Προβλεπόμενη Χρήση - Leica BIOSYSTEMS DS9477 Mode D'emploi

ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND
Αρ. καταλόγου: DS9477
Προβλεπόμενη χρήση
Το παρόν σύστημα ανίχνευσης προορίζεται για διαγνωστική χρήση in vitro.
Το ChromoPlex 1 Dual Detection είναι ένα συζευγμένο σύστημα αντισωμάτων πολυμερικού συνδετικού υπεροξειδάσης αγριοραπανιού
(HRP) και πολυμερικού συνδετικού αλκαλικής φωσφατάσης (AP), χωρίς βιοτίνη, για την ανίχνευση των συνδεδεμένων στον ιστό,
κύριων αντισωμάτων IgG σε ποντίκια και κουνέλια. Προορίζεται για τις περιοχές χρώσης ιστού μονιμοποιημένου με φορμόλη και
ενσωματωμένου με παραφίνη στο αυτοματοποιημένο σύστημα BOND (περιλαμβάνει το σύστημα Leica BOND-MAX και το σύστημα
Leica BOND-III).
Η κλινική ερμηνεία τυχόν χρώσης ή απουσίας της πρέπει να συνδυαστεί με μορφολογικές εξετάσεις. Οι κατάλληλοι οροί ελέγχου πρέπει
να αξιολογηθούν στα πλαίσια του κλινικού ιστορικού του ασθενούς και άλλων διαγνωστικών εξετάσεων από ειδικευμένο παθολόγο.
Το ChromoPlex 1 Dual Detection πρέπει να χρησιμοποιηθεί με τη βέλτιστη εργαστηριακή πρακτική για τη χρήση των ορών ελέγχου
ιστού. Για λόγους διασφάλισης, τα εργαστήρια πρέπει να χρωματίσουν κάθε δείγμα του ασθενούς σε συνδυασμό με θετικούς, αρνητικούς
και άλλους ειδικούς ορούς ελέγχου ιστού, όπως απαιτείται.
Περίληψη και Επεξήγηση
Μπορούν να χρησιμοποιηθούν ανοσοϊστοχημικές τεχνικές για την ένδειξη της παρουσίας αντιγόνων σε ιστό και κύτταρα (ανατρέξτε στην
ενότητα «Χρήση αντιδραστηρίων BOND» της τεκμηρίωσης χρήστη BOND).
Το ChromoPlex 1 Dual Detection χρησιμοποιεί μια πρωτότυπη τεχνολογία ελεγχόμενου πολυμερισμού για τη σύνθεση συζευγμένων
αντισωμάτων πολυμερικού συνδετικού HRP και συνδετικού AP. Το σύστημα ανίχνευσης αποφεύγει τη χρήση στρεπταβιδίνης και βιοτίνης
και, επομένως, εξαλείφει τη μη ειδική χρώση που οφείλεται σε ενδογενή βιοτίνη.
Το ChromoPlex 1 Dual Detection λειτουργεί ως εξής:
• Το δείγμα επωάζεται με υπεροξείδιο του υδρογόνου για διακοπή της δραστηριότητας της ενδογενούς υπεροξειδάσης.
• Εφαρμόζεται ένα ειδικό κοκτέιλ κύριων αντισωμάτων ποντικιού και κουνελιού που παρέχεται από τον χρήστη.
• Το αντιδραστήριο Poly-HRP IgG εντοπίζει τα αντισώματα ποντικιού.
• Το αντιδραστήριο Poly-AP IgG εντοπίζει τα αντισώματα κουνελιού.
• Το πρώτο χρωμογόνο του υποστρώματος, 3,3'-διαμινοβενζιδινο-τετραϋδροχλωρίδιο ένυδρο (DAB), οπτικοποιεί τα αντισώματα του
ποντικιού δημιουργώντας ένα καστανό ίζημα.
• Το δεύτερο χρωμογόνο του υποστρώματος, (Fast Red), οπτικοποιεί τα αντισώματα του κουνελιού δημιουργώντας ένα ερυθρό ίζημα.
• Η αντίχρωση αιματοξυλίνης (μπλε) επιτρέπει την οπτικοποίηση των πυρήνων των κυττάρων.
Χρησιμοποιώντας το ChromoPlex 1 Dual Detection σε συνδυασμό με το αυτοματοποιημένο σύστημα BOND, μειώνεται το ενδεχόμενο
ανθρώπινου λάθους και εγγενούς μεταβλητότητας που προκαλείται από τη μεμονωμένη αραίωση αντιδραστηρίων, τη χειροκίνητη λήψη
με πιπέτα και την εφαρμογή αντιδραστηρίων.
Αντιδραστήρια που Παρέχονται
Τα αντιδραστήρια που παρέχονται επαρκούν για 25 ξεχωριστές εξετάσεις χρώσης BOND ή έως και 100 πλάκες.
Για την επίτευξη έως και 100 πλακών από αυτό το σύστημα ανίχνευσης, οι πλάκες πρέπει να τοποθετηθούν σε παρτίδες των 4
ή περισσότερων τεμαχίων, σύμφωνα με τη διάταξη χρώσης πλακών. Η χρήση παρτίδων με λιγότερες από 4 πλάκες θα έχει ως
αποτέλεσμα τη χρώση λιγότερων πλακών.
1. Peroxide Block (15 mL) 3-4% Υπεροξείδιο του υδρογόνου.
2. Polymer mHRP (15 mL) Αντίσωμα ποντικιού Poly-HRP που περιέχει 10% (κ.ό.) ζωικό ορό σε ρυθμιστικό διάλυμα Tris και 0,1%
ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (15 mL) Αντίσωμα κουνελιού Poly-AP που περιέχει 10% (κ.ό.) ζωικό ορό σε ρυθμιστικό διάλυμα Tris και 0,09% ProClin™
950.
4. DAB Part 1 (2 mL) 66 mM 3,3'-διαμινοβενζιδινο-τετραϋδροχλωρίδιο ένυδρο σε σταθεροποιητικό διάλυμα.
5. DAB Part B (35 mL) ≤0,1% (κ.ό.) Υπεροξείδιο του υδρογόνου σε σταθεροποιητικό διάλυμα.
6. Red Part A (5.5 mL) Ενεργοποιητής που περιέχει 0,5% ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Υπόστρωμα.
8. Red Part C (1.0 mL) Υπόστρωμα.
9. Red Part D (35 mL) Ρυθμιστικό διάλυμα που περιέχει 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9477 (15 mL) <0,1% Αιματοξυλίνη.
Αραίωση και Ανάμειξη
Το ChromoPlex 1 Dual Detection είναι βελτιστοποιημένο για χρήση στο σύστημα BOND.
Δεν απαιτείται ανασύνθεση, ανάμειξη, αραίωση ή τιτλοδότηση αυτών των αντιδραστηρίων.
Υλικά Που Απαιτούνται Αλλά Δεν Παρέχονται
Μέσο στερέωσης συμβατό με το ChromoPlex 1 Dual Detection (ανατρέξτε στις «Προφυλάξεις»).
Ανατρέξτε στην ενότητα «Χρήση αντιδραστηρίων BOND» της τεκμηρίωσης χρήστη για το BOND για την πλήρη λίστα των υλικών που
απαιτούνται για την επεξεργασία δειγμάτων και την ανοσοϊστοχημική χρώση με τη χρήση του συστήματος BOND.
DS9477
Page 21