Zamýšlené Použití - Leica BIOSYSTEMS BOND Polymer Refine Detection DS9800 Mode D'emploi

BOND Polymer Refine Detection
Kat. č.: DS9800
Zamýšlené použití
Tento detekční systém je určen k diagnostickému použití in vitro.
BOND Polymer Refine Detection představuje systém konjugátu linkeru polymerické křenové peroxidázy (HRP) bez obsahu biotinu
k detekci myších a králičích IgG a některých myších IgM primárních protilátek navázaných na tkáň. Je určen k barvení formalínem
fixovaných řezů tkáně zalitých v parafínu v automatickém systému BOND (včetně systému Leica BOND-MAX system a Leica BOND-III
system).
Klinickou interpretaci jakéhokoliv barvení či jeho absence je třeba doplnit morfologickými vyšetřeními a příslušnými kontrolami.
Zhodnotit je musí kvalifikovaný patolog v kontextu s klinickou anamnézou pacienta a jinými diagnostickými testy.
Souprava BOND Polymer Refine Red Detection musí být používána v rámci správné laboratorní praxe a využívat tkáňové kontroly.
Pro zajištění tohoto předpokladu musí laboratoře podle potřeby barvit každý vzorek pacienta ve spojení s pozitivní, negativní a další
tkáňově specifickou kontrolou.
Souhrn a vysvětlení
Imunohistochemické techniky lze použít k průkazu přítomnosti antigenů ve tkáni a v buňkách (viz „Použití reagencií BOND" v uživatelské
dokumentaci BOND).
Systém BOND Polymer Refine Detection využívá novou technologii kontrolované polymerizace k přípravě polymerického HRP linkeru
a protilátkových konjugátů AP linkeru. Detekční systém nevyužívá streptavidin a biotin a proto eliminuje nespecifické barvení v důsledku
přítomnosti endogenního biotinu.
BOND Polymer Refine Detection funguje následujícím způsobem:
• Vzorek je inkubován v peroxidu vodíku za účelem potlačení endogenní aktivity peroxidázy.
• Používá se specifická primární protilátka, kterou dodává uživatel.
• Reagencie Post Primary IgG linker lokalizuje myší protilátky.
• Reagencie Poly-AP IgG lokalizuje králičí protilátky.
• První chromogenní substrát, 3,3' diaminobenzidin tetrahydrochlorid (DAB), vizualizuje myší protilátky hnědým
• Kontrastní barvení hematoxylinu (modrého) umožňuje buněčných jader.
Použití BOND Polymer Refine Detection v kombinaci s automatickým systémem BOND snižuje možnost lidské chyby a inherentní
variability v důsledku ředění jednotlivých reagencií, manuálního pipetování a použití reagencií.
Dodávané reagencie
Reagencie postačující pro 200–300 testů
1. Peroxide Block (30 ml) 3–4% peroxid vodíku.
2. Post Primary (30 ml) králičí anti-myší IgG (< 10 μg/ml) v 10% (obj. %) zvířecím séru ve fyziologickém roztoku pufrovaném roztokem
tris-pufru /0,1%/ ProClin™ 950.
3. Polymer (30 ml) anti-králičí Poly-HRP-IgG (< 25 μg/ml) obsahující 10% (obj. %) zvířecí sérum ve fyziologickém roztoku pufrovaném
roztokem tris-pufru /0,1% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2,4 ml) 66 mM 3,3' diaminobenzidin tetrahydrochloridu ve stabilizačním roztoku.
5. DAB Part B (30 ml) ≤ 0,1% (obj. %) peroxidu vodíku ve stabilizačním roztoku.
6. DAB Part B (30 ml) ≤ 0,1% (obj. %) peroxidu vodíku ve stabilizačním roztoku.
7. Hematoxylin (30 ml) < 0,1% Hematoxylin.
Ředění a míchání
BOND Polymer Refine Detection je optimalizován k použití v systému BOND. Rekonstituce, míchání, ředění ani titrace těchto reagencií
nejsou nutné.
Potřebný materiál, který není součástí dodávky
Úplný seznam materiálů potřebných ke zpracování vzorku a k barvení místa hybridizace in situ pomocí systému BOND system (včetně
systému Leica BOND-MAX system a Leica BOND-III system) je uveden v bodě „Použití reagencií BOND" v uživatelské dokumentaci
BOND.
Skladování a stabilita
Skladujte při teplotě 2–8 °C. Nezmrazujte. Nepoužívejte po uplynutí data exspirace uvedeného na štítku držadla podnosu. Okamžitě po
použití vraťte do prostředí s teplotou 2–8 °C.
Neexistují zjevné známky, které by indikovaly kontaminaci anebo nestabilitu. Současně s neznámými vzorky je proto třeba provést
i hodnocení příslušné pozitivní a negativní tkáňové kontroly. (viz „Kontrola kvality" v části „Použití reagencií BOND" v uživatelské
dokumentaci BOND).
Pokud je pozorováno neočekávané barvení, které nelze vysvětlit odchylkami v laboratorních postupech, a existuje podezření na problém
s detekčním systémem, ihned kontaktujte místního distributora nebo oblastní kancelář společnosti Leica Biosystems.
Podmínky skladování jiné než výše uvedené musí uživatel validovat.
1
DS9800
Page 38