Alkalmazási Terület - Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi

BOND Polymer Refine Detection
Katalógusszám: DS9800
Alkalmazási terület
Ez a detektáló rendszer in vitro diagnosztikai használatra szolgál.
A BOND Polymer Refine Detection biotinmentes, polimer tormaperoxidázhoz (horseradish peroxidase, HRP) kötődő antitest-konjugáló
rendszer a szövethez kötött egér és nyúl IgG, valamint egyes egér IgM elsődleges antitestek kimutatására. Formalinban fixált, paraffinba
ágyazott szövet metszeteinek festésére szolgál BOND automata rendszeren (így a Leica BOND-MAX rendszer és a Leica BOND-III
rendszer)
Minden festődés meglétének vagy hiányának klinikai értelmezését morfológiai vizsgálatokkal és megfelelő kontrollokkal kell kiegészíteni.
Az értékelést a beteg klinikai kórtörténete és egyéb diagnosztikai vizsgálatok figyelembevételével, képzett patológusnak kell elvégeznie.
A BOND Polymer Refine Detection kitet a helyes laboratóriumi gyakorlatnak megfelelően, szövetkontrollokkal kell alkalmazni.
A biztonság kedvéért a laboratóriumok minden betegminta festését pozitív, negatív, illetve szükség szerint más szövetspecifikus
kontrollokkal párhuzamosan végezzék el.
Összefoglalás és magyarázat
Az immunhisztokémiai módszerek antigének jelenlétének kimutatására szolgálnak szövetekben és sejtekben (lásd a „BOND reagensek
használata" című részt a BOND felhasználói dokumentációban).
A BOND Polymer Refine Detection új kontrollált polimerizáló technológiát alkalmaz a polimer HRP-kötő antitest-konjugátumok
előállításához. A detektáló rendszer nem alkalmaz sztreptavidint és biotint, ezáltal kiiktatja az endogén biotin eredményeképp létrejövő
nem specifikus festődést.
A BOND Polymer Refine Detection az alábbi módon működik:
• A rendszer inkubálja a mintát hidrogén-peroxidban az endogén peroxidázaktivitás megszüntetése céljából.
• A felhasználó által biztosított specifikus elsődleges antitestet kell alkalmazni a metszeten.
• A Post Primary IgG-kötő reagens lokalizálja az egér antitesteket.
• A Poly-HRP IgG reagens lokalizálja a nyúl antitesteket.
• A kromogén szubsztrát, a 3,3'-diaminobenzidin-tetrahidroklorid-hidrát (DAB) barna csapadékként megjeleníti az egér antitesteket.
• A hematoxilin (kék) kontrasztfesték lehetővé teszi a sejtmagok megjelenítését.
Ha a BOND Polymer Refine Detection kitet BOND automata rendszerrel együtt használják, csökken az emberi hibák lehetősége, és
mérsékelhetők az egyes reagensek hígításából, a manuális pipettázásból és a reagensek alkalmazásából származó eredendő eltérések.
Biztosított reagensek
A reagensmennyiség 200–300 teszthez elegendő
1. Peroxide Block (30 ml) 3–4%-os hidrogén-peroxid.
2. Post Primary (30 ml) nyúlban termelt, egér ellenes IgG (<10 μg/ml), tris-pufferelt sóoldatban 10 térfogatszázalék állati szérumot /
0,1% ProClin™ 950-et tartalmaz.
3. Polymer (30 ml) nyúl ellenes Poly-HRP IgG (<25 μg/ml), tris-pufferelt sóoldatban 10 térfogatszázalék állati szérumot / 0,1% ProClin™
950-et tartalmaz.
4. DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM 3,3'-diaminobenzidin-tetrahidroklorid-hidrát stabilizáló oldatban.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1 térfogatszázalékos hidrogén-peroxid stabilizáló oldatban.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1 térfogatszázalékos hidrogén-peroxid stabilizáló oldatban.
7. Hematoxylin (30 ml) <0,1%-os hematoxilin.
Hígítás és elegyítés
A BOND Polymer Refine Detection kit a BOND rendszerrel való használathoz optimalizált. Nem szükséges a reagensek feloldása,
elegyítése, hígítása vagy titrálása.
Szükséges, de nem biztosított anyagok
A minta kezeléséhez és a BOND rendszerrel végzett immunhisztokémiai festéshez szükséges anyagok teljes listáját lásd a BOND
felhasználói dokumentáció „BOND reagensek használata" című részében.
Tárolás és stabilitás
2–8 °C-on tárolandó. Tilos lefagyasztani. Ne használja a terméket a tálca markolatán feltüntetett lejárati dátum után. Felhasználás után
azonnal tegye vissza 2–8 °C közötti hőmérsékletre.
Nincsenek a termék instabilitására utaló egyértelmű jelek, ezért javasolt pozitív és negatív kontrollok ismeretlen mintákkal való
párhuzamos futtatása (lásd a BOND felhasználói dokumentáció „BOND reagensek használata" című részében a „Minőség-ellenőrzés"
című szakaszt).
Amennyiben váratlan és a laboratóriumi eljárások eltéréseivel nem magyarázható festődést észlel, és azt gyanítja, hogy a detektáló
rendszer okozza a problémát, haladéktalanul forduljon a helyi forgalmazóhoz vagy a Leica Biosystems regionális irodájához.
A fentiekben előírtaktól eltérő tárolási feltételeket a felhasználónak ellenőriznie kell .
1
DS9800
Page 28