Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi page 33

BOND Polymer Refine Detection
Номер по каталогу: DS9800
Назначение
Данная система обнаружения предназначена для диагностики in vitro.
Система обнаружения BOND Polymer Refine Detection представляет собой не содержащую биотина систему для формирования
конъюгатов антител, в состав которой входит пероксидаза хрена (HRP), для обнаружения первичных антител IgG мыши
и кролика и некоторых первичных антител мыши IgM. Эта система предназначена для окрашивания срезов фиксированных
формалином и залитых в парафин тканей, которое проводится с использованием автоматизированной системы BOND
(включающей системы BOND-MAX и BOND-III компании Leica).
Клиническая интерпретация любого окрашивания или его отсутствия должна дополняться данными морфологических
исследований и соответствующих контролей.
Они должны оцениваться квалифицированным патогистологом с учетом анамнеза пациента и результатов других
диагностических исследований.
Система обнаружения BOND Polymer Refine Detection Kit должна использоваться в сочетании с передовыми методами работы
лабораторий в отношении применения тканей в качестве контроля. В целях гарантии лаборатории должны окрашивать каждый
образец, взятый у пациента, в сочетании с положительными и отрицательными контролями, а также тканями, использующимися
в качестве специфического контроля, насколько это необходимо.
Краткое изложение и пояснение
Иммуногистохимические методы могут использоваться для выявления антигенов в тканях и клетках (смотрите монографию
«Применение реактивов BOND» в документации пользователя BOND).
В системе обнаружения BOND Polymer Refine Detection используется новейшая контролируемая технология полимеризации,
которая позволяет готовить полимерные коньюгаты антител с HRP-линкером. Система обнаружения позволяет избежать
использования стрептавидина и биотина, следовательно, устраняет неспецифическое окрашивание, обусловленное эндогенным
биотином.
Система обнаружения BOND Polymer Refine Detection работает следующим образом:
• Образец инкубируется в присутствии пероксида водорода для того, чтобы подавить активность эндогенной пероксидазы.
• Используются специфические первичные антитела, которые предоставляются пользователем.
• Сшивающий реактив Post Primary IgG linker reagent локализует антитела мыши.
• Реактив Poly-HRP IgG локализует антитела кролика.
• Субстрат хромогена 3,3-диаминобензидина тетрагидрохлорид гидрат (DAB) делает комплекс видимым за счет образования
преципитата коричневого цвета.
• Гематоксилин Hematoxylin (синий), контрастирующий краситель, дает возможность визуализировать ядра клеток.
Применение системы BOND Polymer Refine Detection в сочетании с автоматизированной системой BOND снижает вероятность
человеческой ошибки и вариабельность, присущую процессам разведения отдельных реактивов, ручного пипетирования и
нанесения реактивов.
Реактивы, входящие в комплект поставки
Количество реактивов достаточно для 200-300 тестов.
1. Пероксидный блок Peroxide Block (30 млб): 3-4 % (о/о) пероксид водорода.
2. Реактив Post Primary (30 млб) для связывания антител мыши IgG (<10 мкг/млб) в трис-солевом буферном растворе,
содержащем 10 % (о/о) сыворотки животных и 0,1 % ProClin™ 950.
3. Реактив Polymer (30 млб) Anti-Rabbit Poly-HRP-IgG (<25 мкг/млб), содержащий 10 % (о/о) сыворотки животного в трис-солевом
буферном растворе и 0,1 % ProClin™ 950.
4. Часть 1 реактива DAB Part 1 (2,4 млб): 66 мМ 3,3-диаминобензидина тетрагидрохлорид гидрат в стабилизирующем буфере.
5. Часть B реагента DAB Part B (30 млб) ≤0,1 % (объем/объем) пероксид водорода в стабилизирующем буфере.
6. Часть B реагента DAB Part B (30 млб) ≤0,1 % (объем/объем) пероксид водорода в стабилизирующем буфере.
7. Hematoxylin (30 млб) <0,1 % Гематоксилин.
Разведение и смешивание
Система обнаружения BOND Polymer Refine Detection оптимизирована для использования на системе BOND. Этот реактив не
требует восстановления, смешивания, разведения или титрования.
Необходимые материалы, не входящие в комплект поставки
Полный список материалов, необходимых для обработки и иммуногистохимического окрашивания образцов с использованием
системы BOND (включающей системы BOND-MAX и BOND-III компании Leica), представлен в разделе «Применение реактивов
BOND» документации пользователя системы BOND.
Хранение и стабильность
Хранить при температуре 2-8 °C. Не замораживать. Не используйте по истечении срока годности, который указан на маркировке
ручки лотка. После использования незамедлительно вернуть на хранение при температуре 2-8 °C.
Не имеется очевидных признаков, которые бы указывали на нестабильность данного продукта, поэтому отрицательные
и положительные контроли следует обрабатывать одновременно с неизвестными образцами (см. «Контроль качества»
в разделе «Использование реактивов BOND» в вашей документации пользователя BOND).
Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое не может быть объяснено различиями выполнения лабораторных
исследований, а также предполагается проблема с системой обнаружения, незамедлительно обратитесь к местному
дистрибьютору или в региональный офис Компании Leica Biosystems.
Условия хранения, отличающиеся от указанных выше, должны быть верифицированы пользователем .
1
DS9800
Page 32