Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi page 23

BOND Polymer Refine Detection
Katalognr.: DS9800
Tiltenkt bruk
Dette deteksjonssystemet er for in vitro-diagnostisk bruk.
BOND Polymer Refine Detection er et biotinfritt, polymer HRP-linker-antistoffkonjugatsystem for deteksjon av vevsbundet muse- og
kanin-IgG og enkelte primære antistoffer for muse-IgM. Det skal brukes til å farge snitt av formalinfiksert, parafininnstøpt vev på det
automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-MAX-systemet og Leica BOND-III-systemet).
Klinisk tolkning av eventuell farging eller fravær av farging skal suppleres med morfologiske studier og riktige kontroller. Det
skal vurderes i sammenheng med pasientens kliniske sykehistorie og andre diagnostiske tester av en kvalifisert patolog.
BOND Polymer Refine Detection Kit skal brukes til vevskontroller i samsvar med gode laboratorierutiner. Som kvalitetssikring
bør laboratorier farge hver pasientprøve i sammenheng med positive og negative kontroller og andre vevsspesifikke kontroller,
etter behov.
Sammendrag og forklaring
Immunhistokjemiske teknikker kan brukes for å påvise forekomst av antigener i vev og celler (se "Bruke BOND-reagenser"
i brukerdokumentasjonen for BOND).
BOND Polymer Refine Detection bruker en ny, kontrollert polymeriseringsteknikk for å preparere polymer HRP-linker-
antistoffkonjugater. Med deteksjonssystemet unngås bruk av streptavidin og biotin, så derfor elimineres ikke-spesifikk farging som et
resultat av endogent biotin.
BOND Polymer Refine Detection fungerer på følgende måte:
• Prøven inkuberes med hydrogenperoksid for å slukke endogen peroksidaseaktivitet.
• Et brukerlevert, spesifikt primært antistoff tilføres.
• Post Primary IgG-linker-reagenset lokaliserer museantistoffene.
• Poly-HRP IgG-reagenset lokaliserer kaninantistoffene.
• Substratkromogenet, 3,3'-diaminobenzidin-tetrahydroklorhydrat (DAB), visualiserer komplekset via en brun utfelling.
• Ved hjelp av kontrastfarging i hematoksylin (blå) visualiseres cellekjernene.
Bruk av BOND Polymer Refine Detection i kombinasjon med det automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-MAX-
systemet og Leica BOND-III-systemet) reduserer risikoen for menneskelige feil og iboende variabilitet grunnet individuell
reagensfortynning, manuell pipettering og tilsetting av reagens.
Reagenser som medfølger
Reagenser som er tilstrekkelig for 200–300 tester:
1. Peroxide Block (30 ml) 3–4 % (v/v) hydrogenperoksid.
2. Post Primary (30 ml) kanin-antimuse-IgG (<10 μg/ml) i 10 % (v/v) animalsk serum i Tris-bufret saltvann/0,1 % ProClin™ 950.
3. Polymer (30 ml) antikanin-poly-HRP-IgG (<25 μg/ml) som inneholder 10 % (v/v) animalsk serum i Tris-bufret saltvann/0,1 %
ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM 3,3'-diaminobenzidin-tetrahydrokloridhydrat i en stabiliseringsløsning.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1 % (v/v) hydrogenperoksid i en stabiliseringsløsning.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1 % (v/v) hydrogenperoksid i en stabiliseringsløsning.
7. Hematoxylin (30 ml) <0,1 % hematoksylin.
Fortynning og blanding
BOND Polymer Refine Detection er optimalisert for bruk på automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-MAX-systemet og
Leica BOND-III-systemet). Rekonstituering, blanding, fortynning eller titrering av disse reagensene er ikke nødvendig.
Nødvendige materialer som ikke følger med
Se "Bruke BOND-reagenser" i brukerdokumentasjonen for BOND, for en komplett liste over materialer som kreves til prøvebehandling
og immunhistokjemisk farging ved bruk av automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-MAX-systemet og Leica BOND-III-
systemet).
Oppbevaring og holdbarhet
Oppbevares ved 2–8 °C. Skal ikke fryses. Skal ikke brukes etter utløpsdatoen som står på etiketten på bretthåndtaket. Sett tilbake til
kjøling ved 2–8 °C straks etter bruk.
Det er ingen tydelige tegn på ustabilitet i dette produktet. Derfor skal positive og negative kontroller kjøres samtidig med ukjente
prøver (se "Kvalitetskontroll" i avsnittet "Bruke BOND-reagenser" i brukerdokumentasjonen for BOND).
Hvis det observeres uventet farging som ikke kan forklares med variasjoner i laboratorieprosedyrer, og hvis det er mistanke om et
problem med deteksjonssystemet, bes du vennligst kontakte din lokale forhandler eller Leica Biosystems' regionkontor omgående.
Eventuell oppbevaring under forhold som ikke er beskrevet ovenfor, må kontrolleres av brukeren .
1
DS9800
Page 22