянова пероксидаза (HRP)
и линкер полимерна алкална фосфатаза (AP) за откриване на свързани с тъканите първични IgG миши и заешки антитела.
Предназначена е за оцветяване на срези от фиксирани във формалин, вградени в парафин тъкани с автоматизираната
система BOND (включва системите Leica BOND-MAX и Leica BOND-III).
Клиничната интерпретация на всяко оцветяване или на неговата липса трябва да бъде допълнена от морфологични
изследвания. Подходящите контроли трябва да бъдат оценени от квалифициран патолог в контекста на клиничната история
на пациента и на други диагностични изследвания.
Системата ChromoPlex 1 Dual Detection трябва да се използва при спазване на най-добрите лабораторни практики в
използването на тъканни контроли. За допълнителни гаранции лабораториите трябва да оцветят всяка проба на пациент,
заедно с позитивни, негативни и други специфични тъканни контроли, според необходимостта.
Описателна и разяснителна
Могат да бъдат използвани имунохистохимични техники за демонстриране на наличието на антигени в тъканта и клетките
(вж. „Употреба на реактиви BOND" във Вашата документация за потребителя на BOND).
Системата ChromoPlex 1 Dual Detection използва новаторска технология за контролирана полимеризация за подготвяне на
свързваща полимерна HRP система и свързваща AP система за антитела. Системата за откриване избягва използването на
стрептавидин и биотин и така елиминира неспецифичното оцветяване като резултат на ендогенния биотин.
Системата ChromoPlex 1 Dual Detection работи както следва:
• Спесименът се инкубира с водороден пероксид, за да се потисне активността на ендогенната пероксидаза.
• Прилага се осигурен от потребителя коктейл от специфични първични миши и заешки антитела.
• IgG реактивът Poly-HRP локализира мишите антитела.
• IgG реактив Poly-AP локализира заешките антитела.
• Първият субстратен хромоген, 3,3'-диаминобензидин тетрахидрохлорид хидрат (DAB), визуализира мишите антитела чрез
кафява утайка.
• Вторият субстратен хромоген (Fast Red) визуализира заешките антитела чрез червена утайка.
• Hematoxylin (синьо) контраоцветяване позволява визуализация на клетъчните ядра.
Употребата на ChromoPlex 1 Dual Detection заедно с автоматизираната система BOND намалява възможността от човешка
грешка и присъщата изменчивост в резултат на отделно разреждане на реактиви, ръчно пипетиране и прилагане на реактиви.
Предоставени реактиви
Предоставените реактиви са достатъчни за 25 отделни оцветявания с BOND или за максимум от 100 предметни стъкла.
За да достигнете максимум 100 предметни стъкла с тази система за откриване, предметните стъкла трябва да бъдат
обработвани в количества от по 4 или повече стъкла, за група оцветени предметни стъкла. Обработката в количества по-малки
от 4 ще доведе до по-малко оцветени предметни стъкла.
1. Peroxide Block (15 mL) водороден пероксид 3-4%.
2. Polymer mHRP (15 mL) поли-HRP анти-миши, съдържащ 10% (v/v) животински серум в трометамин-буфериран физиологичен
разтвор и 0,1% ProClin™
3. Polymer rAP (15 mL) Poly-AP анти-заешки, съдържащ 10% (v/v) животински серум в трометамин-буфериран физиологичен
разтвор и 0,09% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2 mL) 66 mM 3,3'-диамонобензидин тетрахидрохлорид хидрат в стабилизиращ разтвор.
5. DAB Part B (35 mL) ≤0,1% (v/v) водороден пероксид в стабилизиращ разтвор.
6. Активатор Red Part A (5,5 mL), съдържащ 0,5% ProClin™ 950.
7. Субстрат Red Part B (1,0 mL).
8. Субстрат Red Part C (1,0 mL).
9. Буферен разтвор Red Part D (35 mL), съдържащ 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9477 (15 mL) <0,1% Hematoxylin.
Разреждане и смесване
ChromoPlex 1 Dual Detection е оптимизиран за използване със системата BOND.
Не се изисква възстановяване, смесване, разреждане или титриране на тези реактиви.
Необходими, но непредоставени материали
Микроскопски препарати, съвместими с ChromoPlex 1 Dual Detection (вж. Предпазни мерки).
Вижте „Употреба на реактиви BOND" във Вашата документация за потребителя на BOND за пълен списък от материалите,
необходими за третиране на спесимени и имунохистохимично оцветяване, използвайки системата BOND.
950.
DS9477
Page 33