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14.4.1 Tissu de contrôle positif
Examinez d'abord le tissu de contrôle positif pour vous assurer que tous les réactifs fonctionnent correctement.
Lors de l'utilisation de systèmes à base de DAB, la présence d'un produit de réaction (3,3'-diaminobenzidine ou DAB)
de couleur marron avec les cellules cibles indique une réaction positive. Lors de l'utilisation des systèmes à base de
chromogène RED, la présence d'un produit de réaction de couleur rouge avec les cellules cibles indique une réaction
positive. Si les tissus contrôle positifs ne donnent pas de coloration positive, les résultats des échantillons du test
doivent être considérés comme non valides.
14.4.2 Tissu de contrôle négatif
Examinez le tissu de contrôle négatif après le contrôle positif pour vérifier la spécificité du marquage de l'antigène/la
séquence d'acide nucléique cible par l'anticorps primaire/la sonde.
L'absence de coloration spécifique dans le tissu contrôle négatif confirme l'absence de réactivité croisée de
l'anticorps/la sonde sur les cellules/éléments cellulaires.
Si une coloration spécifique (coloration faussement positive) est observée dans le tissu contrôle négatif externe, les
résultats doivent être considérés comme non valides. Une coloration non spécifique, le cas échéant, présente
habituellement une apparence diffuse. Une coloration sporadique de tissu conjonctif peut aussi être observée dans
des coupes de tissus fixés trop fortement au formol. Utilisez des cellules intactes pour l'interprétation de la
coloration. Les cellules nécrotiques ou dégénérées présentent souvent des coloration non spécifiques.
14.4.3 Tissu du patient
Examinez en dernier les échantillons du patient marqués avec l'anticorps primaire/la sonde.
L'intensité de la coloration positive doit être évaluée dans le contexte d'une coloration de matrice non spécifique du
contrôle négatif de réactif. Comme pour tout test immunohistochimique ou d'hybridation in situ, un résultat négatif
signifie que l'antigène ou l'acide nucléique n'a pas été détecté et non que l'antigène ou l'acide nucléique était absent
des cellules ou du tissu testés.
Si nécessaire, utilisez un panel d'anticorps pour identifier des réactions faussement négatives.
Système BOND Manuel d'utilisation BOND 7, 49.7556.510 A04
Droits d'auteur © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
Chapitre 14 Utilisation des réactifs BOND
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