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14.2.2 Préparation des tissus
Nous recommandons un volume de formol à 10 % en tampon neutre de 15 à 20 fois le volume du tissu pour fixer le
tissu à des fins d'exploration immunohistochimique et de coloration par hybridation in situ sur le système BOND. La
fixation peut être effectuée à température ambiante (15 à 25 °C).
Pour les tests HER2, reportez-vous aux recommandations de préparation des tissus formulées par l'American Society
of Clinical Oncology/College of American Pathologists ou consultez les recommandations
locales en vigueur.
Pour faciliter la découpe des tissus et éviter d'endommager les lames microtome, décalcifiez les tissus osseux avant
11 ,12
le traitement
.
Le document CLIA américain (Clinical Laboratory Improvement Act) de 1988 spécifie dans la recommandation 42
CFR 493.1259(b) que "le laboratoire doit conserver les lames marquées au moins dix ans à compter de la date de
l'examen et conserver les blocs d'échantillons au moins deux ans à compter de la date de l'examen".
réglementations ou exigences locales sur votre site.
Découpez et prélevez des coupes de 3 à 5 μm d'épaisseur sur des lames de verre chargées électriquement (certains
types de tissus spécifiques peuvent nécessiter une autre épaisseur de coupe). Pour sécher le tissu, disposez les
lames bien égouttées dans une étude à 60 °C (±5 °C) pendant 10 à 30 minutes ou durant toute une nuit à 37 °C. Les
lames peuvent également être cuites sur les systèmes BOND-III et BOND-MAX. Les lames doivent être parfaitement
sèches à l'air avant chauffage. Voir les références 13, 14 et 15 pour plus d'informations sur la préparation des
échantillons.
Apposez les étiquettes de lames sur les échantillons et lames de contrôle comme décrit dans
déparaffinage, la réhydratation et le démasquage d'épitope sont entièrement automatisés sur le système BOND.
14.2.3 Déparaffinage et chauffage
En vue de l'immunohistochimie, les coupes de tissu incluses dans la paraffine doivent au préalable être débarrassées
de la paraffine et ensuite réhydratées. La paraffine est éliminée par la BOND ou BOND-PRIME Dewax Solution et les
coupes sont réhydratées. Le système BOND inclut des protocoles Dewax capables d'automatiser cette procédure.
Avant l'opération de déparaffinage, le système BOND-III et BOND-MAX peut également chauffer le tissu pour renforcer
son adhésion à la lame. Les protocoles Bake et Dewax du système BOND automatisent à la fois le chauffage et le
déparaffinage.
Veuillez noter que les tissus doivent être séchés à l'air pour éliminer toute trace d'eau avant d'être
placés dans le module de traitement pour chauffage et déparaffinage.
Système BOND Manuel d'utilisation BOND 7, 49.7556.510 A04
Droits d'auteur © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
Chapitre 14 Utilisation des réactifs BOND
10
et les réglementations
13
Respectez les
4 Démarrage
rapide. Le
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