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Leica LN22 Système de coupe à basse température Mode d‘emploi Leica LN22 – Système de coupe à basse température V1.2, Français – 10/2012 Réf. 14 0373 80105 RevB À conserver à portée de la main. Lire attentivement avant la mise en service.
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Leica se réserve le droit de modifier la spécifica- Nous ne sommes pas tenus d’adapter à interval- tion technique ainsi que le processus de fabrica- les réguliers le présent manuel aux nouveaux...
Mise en service ........................18 Emplacement approprié ......................18 Déballage ............................ 18 Préparation du microtome pour le monter dans le LN22 ............ 19 Installation de la chambre cryo ....................20 Raccordement électrique ......................21 4.5.1 Contrôle du réglage du sélecteur de tension ............... 21 4.5.2 Modification du réglage du sélecteur de tension et mise en place des fusibles ..
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5.2.1 Généralités ..........................39 5.2.2 Remplacement des fusibles ..................... 39 5.2.3 Remplacement de la lampe ..................... 40 5.2.4 Démontage des soupapes de pompe ..................41 Annexes ............................. 42 Informations pour la commande ..................... 42 Garantie et SAV ........................43 Leica ASP300...
à sa destination Les indications de danger Le Leica LN22 est un dispositif cryogène à l’azote apparaissent sur fond gris et sont signa- permettant de passer rapidement et efficace- ment des coupes à température ambiante à des lées par un triangle d'avertissement...
Seuls les techniciens du SAV autori- Une plaque signalétique comportant le n° de sé- sés par Leica sont habilités à ouvrir et rie est fixée au bas de l’appareil de commande. réparer le microtome. Leica LN22...
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Sécurité Précautions à prendre avec les cryopréparations La réalisation de cryopréparations ne comporte pas de risques particu- liers à condition de prendre les précautions nécessaires et d’utiliser les instruments prévus à cet effet. Il importe donc de veiller à l’observation stricte des quelques règles exposées dans le présent chapitre.
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Pendant cette période initiale, l’évaporation de est faible. Mais une fois que l’objet est refroidi on observe fré- quemment une forte ébullition avec projection de LN alors qu’on ne s’y attendait plus. Leica LN22...
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Sécurité • Lorsque vous travaillez avec l’azote liquide, évitez le port de lunettes de protection fermées (a), de bottes (c), de chaussures fermées (e) et de gants de protection (g), qui retiennent le . L’azote qui, en giclant, aurait pénétré der- rière ou à...
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à cette valeur présentent un risque pour la sécurité; ils doivent être éliminés ou réparés. • Les Dewars standard, tels que le Dewar en métal du système LN22, ne sont pas des réservoirs sous pression : Utilisez donc toujours le bouchon d’origine (Fig.
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Sécurité • Pour éviter tout échange avec l’air ambiant, ne laissez jamais un ré- servoir contenant du LN ouvert. Le point d’ébullition du LN (-196°C) est inférieur à celui de l’oxygène liquide (-183°C). A la faveur d’une surface d’échange suffisamment étendue, l’oxygène de l’air est ab- sorbé...
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Dangers – Maintenance Pour les opérations de maintenance ou les réparations, l’appareil ne peut être ouvert que par des techniciens de SAV autorisés par Leica. Avant de l’ouvrir, mettre l’appareil hors tension et le débrancher. Pour changer les fusibles, mettre l’appareil hors tension à l’aide de l’interrupteur principal et débrancher le câble secteur.
Sécurité Indications de danger – Utilisation de l’appareil Pendant le fonctionnement, la température des surfaces et autres éléments métalliques de la chambre peut descendre à -196°C ou monter jusqu’à +110°C! D’où risques de gelures ou de brûlures graves en cas de contact avec ces éléments extrême- ment froids ou brûlants.
253 mm Profondeur : 340 mm 100 mm 172 mm Hauteur : 120 mm 130 mm 171,5 mm Poids : 8,2 kg 7,9 kg Fusibles Fusibles faible intensité (5,0 x 20mm): 220-240V : 3,15 AT 100-120V : 6,3 AT Leica LN22...
Fig. 9 Le système de coupe à très basse température On sélectionne la température demandée pour LN22 permet de transformer instantanément le l’objet et le couteau sur l’appareil de commande microtome à rotation en équipement cryo. qui contrôle le système de pompage d’azote li- quide et assure en permanence la régulation de...
