Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi page 41

BOND Polymer Refine Detection
Katalógové č.: DS9800
Zamýšľané použitie
Tento detekčný systém je určený na diagnostické použitie in vitro.
BOND Polymer Refine Detection je systém konjugátu protilátky s mostíkom polymérovej chrenovej peroxidázy (HRP) bez biotínu na
detekciu tkanivovo viazaného IgG myší a králikov a niektorých primárnych protilátok IgM myší. Tento systém je určený na farbenie rezov
tkaniva zaliatych do parafínu fixovaných formalínom v automatizovanom systéme BOND (vrátane systémov Leica BOND-MAX a Leica
BOND-III).
Klinická interpretácia akéhokoľvek zafarbenia alebo jeho neprítomnosti musí byt doplnená morfologickým preskúmaním a príslušnými
kontrolami. Musia musia vyhodnotiť v kontexte klinickej anamnézy pacienta a iných diagnostických testov vykonávaných kvalifikovaným
patológom.
Súprava BOND Polymer Refine Detection Kit sa musí pri kontrolách tkaniva používať v rámci osvedčených laboratórnych postupov.
V záujme istoty majú laboratória farbiť každú pacientsku vzorku spolu s pozitívnou, negatívnou a inou kontrolou špecifickým tkanivom
podľa potreby.
Zhrnutie a vysvetlenie
Imunohistochemické techniky možno použiť na preukázanie prítomnosti antigénov v tkanivách a bunkách (pozrite si časť „Používanie
činidiel BOND" v používateľskej dokumentácii k systému BOND).
V systéme BOND Polymer Refine Detection sa využíva nová technológia riadenej polymerizácie na prípravu konjugátov protilátky
s mostíkom polymérovej HRP. V detekčnom systéme sa zamedzuje použitiu streptavidínu a biotínu, čím sa eliminuje nešpecifické
zafarbenie v dôsledku endogénneho biotínu.
Systém BOND Polymer Refine Detection funguje nasledujúcim spôsobom:
• Vzorka sa inkubuje s peroxidom vodíka, aby sa oslabila aktivita endogénnej peroxidázy.
• Aplikuje sa špecifická primárna protilátka dodaná používateľom.
• Premosťovacie činidlo Post Primary IgG lokalizuje myšie protilátky.
• Činidlo Poly-HRP IgG lokalizuje králičie protilátky.
• Substrátový chromogén, 3,3'-diaminobenizidín tetrahydrochlorid hydrát (DAB), vizualizuje komplex prostredníctvom hnedej zrazeniny.
• Kontrastné farbenie prípravkom Hematoxylin (modré) umožňuje vizualizáciu bunkových jadier.
Použitie systému BOND Polymer Refine Detection v kombinácii s automatizovaným systémom BOND znižuje možnosť ľudskej chyby a
inherentnej variability vyplývajúcej z individuálneho riedenia činidiel, manuálneho pipetovania a aplikácie činidiel.
Dodané činidlá
Činidlá postačujú na 200 – 300 testov
1. Peroxide Block (30 ml) 3 – 4 % (v/v) peroxid vodíka.
2. Prípravok Post Primary (30 ml) s králičou protilátkou proti myšaciemu IgG (< 10 μg/ml) v 10 % (v/v) zvieracom sére v tris-pufrovanom
fyziologickom roztoku/0,1 % prípravku ProClin™ 950.
3. Prípravok Polymer (30 ml) s králičou protilátkou proti Poly-HRP-IgG (< 25 μg/ml) s obsahom 10 % (v/v) zvieracieho séra v
tris-pufrovanom fyziologickom roztoku/0,1 % prípravku ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM 3,3'-diaminobenzidín tetrahydrochlorid hydrát v roztoku stabilizátora.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1 % (v/v) peroxidu vodíka v roztoku stabilizátora.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1 % (v/v) peroxidu vodíka v roztoku stabilizátora.
7. Hematoxylin (30 ml) <0,1 % hematoxylínu.
Riedenie a miešanie
Systém BOND Polymer Refine Detection je optimalizovaný na používanie v systéme BOND. Rekonštitúcia, miešanie, riedenie ani
titrácia týchto činidiel nie sú potrebné.
Požadovaný nedodaný materiál
Úplný zoznam materiálov potrebných na prípravu vzorky a imunohistochemické zafarbenie pomocou systému BOND si pozrite v časti
„Používanie činidiel BOND" v používateľskej dokumentácii k systému BOND.
Uskladnenie a stabilita
Skladujte pri teplote 2 – 8 °C. Nezmrazujte. Nepoužívajte po uplynutí dátumu exspirácie uvedeného na štítku rukoväti tácky. Okamžite
po použití vráťte do teploty 2 – 8 °C.
Neexistujú evidentné známky signalizujúce nestabilitu tohto produktu, s neznámymi vzorkami sa preto musia súbežne testovať pozitívne
aj negatívne kontroly (pozrite si bod „Kontrola kvality" v časti „Používanie činidiel BOND" v používateľskej dokumentácii k systému
BOND).
Ak spozorujete neočakávané zafarbenie, ktoré nie je možné vysvetliť zmenami laboratórnych postupov a máte podozrenie, že ide o
problém detekčného systému, okamžite kontaktujte miestneho distribútora alebo regionálnu pobočku spoločnosti Leica Biosystems.
Iné než vyššie uvedené podmienky skladovania si vyžadujú validáciu používateľom .
1
DS9800
Page 40