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14.3.4 Réactifs de contrôles pour l'ISH
14.3.4.1 Réactif de contrôle positif
Pour l'hybridation in situ, utilisez le contrôle positif de sonde.
S'utilise à la place de la sonde avec une coupe de chaque échantillon du patient pour fournir des informations
l
sur la préservation des acides nucléiques dans le tissu et l'accessibilité des acides nucléiques à la sonde.
Le protocole du contrôle positif de sonde doit correspondre à celui de la sonde du test.
l
Si le contrôle positif de sonde ne donne pas de coloration positive, les résultats des échantillons du test
l
doivent être considérés comme non valides.
14.3.4.2 Réactif de contrôle négatif
Pour l'hybridation in situ, utilisez le contrôle négatif de sonde.
Le protocole pour la sonde de contrôle négatif doit correspondre à celui de la sonde du test.
l
Utilisez à la place de la sonde avec une coupe de chaque échantillon du patient pour évaluer la coloration non
l
spécifique et permettre une meilleure interprétation de la coloration spécifique.
La période d'incubation du réactif de contrôle négatif doit correspondre à celle de la sonde.
l
Utilisez une lame de contrôle négatif de réactif distincte pour chaque méthode de démasquage employée (y
l
compris sans démasquage) pour une sonde donnée.
Pour différencier l'activité enzymatique endogène de la liaison non spécifique d'enzymes par rapport à
l
l'immunoréactivité spécifique, marquez des tissus supplémentaires du patient exclusivement avec des
chromogènes de substrat ou des complexes d'enzymes et des chromogènes de substrat, respectivement.
14.3.5 Les avantages du contrôle qualité
Le tableau ci-dessous récapitule les avantages du contrôle qualité.
Tissu de contrôle positif :
Tissu ou cellules contenant
l'antigène/la séquence
d'acide nucléique cible à
détecter (peuvent se trouver
dans le tissu du patient).
Le contrôle idéal est un tissu
à coloration faiblement
positive, très sensible à la
dégradation de
l'anticorps/l'acide nucléique.
Système BOND Manuel d'utilisation BOND 7, 49.7556.510 A04
Droits d'auteur © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
Contrôle toutes les
opérations de l'analyse.
Valide le réactif et les
procédures utilisés pour
la coloration.
Chapitre 14 Utilisation des réactifs BOND
Détection de coloration de
matrice non spécifique
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