Composants de l’appareil et spécifications 3.3 Equipement standard L’équipement de base du LN22 comprend les pièces suivantes : appareil de base (chambre cryo) avec éclairage encastré Dewar (25l) pompe d’azote unité de commande 1 porte-lame pour les couteaux en carbure de tungstène, 30 mm 40/50°...
Mise en service 4.1 Emplacement approprié - Table de laboratoire stable, protégée contre les vibrations, avec pla- que horizontale plane, ainsi qu’un socle presque exempt de vibra- tions. - pas d’exposition au rayonnement solaire direct, - prise de courant dans un rayon de 1,5m, - pas de courants d’air, - revêtement de sol plan, - bonne liberté...
Mise en service 4.3 Préparation du microtome pour le monter dans le LN22 • Amenez le cylindre en position de fin de course arrière. • Faites pivoter la loupe ou le microscope sur le côté. • Déposez l’embase de porte-couteau avec le porte-couteau.
Mise en service 4.4 Installation de la chambre cryo • Faites glisser la chambre sur les glissières du socle (1) du microtome en introduisant le bras avec précautions dans l’ouverture circulaire (2). • Poussez la chambre jusqu’en butée contre le microtome et fixez-la à...
à celle utilisée dans votre laboratoire. Si la tension affichée dans la fenêtre n’est pas identique à celle utilisée dans votre laboratoire, vous devrez impérativement modifier le réglage du sélecteur de tension avant de raccorder l’appareil au secteur. Leica LN22...
Mise en service 4.5.2 Modification du réglage du sélecteur de tension et mise en place des fusibles Le sélecteur de tension peut être réglé sur 120V ou 230V. Pour le réglage du sélecteur de tension, débrancher préalablement l’appareil ! Fig. 16 Mode d’emploi V1.2, RevB –...
Par mesure de sécurité, les surfaces métalliques contenant des composants électroniques doivent être mises à la terre. Sans mise à la terre, les éléments du boîtier peuvent avoir un potentiel plus élevé que celui de la terre, auquel cas le contact avec ces éléments présenterait un danger. Leica LN22...
Mise en service 4.5.5 Branchement du câble secteur L’appareil est fourni avec plusieurs câbles correspondant aux spé- cifications des divers pays. L’appareil devra impérativement être branché sur une prise secteur mise à la terre et on utilisera exclusivement le câble secteur d’ori- gine.
• Pour mémoriser ces valeurs, appuyez sur STO (5) et une des trois touches de mémorisation (6, TA, TB, TC). • Pour sélectionner une température mémori- sée, appuyez sur la touche de mémorisation voulue (6, TA, TB, TC). Fig. 18b Leica LN22...
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Mise en service Les valeurs sélectionnées sont affichées pendant 4 secondes environ, puis elles sont remplacées par les températures actuelles. Panneau ‘OPERATION’ La touche LN -STOP (7) permet d’arrêter la pompe à azote à un moment quelconque, p.ex. pour ra- jouter de l’azote dans le Dewar.
4.8.1 Porte-objet pour enrobages en blocs • Déposez l’échantillon dans les petits pots rem- plis d’un milieu d’enrobage adéquat (p.ex. so- lution de saccharose au 2,3 molaire). OCT n’est approprié que dans de très rares cas à ces températures basses ! Fig. 20 Leica LN22...
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Mise en service • Bloquer la molette du microtome en position 12 heures. • Placez les petits pots dans le poste de congé- lation comme indiqué sur la photo. Fig. 21 • Lorsque le milieu d’enrobage est solidifié, in- troduisez les petits pots dans le bras support (2) en utilisant la pince spéciale (20) de petit rayon et fixez-le en serrant la vis de serrage (3) de la plaque froide (4).
• Dévissez complètement la vis (3, Fig. 22) de la plaque froide (4, Fig. 22) et orientez le porte-objet selon la position de coupe voulue. • Revissez à fond la vis de serrage (3) de la plaque froide (4). Filet à pas fin ! Ne pas serrer trop fort. Leica LN22...
