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Tous les protocoles de coloration doivent inclure au moins un réactif d'un système de détection Leica
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Biosystems.
Les étapes de réactif doivent être suivies de trois opérations de lavage (au moins) (pour BOND-III et
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BOND-MAX ou deux opérations de lavage (au moins) pour BOND-PRIME) ou du même réactif.
Pour les protocoles de coloration, les trois dernières opérations doivent être des lavages.
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Pour les protocoles de coloration, toutes les opérations doivent s'effectuer à température ambiante.
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Pour les protocoles de coloration préalable, les températures d'opération chauffée doivent se situer au sein
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des plages de température indiquées dans le tableau suivant :
Bake and Dewax (cuisson et déparaffinage), étape de cuisson
Prétraitement thermique (BOND-III et BOND-MAX)
Prétraitement thermique (BOND-PRIME)
Prétraitement enzymatique
Dénaturation
Hybridation
Les durées d'incubation des opérations, qui doivent être définies en minutes et secondes (mm:ss), doivent se
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situer dans les intervalles indiqués dans le tableau suivant. Les intervalles ne sont pas imposés :
Bake and Dewax (cuisson et déparaffinage), étape de cuisson
Prétraitement thermique (opérations ambiantes)
Prétraitement thermique (opérations chauffées BOND-III et
BOND-MAX)
Prétraitement thermique (opérations chauffées BOND-PRIME)
Prétraitement enzymatique (opération 1)
Prétraitement enzymatique (étapes enzymatiques)
Dénaturation
Hybridation
Protocoles de coloration, étapes de réactif
Protocoles de coloration, étapes de lavage
Chaque opération doit être totalement définie avec un réactif, une durée d'incubation et (le cas échéant) une
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température.
Système BOND Manuel d'utilisation BOND 7, 49.7556.510 A04
Droits d'auteur © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
Étape du protocole
Étape du protocole
Chapitre 7 Protocoles (sur le contrôleur BOND)
Plage de température (°C)
35–72
35–100
35–104
35–100
70–100
37–65
Intervalle d'incubation (minutes)
0–60
0–15
5–60
2–20
0
0–15
5–20
20–950
0–60
0–55
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