Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi page 31

BOND Polymer Refine Detection
Nr. catalog: DS9800
Utilizare prevăzută
Acest sistem de detecție este destinat utilizării pentru diagnosticare in vitro.
BOND Polymer Refine Detection este un sistem conjugat de anticorpi fără biotină cu legătură de peroxidază de hrean (HRP) polimerică
pentru detectarea anticorpilor primari IgG de șoarece și IgM de iepure legați de țesuturi. Este prevăzut pentru colorația de secțiuni de
țesut fixat cu formalină, încorporat în parafină în sistemul automatizat BOND (include sistemul Leica BOND-MAX și sistemul Leica
BOND-III).
Interpretarea clinică a oricărei colorări sau a absenței acesteia trebuie completată cu studii morfologice și controale adecvate.
Acestea trebuie evaluate în contextul istoricului clinic al pacientului și al altor teste de diagnostic de către un patolog calificat.
Kitul BOND Polymer Refine Detection trebuie utilizat în conjuncție cu bunele practici de laborator pentru utilizarea țesuturilor de control.
Pentru asigurare, laboratoarele trebuie să coloreze fiecare eșantion de la pacient în conjuncție cu țesuturi de control pozitive, negative
sau alte controale specifice, după cum este necesar.
Rezumat și explicație
Pot fi utilizate tehnici imunohistochimice pentru a demonstra prezența antigenilor în țesut și celule (a se vedea „Utilizarea reactivilor
BOND" din documentația de utilizare BOND).
BOND Polymer Refine Detection utilizează o tehnologie nouă de polimerizare controlată pentru prepararea conjugatelor de anticorp
de legătură HRP. Sistemul de detecție evită utilizarea streptavidinei și biotinei, eliminând astfel colorația nespecifică din cauza biotinei
endogene.
BOND Polymer Refine Detection funcționează după cum urmează:
• Specimenul este incubat cu apă oxigenată pentru a stinge activitatea peroxidazei endogene.
• Se aplică un anticorp primar furnizat de utilizator.
• Reactivul de legătură Post Primary IgG localizează anticorpii de șoarece.
• Reactivul Poly-HRP IgG localizează anticorpii de iepure.
• Substratul cromogen, tetraclorură hidrată de 3,3'-diaminobenizidină (DAB), vizualizează complexul printr-un precipitat cafeniu.
• Contracolorația cu Hematoxylin (albastru) permite vizualizarea nucleelor celulelor.
Utilizarea BOND Polymer Refine Detection, în combinație cu sistemul automat BOND, reduce posibilitatea producerii de erori umane și
variabilitatea inerentă care rezultă din diluția individuală a reactivului, pipetarea manuală și aplicarea reactivului.
Reactivi furnizați
Reactivi suficienți pentru 200-300 de teste
1. Peroxide Block (30 ml) 3-4% apă oxigenată.
2. Post Primary (30 ml) iepure anti șoarece IgG (<10 μg/ml) în 10% (v/v) ser animal în soluție salină tamponată cu trometamină/0,1%
ProClin™ 950.
3. Polimer (30 ml) anti-iepure Poly-HRP-IgG (<25μg/ml) conținând 10% (v/v) ser animal în soluție salină tamponată cu trometamină/
0,1% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM hidrat de tetraclorură de 3,3'-diaminobenzidină în soluție stabilizatoare.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) peroxid de hidrogen în soluție stabilizatoare.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) peroxid de hidrogen în soluție stabilizatoare.
7. Hematoxylin (30 ml) <0,1% Hematoxylin.
Diluare și amestecare
BOND Polymer Refine Detection este optimizat pentru utilizare pe sistemul BOND. Reconstituirea, amestecarea, diluarea sau titrarea
acestor reactivi nu sunt necesare.
Materiale necesare, dar care nu sunt furnizate
Consultați „Utilizarea reactivilor BOND" din documentația dumneavoastră de utilizare a sistemului BOND pentru o listă completă
a materialelor necesare pentru tratarea specimenelor și colorația imunohistochimică utilizând sistemul BOND.
Depozitare și stabilitate
A se depozita la 2-8 °C. A nu se congela. A nu se utiliza după data expirării indicată pe eticheta de pe mânerul tăvii. A se returna la
2-8 °C imediat după utilizare.
Nu există semne evidente care să indice instabilitatea acestui produs; prin urmare trebuie rulate controale pozitive și negative simultan
cu specimenele necunoscute (consultați „Controlul calității" în secțiunea "Utilizarea reactivilor BOND" din documentația dumneavoastră
de utilizare BOND).
Dacă se observă o colorație neașteptată care nu poate fi explicată prin variații în procedurile de laborator și se suspectează că există
o problemă la sistemul de detecție, contactați imediat distribuitorul local sau biroul regional al Leica Biosystems.
Alte condiții de depozitare decât cele specificate mai sus trebuie verificate de către utilizator .
1
DS9800
Page 30