Beoogd Gebruik - Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi

BOND Polymer Refine Detection
Catalogusnr: DS9800

Beoogd gebruik

Dit detectiesysteem is voor gebruik bij in vitro diagnostiek.
BOND Polymer Refine Detection is een biotinevrij, polymeer-HRP-linker-antilichaam-conjugaatsysteem (HRP is
mierikswortelperoxidase) voor de detectie van weefselgebonden muizen- en konijnen-IgG en een aantal primaire muizen-IgM-
antilichamen. Het is bedoeld voor de kleuring van coupes van met formaline gefixeerd, in paraffine ingebed weefsel op het
geautomatiseerde BOND-systeem (waaronder het Leica BOND-MAX-systeem en het Leica BOND-III-systeem).
De klinische interpretatie van een kleuring of afwezigheid hiervan moet worden aangevuld met morfologische studies en
de juiste controles. Ook moeten er evaluaties worden gedaan binnen de context van de klinische voorgeschiedenis van de
patiënt en andere diagnostische tests die door een bevoegd patholoog zijn verricht.
De BOND Polymer Refine Detection Kit moet met de beste laboratoriumpraktijken worden gebruikt bij de toepassing van
weefselcontroles. Voor de kwaliteitsborging moeten laboratoria elk patiëntenmonster samen met positieve, negatieve en
andere toepasselijke weefselspecifieke controles kleuren.
Samenvatting en toelichting
Immunohistochemische technieken kunnen worden gebruikt voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen in weefsel en cellen
(zie "Het gebruik van BOND-reagentia" in de gebruikersdocumentatie behorende bij BOND).
BOND Polymer Refine Detection maakt gebruik van een nieuwe gecontroleerde polymerisatietechniek voor de bereiding van
polymeer-HRP-linker-antilichaam-conjugaten. Het detectiesysteem vermijdt het gebruik van streptavidine en biotine, waardoor geen
niet-specifieke kleuring als gevolg van endogeen biotine optreedt.
BOND Polymer Refine Detection werkt als volgt:
• het monster wordt geïncubeerd met waterstofperoxide om de endogene peroxidase-activiteit te doven,
• er wordt een door de gebruiker geleverd specifiek primair antilichaam aangebracht,
• het Post Primary IgG-linkerreagens lokaliseert muizenantilichamen,
• het poly-HRP-IgG-reagens lokaliseert konijnenantilichamen,
• het substraatchromogeen, 3,3'- diaminobenzidinetetrahydrochloridehydraat (DAB), visualiseert het complex door middel van een
bruin precipitaat,
• door tegenkleuring met hematoxyline (blauw) worden de celkernen zichtbaar.
Het gebruik van BOND Polymer Refine Detection in combinatie met het geautomatiseerde BOND-systeem (waaronder het
Leica BOND-MAX-systeem en het Leica BOND-III-systeem) verkleint zowel de kans op menselijke fouten als de inherente
variabiliteit, voortkomend uit het afzonderlijk verdunnen van reagentia, het handmatig pipetteren en het toevoegen van de
reagentia.
Geleverde reagentia
Voldoende reagentia voor 200–300 tests
• Peroxide Block (30 ml) 3–4% (vol./vol.) waterstofperoxide,
• Post Primary (30 ml) konijnen-antimuizen-IgG (<10 μg/ml) in 10% (vol./vol.) dierenserum in tris-gebufferde zoutoplossing/0,1%
ProClin™ 950,
• Polymer (30 ml) anti-konijnen-poly-HRP-IgG (<25 μg/ml), dat 10% (vol./vol.) dierenserum in tris-gebufferde zoutoplossing/0,1%
ProClin™ 950 bevat,
• DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM 3,3'-diaminobenzidinetetrahydrochloridehydraat in een stabilisatoroplossing,
• DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (vol./vol.) waterstofperoxide in een stabilisatoroplossing,
• DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (vol./vol.) waterstofperoxide in een stabilisatoroplossing,
• Hematoxylin (30 ml) <0,1% hematoxyline.
Verdunnen en mengen
BOND Polymer Refine Detection is geoptimaliseerd voor gebruik op het geautomatiseerde BOND-systeem (waaronder het Leica
BOND-MAX-systeem en het Leica BOND-III-systeem). Reconstitutie, menging, verdunning of titratie van deze reagentia is niet nodig.
Benodigde, maar niet meegeleverde materialen
Zie "BOND-reagentia gebruiken" in uw BOND-gebruikersdocumentatie voor een volledige lijst van de materialen die nodig zijn voor de
behandeling en immunohistochemische kleuring van monsters met behulp van het geautomatiseerde BOND-systeem (waaronder het
Leica BOND-MAX-systeem en het Leica BOND-III-systeem).
Opslag en stabiliteit
Bewaren bij 2–8 °C. Niet bevriezen. Niet gebruiken na de vervaldatum die op het etiket op het handvat van de cassette is aangegeven.
Direct na gebruik weer bij 2–8 °C opslaan.
Er zijn geen duidelijke tekenen die op instabiliteit van dit product wijzen, daarom moeten gelijktijdig met onbekende monsters
positieve en negatieve controles worden gemeten (zie "Kwaliteitscontrole" in de rubriek "Het gebruik van BOND-reagentia" in de
gebruikersdocumentatie behorende bij BOND).
Neem onmiddellijk contact op met uw lokale distributeur of het regionale kantoor van Leica Biosystems wanneer u een
onverwachte kleuring waarneemt die niet kan worden verklaard door variaties in de laboratoriumprocedures en u vermoedt dat er
een probleem is met het detectiesysteem.
Andere dan de hierboven genoemde opslagcondities moeten door de gebruiker worden geverifieerd .
1
Page 20
DS9800