Leica BIOSYSTEMS DS9477 Mode D'emploi page 31

ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND
Katalog No: DS9477
Kullanım Amacı
Bu saptama sistemi in vitro diagnostik kullanım içindir.
ChromoPlex 1 Dual Detection, dokuya-bağlı fare ve tavşan IgG primer antikorlarının saptanmasına yönelik biyotin içermeyen, polimerik
horseradish (bayır turpu) peroksidaz (HRP) bağlayıcı ve polimerik alkalen fosfataz (AP) bağlayıcı bir antikor konjugat sistemidir. BOND
otomatik sisteminde (Leica BOND-MAX sistemi ve Leica BOND-III sistemini kapsar) formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü doku
kesitlerini boyamak üzere tasarlanmıştır.
Herhangi bir boyanmanın veya boyanma olmamasının klinik yorumu morfolojik çalışmalarla desteklenmelidir. Uygun kontroller, Hastanın
klinik öyküsü ve diğer tanısal testler kapsamında uzman bir patolog tarafından değerlendirilmelidir.
Doku kontrollerinin kullanılmasında, ChromoPlex 1 Dual Detection iyi laboratuvar uygulaması (laboratory best practice) ile birlikte
kullanılmalıdır. Emin olmak için, laboratuvarlar her hasta örneğini pozitif, negatif ve gerektiği gibi diğer dokuya özgü kontrollerle
boyamalıdır.
Özet ve Açıklama
Doku ve hücrelerde antijenlerin varlığını göstermek amacıyla immünhistokimyasal teknikler kullanılabilir (BOND kullanıcı belgelerinizde,
"BOND Reaktiflerinin Kullanılması" bölümüne bakın).
ChromoPlex 1 Dual Detection polimerik HRP-bağlayıcı ve AP-bağlayıcı antikor konjugatlarını hazırlamak için yeni bir kontrollü
polimerizasyon teknolojisi kullanmaktadır. Saptama sistemi streptavidin ve biotin kullanımından kaçınır ve böylelikle, endojen biotin
kaynaklı non-spesifik boyanmayı ortadan kaldırır.
ChromoPlex 1 Dual Detection aşağıdaki şekilde çalışır:
• Numune, endojen peroksidaz aktivitesini gidermek için hidrojen peroksit ile inkübe edilir.
• Kullanıcı tarafından temin edilen spesifik primer fare ve tavşan antikoru kokteyli uygulanır.
• Poli-HRP IgG reaktifi fare antikorlarının yerini belirler.
• Poli-HRP IgG reaktifi tavşan antikorlarının yerini belirler.
• İlk substrat kromojen, 3,3'-Diaminobenizidin tetrahidroklorür hidrat (DAB), fare antikorlarının kahverengi bir presipitat olarak
görülmesini sağlar.
• İkinci substrat kromojen (Fast Red), tavşan antikorlarının kırmızı bir presipitat olarak görülmesini sağlar.
• Hematoksilen (mavi) ile karşıt boyama hücre çekirdeklerinin görülmesine olanak sağlar.
ChromoPlex 1 Dual Detection ile BOND otomatik sisteminin birlikte kullanılması, münferit reaktif dilüsyonu, manuel pipetleme ve reaktif
uygulamasından kaynaklanan insan hatası olasılığını ve doğal değişkenliği azaltır.
Verilen Reaktifler
Verilen reaktifler 25 ayrı BOND boyama serisi veya maksimum 50 slayt için yeterlidir.
Bu saptama sisteminde maksimum 50 slayda erişmek için slaytlar, Slayt Boyama Düzeneğine göre, 2'li veya daha fazla miktarlar halinde
gruplanmalıdır. 2'den daha az sayıda slayt gruplamak daha az boyanmış slayt elde etmeye sebep olur.
1. Peroxide Block (7.5 mL) % 3 - 4 Hidrojen peroksit.
2. Tris-tamponlu salin içerisinde %10 (v/v) hayvan serumu içeren Polymer mHRP (7.5 mL) Poli-HRP anti-fare ve %0.1 ProClin™ 950.
3. Tris-tamponlu salin içerisinde %10 (v/v) hayvan serumu içeren Polymer rAP (7.5 mL) Poli-AP anti-tavşan ve %0.09 ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3'-Stabilizör bir solüsyon içerisinde diaminobenzidin tetrahidroklorür hidrat.
5. DAB Part B (20 mL) ≤%0,1 (v/v) Stabilizör bir solüsyon içerisinde hidrojen peroksit.
6. Red Part A (5.5 mL) %0.5 ProClin™ 950 içeren aktivatör.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) %0.5 ProClin™ 950 içeren tampon solüsyon.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) < %0.1 Hematoksilen.
Dilüsyon ve Karıştırma
ChromoPlex 1 Dual Detection BOND sisteminde kullanılmak üzere optimize edilmiştir.
Bu reaktiflerin yeniden hazırlanması, karıştırılması, dilüsyonu veya titrasyonu gerekmez.
Gereken Fakat Verilmeyen Materyaller
ChromoPlex 1 Dual Detection ile uyumlu kapama maddeleri (bkz. Önlemler).
BOND sistemini kullanarak numune işleme ve immünhistokimyasal boyama için gereken materyallerin tam listesi için BOND kullanıcı
belgelerinizdeki "BOND Reaktiflerinin Kullanılması" bölümüne bakın.
Saklama ve Stabilite
2–8 °C sıcaklıkta saklayın. Dondurmayın. Tepsi tutacağının etiketinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Kullandıktan
hemen sonra 2–8 °C sıcaklık ortamına geri döndürün.
Bu ürünün instabilitesini gösterecek herhangi bir belirgin işaret yoktur; bu nedenle bilinmeyen numunelerde pozitif ve negatif kontroller eş
zamanlı olarak yürütülmelidir (BOND kullanıcı belgelerinizdeki "BOND Reaktiflerinin Kullanılması", «Kalite Kontrol» kısmına bakın).
Laboratuvar prosedürlerindeki varyasyonlarla açıklanamayan beklenmedik bir boyanma gözlenirse ve saptama sisteminde bir sorundan
şüphelenilirse, yerel distribütörünüzle veya Leica Biosystems bölge ofisiyle hemen irtibat kurun.
Yukarıda belirtilenlerin dışındaki saklama koşulları, kullanıcı1 tarafından doğrulanmalıdır.
DS9477
Page 31