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14.5 Limites générales
L'immunohistochimie et l'hybridation in situ sont des techniques diagnostiques en plusieurs étapes qui
l
nécessitent une formation spécialisée à la sélection des réactifs appropriés, au choix, à la fixation et au
traitement des tissus, à la préparation de la lame, et à l'interprétation des résultats de la coloration.
La coloration des tissus dépend de la manipulation et du traitement du tissu avant sa coloration. Le non
l
respect des procédures lors des opérations de fixation, congélation, décongélation, lavage, séchage,
chauffage ou coupe, ou la contamination par d'autres tissus ou liquides risque d'entraîner des artefacts, un
piégeage des anticorps ou des résultats faussement négatifs. Des résultats non reproductibles peuvent être
dus à des variations dans les méthodes de fixation et d'inclusion à la paraffine, ou à des anomalies inhérentes
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au tissu
.
Une coloration de contraste excessive ou insuffisante risque de compromettre la bonne interprétation des
l
résultats.
L'interprétation clinique de toute coloration ou de son absence doit être complétée par des études
l
morphologiques utilisant des contrôles appropriés et doit être évaluée dans le contexte des antécédents
cliniques du patient et des autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifié.
Les tissus de personnes infectées par le virus de l'hépatite B et contenant un antigène de surface de l'hépatite
l
B (HbsAg) peuvent présenter un marquage non spécifique à la peroxydase HRP
Des réactions négatives inattendues dans des néoplasmes peu différenciés peuvent être dues à une perte ou
l
une diminution marquée de l'expression de l'antigène, ou à la perte de la ou des mutations dans le ou les
gènes codant l'antigène. Une coloration positive inattendue dans des tumeurs peut provenir de l'expression
d'un antigène habituellement non exprimé dans des cellules normales à la morphologie similaire, ou de la
persistance ou de l'acquisition d'un antigène dans un néoplasme qui présente des caractéristiques
morphologiques et immunohistochimiques associées à l'autre lignée cellulaire (différenciation par
divergence). La classification histopathologique des tumeurs n'est pas une science exacte et certaines
colorations inattendues signalées dans la littérature sont sujettes à controverse.
Les réactifs peuvent avoir des réactions inattendues dans des tissus précédemment non testés. L'éventualité
l
de réactions inattendues, même dans des groupes de tissus testés, ne peut pas être complètement écartée en
raison de la variabilité biologique de l'expression antigénique/la séquence d'acides nucléiques cible dans les
néoplasmes ou d'autres tissus pathologiques. Contactez votre distributeur local ou le bureau régional de Leica
Biosystems pour signaler toute réaction inattendue.
IHC
Des sérums normaux ou non immunisés de la même source animale que l'antisérum secondaire utilisé dans
l
les opération de blocage peuvent causer des résultats faussement négatifs ou faussement positifs dus aux
auto-anticorps ou aux anticorps naturels.
Des résultats faussement positifs en IHC peuvent être observés en raison d'une liaison non immunologique de
l
protéines ou de produits de réaction du substrat. Elles peuvent également être dues à une activité pseudo-
peroxydase (érythrocytes), une activité peroxydase endogène (cytochrome C) ou à la biotine endogène (p. ex.,
foie, seins, cerveau, reins) suivant le type d'immunomarquage utilisé
Système BOND Manuel d'utilisation BOND 7, 49.7556.510 A04
Droits d'auteur © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
Chapitre 14 Utilisation des réactifs BOND
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