Leica BIOSYSTEMS DS9477 Mode D'emploi page 24

ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND
Katalognummer.: DS9477
Tilsigtet anvendelse
Dette detektionssystem er beregnet til in vitro-diagnostik.
ChromoPlex 1 Dual Detection er et biotinfrit antistofkonjugatsystem indeholdende polymerisk peberrod-peroxidase (HRP)-linker og
polymerisk basisk fosfatase (AP)-linker til detektion af vævsbundne primære IgG-antistoffer fra mus og kaniner. Det er beregnet til
farvning af sektioner af formalinfikseret paraffinindlejret væv på det automatiserede BOND-system (herunder Leica BOND-MAX system
og Leica BOND-III system).
Klinisk fortolkning af tilstedeværelse eller fravær af farvning skal komplementeres med morfologiske undersøgelser. Passende kontroller
skal evalueres i sammenhæng med patientens kliniske historie og andre diagnostiske test af en uddannet patolog.
ChromoPlex 1 Dual Detection skal anvendes ifølge bedste laboratoriepraksis for brug af vævskontroller. Som en sikkerhed skal
laboratorierne farve alle patientprøver sammen med positive, negative og andre vævspecifikke kontroller efter behov.
Resumé og forklaring
Immunhistokemiske teknikker kan anvendes til at påvise tilstedeværelse af antigener i væv og celler (se "Anvendelse af BOND-
reagenser" i din BOND-brugerdokumentation).
ChromoPlex 1 Dual Detection bruger en helt ny, kontrolleret polymeriseringsteknologi til at fremstille polymeriske antistofkonjugater af
HRP-linker og AP-linker. Detektionssystemet undgår brug af streptavidin og biotin og eliminerer dermed ikke-specifik farvning som følge
af endogent biotin.
ChromoPlex 1 Dual Detection virker på følgende måde:
• Prøven inkuberes med hydrogenperoxid for at undertrykke endogen peroxidaseaktivitet.
• Det tilføres en brugerleveret specifik cocktail af primære antistoffer fra mus og kaniner.
• Poly-HRP IgG-reagens lokaliserer museantistoffer.
• Poly-AP IgG-reagens lokaliserer kaninantistoffer.
• Det første substrat-kromogen, 3,3'-diaminobenizidin-tetrahydrochlorid hydrat (DAB), visualiserer museantistoffer via et brunt bundfald.
• Det andet substrat-kromogen, (Fast Red), visualiserer kaninantistoffer via et rødt bundfald.
• Kontrastfarvning med hæmatoxylin (blå) tillader visualisering af cellekerner.
Anvendelse af ChromoPlex 1 Dual Detection i kombination med det automatiserede BOND-system reducerer muligheden for
menneskelige fejl og iboende variabilitet som følge af individuel reagensfortynding, manuel pipettering og reagenstilsætning.
Leverede reagenser
De medfølgende reagenser rækker til 25 individuelle BOND-farvninger eller et maksimum på 100 præparater.
For at få de maksimale 100 præparater ud af dette detektionssystem skal man samle præparater i batches på 4 eller mere ifølge
præparatfarvningsenheden. Samling i batches på mindre end fire vil resultere i færre farvede præparater.
1. Peroxide Block (15 mL) 3-4 % hydrogenperoxid.
2. Polymer mHRP (15 mL) Poly-HRP anti-mus indeholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvand og 0,1 %
3. Polymer rAP (15 mL) Poly-AP anti-kanin indeholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvand og 0,09 % ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2 mL) 66 mM 3,3'-diaminobenzidin-tetrahydrochlorid hydrat i en stabilisatoropløsning.
5. DAB Part B (35 mL) ≤0,1 % (v/v) hydrogenperoxid i en stabilisatoropløsning.
6. Red Part A (5.5 mL) Aktivator indeholdende 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) Bufferopløsning indeholdende 0,5 % ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9477 (15 mL) <0,1 % hæmatoxylin.
Fortynding og blanding
ChromoPlex 1 Dual Detection er optimeret til brug på BOND-systemet.
Rekonstitution, blanding, fortynding eller titrering af disse reagenser er ikke nødvendigt.
Nødvendige materialer, der ikke medfølger
Monteringsmedium, som er kompatibelt med ChromoPlex 1 Dual Detection (se Forholdsregler).
Se "Anvendelse af BOND-reagenser" i din brugerdokumentation for BOND, hvor der findes en komplet liste over de materialer, der skal
bruges til prøvebehandling og immunhistokemisk farvning ved hjælp af BOND-systemet.
Opbevaring og stabilitet
Opbevares ved 2-8 °C Må ikke nedfryses. Må ikke anvendes efter den udløbsdato, der er angivet på etiketten på bakkens håndtag. Skal
sættes på køl igen ved 2-8 °C straks efter brug.
Dette produkt udviser ingen åbenlyse tegn på ustabilitet; der skal derfor køres positive og negative kontroller samtidig med ukendte
prøver (se "Kvalitetskontrol" i afsnittet "Anvendelse af BOND-reagenser" i din BOND-brugerdokumentation).
Hvis der observeres uventet farvning, der ikke kan forklares ved variationer i laboratorieprocedurer, og der er mistanke om et problem
ved detektionssystemet, skal du straks kontakte din lokale distributør eller Leica Biosystems' regionskontor.
Andre opbevaringsbetingelser end de ovenfor angivne skal verificeres af brugeren
DS9477
Page 24
.
1
ProClin™ 950.