Predvidena Uporaba - Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi

BOND Polymer Refine Detection
Kataloška št.: DS9800

Predvidena uporaba

Ta sistem za zaznavanje je namenjen diagnostični uporabi in vitro.
Izdelek BOND Polymer Refine Detection je sistem konjugata protitelesa ter polimerne hrenove peroksidaze (HRP) in povezovalnika za
zaznavanje mišjih in kunčjih primarnih protiteles IgG brez biotina ter nekaterih mišjih protiteles IgM, vezanih na tkivo. Namenjen je za
barvanje rezin tkiv, fiksiranih s formalinom in vstavljenih v parafin, na avtomatiziranem sistemu BOND (vključuje sistem Leica BOND-
MAX in sistem Leica BOND-III).
Klinično tolmačenje kakršnega koli obarvanja ali njegove odsotnosti morajo dopolnjevati morfološke študije in ustrezni kontrolni vzorci,
ki jih v okviru klinične anamneze bolnika in drugih diagnostičnih testov oceni usposobljen patolog.
Komplet BOND Polymer Refine Detection Kit je treba uporabljati skladno z dobro laboratorijsko prakso za uporabo tkivnih kontrol. Za
zagotovitev zanesljivosti morajo laboratoriji obarvati vzorec vsakega bolnika skupaj s pozitivno in negativno kontrolo ter po potrebi vsemi
drugimi kontrolami, specifičnimi za tkivo.
Povzetek in razlaga
Imunohistokemijske tehnike se lahko uporabijo za prikaz prisotnosti antigenov v tkivih in celicah (glejte »Uporaba reagentov BOND« v
priloženi dokumentaciji za uporabnike sistema BOND).
Izdelek BOND Polymer Refine Detection uporablja novo tehnologijo nadzorovane polimerizacije za pripravo konjugatov protiteles s HRP
in povezovalnikom. Pri sistemu za zaznavanje se ne uporabljata streptavidin in biotin, zato se izognemo nespecifičnem barvanju, ki je
posledica endogenega biotina.
Izdelek BOND Polymer Refine Detection deluje na naslednji način:
• Vzorec se inkubira v vodikovem peroksidu, da se zaustavi delovanje endogene peroksidaze.
• Uporabiti je treba primarno protitelo, ki ga zagotovi uporabnik.
• Post Primary povezovalni reagent za IgG lokalizira mišja protitelesa.
• Reagent Poly-HRP IgG lokalizira kunčja protitelesa.
• Kromogen za substrat, 3,3'-diaminobenizidin tetrahidroklorid hidrat (DAB), prikaže kompleks kot rjavo oborino.
• Nasprotno barvanje s Hematoxylinom (modro) omogoča vizualizacijo celičnih jeder.
Uporaba izdelka BOND Polymer Refine Detection skupaj z avtomatiziranim sistemom BOND zmanjša možnost človeške napake in
variabilnosti, ki sama po sebi izhaja iz redčenja posameznega reagenta, ročnega pipetiranja in nanosa reagenta.
Priloženi reagenti
Reagenti zadostujejo za 200–300 testov.
1. Peroxide Block (30 ml), 3–4-% (v/v) vodikov peroksid.
2. Post Primary (30 ml) kunčje protitelo proti mišjim IgG (< 10 μg/ml) v 10 % (v/v) živalskem serumu v fiziološki raztopini s pufrom
tris/0,1 % konzervansa ProClin™ 950.
3. Polymer (30 ml) protitelo proti kunčjim protitelesom Poly-HRP-IgG (< 25 μg/ml), ki vsebuje 10 % (v/v) živalskega seruma v fiziološki
raztopini s pufrom tris/0,1 % konzervansa ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM 3,3'-diaminobenzidin tetrahidroklorid hidrat v raztopini stabilizatorja.
5. DAB Part B (30 ml) ≤ 0,1-% (v/v) vodikov peroksid v raztopini stabilizatorja.
6. DAB Part B (30 ml) ≤ 0,1-% (v/v) vodikov peroksid v raztopini stabilizatorja.
7. Hematoxylin (30 ml) < 0,1-% hematoksilin.
Redčenje in mešanje
Izdelek BOND Polymer Refine Detection je optimiziran za uporabo na sistemu BOND. Rekonstitucija, mešanje, redčenje ali titracija teh
reagentov niso potrebni.
Potrebni materiali, ki niso priloženi
Za celoten seznam materialov, potrebnih za obdelavo vzorcev in imunohistokemijsko barvanje pri uporabi sistema BOND, glejte poglavje
»Uporaba reagentov BOND« v priloženi dokumentaciji za uporabnike sistema BOND.
Shranjevanje in stabilnost
Hraniti pri temperaturi 2–8 °C. Ne zamrzujte. Ne uporabljajte po datumu izteka roka uporabnosti, navedenem na oznaki na ročaju
pladnja. Takoj po uporabi ohladite na temperaturo 2–8 °C.
Ni očitnih znakov, ki bi nakazovali nestabilnost tega izdelka, zato morate hkrati z neznanimi vzorci testirati tudi pozitivne in negativne
kontrole (glejte »Kontrola kakovosti« v poglavju »Uporaba reagentov BOND« v uporabniški dokumentaciji za sistem BOND).
Če opazite nepričakovano barvanje, ki ga ni mogoče pojasniti z razlikami pri laboratorijskih postopkih, in če sumite na težavo s sistemom
za zaznavanje, se takoj obrnite na lokalnega distributerja ali regionalno pisarno družbe Leica Biosystems.
Uporabnik mora potrditi ustreznost pogojev shranjevanja, če se ti razlikujejo od zgoraj navedenih .
1
DS9800
Page 36