Leica BIOSYSTEMS DS9477 Mode D'emploi page 29

ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND
Catalog No: DS9477
Tiltenkt bruk
Dette deteksjonssystemet er for bruk i in vitro diagnostikk.
ChromoPlex 1 Dual Detection er et biotinfritt antistoff-konjugat-system som inneholder polymerisk pepperrot-peroksidase (HRP)-
bindinger og polymerisk basisk fosfatase (AP)-bindinger til deteksjon av vevsbundne primære IgG-antistoffer fra mus og kaniner. Det
er beregnet til farging av seksjoner av formalinfiksert parafininnstøpt vev på det automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-
MAX-systemet og Leica BOND-III-systemet).
Klinisk tolkning av enhver fargedannelse eller fravær av slik fargedannelse bør suppleres med morfologiske studier. Egnede kontroller
må vurderes i sammenheng med pasientens sykehistorie og andre diagnostiske tester av kvalifisert patolog.
ChromoPlex 1 Dual Detection må brukes i samsvar med korrekt laboratoriepraksis for bruk i vevskontroll. Som en ekstra sikkerhet, bør
laboratoriene farge alle pasientprøver sammen med positive, negative og andre vevspesifikke kontroller etter behov.
Sammendrag og forklaring
Immunohistokjemiske teknikker kan brukes til å demonstrere tilstedeværelse av antigener i vev og celler (se "Bruk av BOND-reagenser"
i din BOND-brukerdokumentasjon).
ChromoPlex 1 Dual Detection bruker en helt ny, kontrollert polymeriseringsteknologi til å produsere polymeriske antistoffkonjugater med
HRP-bindinger og AP-bindinger. Deteksjonssystemet unngår bruk av streptavidin og biotin, og eliminerer dermed uspesifikk farging på
grunn av endogent biotin.
ChromoPlex 1 Dual Detection fungerer på følgende måte:
• Prøven inkuberes med hydrogenperoksid for å dempe endogen peroksidaseaktivitet.
• Det tilføres en brukerlevert spesifikk cocktail av primære mus- og kanin-antistoffer.
• Poly-HRP IgG-reagens lokaliserer muse-antistoffer.
• Poly-AP IgG-reagens lokaliserer kanin-antistoffer.
• Det første substrat-kromogenet, 3,3 '-diaminobenizidintetrahydroklorid hydrat (DAB), synliggjør muse-antistoffer gjennom et brunt
bunnfall.
• Det andre substrat-kromogenet, (Fast Red), synliggjør kanin-antistoffer gjennom et rødt bunnfall.
• Kontrastfarging med hematoxylin (blå) muliggjør visualisering av cellekjerner.
Bruk av ChromoPlex 1 Dual Detection i kombinasjon med det automatiserte BOND-systemet reduserer muligheten for menneskelige feil
og iboende variabilitet på grunn av individuell reagensfortynning, manuell pipettering og reagenstilsetning.
Medfølgende reagenser
De medfølgende reagensene er nok til 25 individuelle BOND-farginger eller maksimalt 100 preparater.
For å få maksimalt 100 preparater ut av dette deteksjonssystemet, må preparatene prepareres i grupper på 4 eller mer i et
rekkefølgesystem. Farging av preparat grupper på mindre enn 4 vil resultere i færre fargete preparater totalt.
1. Peroxide Block (15 mL) 3 - 4 % hydrogenperoksid.
2. Polymer mHRP (15 mL) Poly-HRP anti-mus inneholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvann og 0,1 %
3. Polymer rAP (15 mL) Poly-AP anti-kanin inneholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvann og 0,09 % ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2 mL) 66 mM 3,3'-diaminobenzidintetrahydroklorid hydrat i en stabilisatorløsning.
5. DAB Part B (35 mL) ≤0,1% (v/v) hydrogenperoksid i en stabilisatorløsning.
6. Red Part A (5.5 mL) Aktivator inneholdende 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) Bufferløsning inneholdende 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9477 (15 mL) <0,1% hematoksylin.
Fortynning og blanding
ChromoPlex 1 Dual Detection er optimalisert for bruk på BOND -systemet.
Rekonstituering, blanding, fortynning eller titrering av disse reagensene er ikke nødvendig.
Nødvendige materialer som ikke medfølger
Monteringsmedia, som er kompatibelt med ChromoPlex 1 Dual Detection (se Forholdsregler).
Se "Bruk av BOND-reagenser" i BOND-brukerdokumentasjonen for en komplett liste over materialer som er nødvendige til behandling
av prøvene og immunohistokjemisk farging ved bruk av BOND-systemet.
Oppbevaring og stabilitet
Oppbevares ved 2-8 °C. Må ikke fryses. Må ikke brukes etter utløpsdatoen som er angitt på etiketten på brettets håndtak. Må
umiddelbart nedkjøles til 2 – 8 °C etter hver bruk.
Dette produktet viser ingen tydelige tegn til ustabilitet; det skal derfor utføres positive og negative kontroller samtidig med ukjente prøver
(se "Kvalitetskontroll" i avsnittet "Bruk av BOND-reagenser" i BOND-brukerdokumentasjon).
Hvis det observeres uventet farging som ikke kan forklares med variasjoner i laboratorieprosedyrer, og det er mistanke om et problem
ved deteksjonssystemet, kontakt straks din lokale forhandler eller Leica Biosystems' regionskontor.
Andre oppbevaringsbetingelser enn de som er nevnt ovenfor må verifiseres av brukeren
ProClin™
.
1
950.
DS9477
Page 29