BOND Polymer Refine Detection
N. catalogo: DS9800
Uso Previsto
Questo sistema di determinazione è destinato unicamente all'uso diagnostico in vitro.
BOND Polymer Refine Detection è un sistema coniugato di anticorpi linker di perossidasi di tafano polimeriche (HRP) senza biotina
per il riconoscimento delle IgG di topo e coniglio legate ai tessuti e di alcuni anticorpi primari IgM di topo. È destinato alle sezioni per la
colorazione di tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina nel sistema automatico BOND (include il sistema Leica BOND-MAX e il
sistema Leica BOND-III).
L'interpretazione clinica di qualsiasi colorazione o della sua assenza va integrata da studi morfologici e controlli adeguati.
I risultati devono essere valutati da un patologo qualificato, nell'ambito degli antecedenti clinici del paziente e di altri test diagnostici.
Il kit di rilevamento BOND Polymer Refine Detection Kit deve essere utilizzato seguendo la migliore pratica di laboratorio relativa ai
controlli dei tessuti. Per sicurezza, i laboratori devono colorare ciascun campione del paziente insieme ai controlli positivi, negativi o ad
altri controlli tessuto-specifici, secondo le necessità.
Sommario e Spiegazione
Le tecniche immunoistochimiche possono essere utilizzate per determinare la presenza di antigeni nei tessuti e nelle cellule (vedi
"Utilizzo dei reagenti BOND" nella documentazione BOND per l'utente).
BOND Polymer Refine Detection sfrutta una tecnologia di polimerizzazione innovativa per preparare i coniugati di anticorpi polimerici
linker HRP. Evitando il ricorso alla streptavidina e alla biotina, il sistema di rivelazione ovvia al fenomeno della colorazione non specifica
per effetto della biotina endogena.
BOND Polymer Refine Detection si basa sul seguente principio di funzionamento:
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Incubazione del campione con perossido di idrogeno per inibire l'attività perossidasica endogena.
•
Applicazione di un anticorpo specifico primario fornito dall'utente.
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Localizzazione degli anticorpi murini da parte del reagente post primario con linker IgG.
•
Localizzazione degli anticorpi di coniglio da parte del reagente IgG HRP polimerico.
•
Il complesso di substrato cromogeno 3,3'-Diaminobenzidina tetraidrocloruro idrato (DAB), visualizza il complesso tramite un
precipitato di color marrone.
•
La controcolorazione all'ematossilina (blu) permette la visualizzazione dei nuclei cellulari.
Il ricorso al BOND Polymer Refine Detection unitamente al sistema automatizzato BOND riduce la possibilità di errore umano e la
variabilità insita nelle operazioni manuali di diluizione del singolo reagente, pipettaggio e applicazione del reagente.
Reagenti Forniti
Reagenti sufficienti per 200–300 test
1. Peroxide Block (30 ml) perossido d'idrogeno al 3–4% (v/v).
2. Post Primary (30 ml) IgG di coniglio anti-topo (<10 μg/mL) in siero animale al 10% (v/v) in soluzione salina tamponata con Tris/
ProClin™ 950 allo 0,1%.
3. Polymer (30 ml) Poly-HRP-IgG anti-coniglio (<25 μg/mL) contenente siero animale al 10% (v/v) in soluzione salina tamponata con
Tris/ProClin™ 950 allo 0,1%.
4. DAB Part 1 (2.4 ml) 66 mM 3,3'-Diaminobenzidina tetraidrocloruro idrato, in soluzione stabilizzante.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) perossido d'idrogeno in soluzione stabilizzante.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) perossido d'idrogeno in soluzione stabilizzante.
7. Hematoxylin (30 ml) ematossilina allo <0,1%.
Diluizione e Miscelazione
BOND Polymer Refine Detection è ottimizzato per l'uso con il sistema BOND. Non è necessario provvedere alla ricostituzione,
miscelazione, diluizione o titolazione di questi reagenti.
Materiale Necessario Non Fornito
Per un elenco completo dei materiali richiesti per il trattamento dei campioni e per la colorazione immunoistochimica tramite sistema
BOND, consultare la sezione "Utilizzo dei reagenti BOND" nella documentazione BOND per l'utente.
Conservazione e Stabilità
Conservare a 2–8 °C. Non congelare. Non utilizzare dopo la data di scadenza riportata sull'etichetta apposta sull'impugnatura del
vassoio. Riportare i reagenti ad una temperatura di 2–8 °C subito dopo l'uso.
Non esistono segni evidenti che indicano l'instabilità del prodotto. Si consiglia pertanto di eseguire simultaneamente controlli positivi
e negativi con campioni sconosciuti (consultare il paragrafo "Controllo di qualità" nella sezione "Utilizzo dei reagenti BOND" della
documentazione BOND per l'utente).
Qualora venga riscontrata una colorazione inattesa e tale da non poter essere giustificata con variazioni nelle procedure di laboratorio
e da motivare un sospetto di inefficienza del sistema di rivelazione, contattare immediatamente il distributore locale o la sede di zona di
Leica Biosystems.
Ogni condizione di conservazione diversa da quanto sopra prescritto dovrà essere preventivamente verificata dall'utente
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