Mise en service 16 14 Bras support Plaque froide Vis de serrage de la plaque froide Porte-objet Porte-couteau Vis de blocage du couteau Vis de blocage du porte-couteau Sonde de température pour la chambre cryo Embase de porte-couteau Vis de blocage de l’embase de porte-couteau Plaque de fond de la chambre cryo Disque excentrique (pour le déplacement latéral du porte-couteau)
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• Lorsque la température a atteint la valeur de consigne, resserrez les vis (7, Fig. 24) du porte-couteau (5, Fig. 24) et de l’embase (10, Fig. 24) ainsi que les vis de blocage du couteau (6, Fig. 24). Leica LN22...
Mise en service Déplacement latéral du porte-couteau • Desserrez les vis de blocage (10, Fig. 24) de l’embase de porte- couteau (9, Fig. 24). • Déplacez l’embase de porte-couteau en agissant sur la vis excentri- que (12, Fig. 24). Pour changer le couteau dans la chambre •...
Le réservoir de la chambre cryo se remplit d’azote liquide ; la pompe, reliée à une jauge de niveau, permet de maintenir un niveau d’azote constant. Dès que la température de l’échantillon aura atteint la valeur sélectionnée on mettra l’entraînement motorisé du microtome en marche ; Leica LN22...
à s’approcher lentement de la nouvelle température de con- signe. La chambre cryo du LN22 est une enceinte ouverte ; on peut toutefois la recouvrir d’une plaque de plastique fournie avec l’équipement, lorsque l’air ambiant est très humide et pendant les pauses. Il est recommandé...
Dewar. monte rapidement à +100°C environ. Il faut envi- • Pour remettre le système en service, il suffit ron 45 minutes pour chauffer et sécher la cham- d’appuyer sur la touche START (11, Fig. 18c). bre. Leica LN22...
Nettoyage et entretien 5.1 Nettoyage N’utilisez en aucun cas d’acétone ou de xylène pour le nettoyage des surfaces laquées externes. On nettoiera régulièrement la chambre, surtout lorsque de nombreux débris de coupe sont tombés dans l’enceinte. Etant donné que les débris de coupe fondent lorsqu’on chauffe la cham- bre (c’est en particulier le cas pour les caoutchoucs très souples ou le bitume-caoutchouc), il est conseillé...
• Aspirez les débris de coupe adhérant aux pa- rois et au fond de la chambre ou nettoyez au white-spirit. Attention : inflammable ! • Tous les éléments qui se démontent peuvent être nettoyés aux ultrasons. Fig. 34 Leica LN22...
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Nettoyage et entretien • Assemblez la plaque de fond de la chambre (11) et l’embase de porte-couteau (9) sans serrer les vis (10, Fig. 31). • Remettez la tôle de fond (14) du bac à azote dans la chambre en utilisant le manipulateur. •...
Avant de l’ouvrir, mettre l’appareil hors tension et le débrancher. Le LN22 ne nécessite pratiquement pas de maintenance. Pour assurer son bon fonctionnement à long terme on observera toutefois les recom- mandations suivantes : •...
Nettoyage et entretien 5.2.3 Remplacement de la lampe Pour changer la lampe, mettre l’appareil hors tension à l’aide de l’interrupteur principal et débrancher le câble secteur. La lampe d’éclairage de la chambre est placée derrière une porte sur le côté gauche de la chambre cryo.
à l’extrémité du tube, et dévissez les soupapes à l’aide d’un tour- nevis. • Séchez les soupapes sur une plaque de chauffage. • Avant de remonter les soupapes, vérifiez si la bille est mobile en se- Fig. 42 couant la soupape. Leica LN22...
Annexes 6.1 Informations pour la commande Porte-couteaux Porte-couteau pour couteaux en verre/diamant ................0378 26169 Porte-couteau pour couteaux en carbure de tungstène ............0378 25655 Couteaux Couteau en carbure de tungstène 40°, 30 mm ................0216 08724 Couteau en carbure de tungstène 50°, 30 mm ................0216 08728 Couteau de dégrossissage (nécessite l’adaptateur 0378 26875) ..........
Leica Biosystems Nussloch GmbH garantit que le produit contractuel livré a fait l’objet d’un contrôle de qualité approfondi basé sur les normes de vérification internes de Leica, que le produit est sans défaut et qu’il comporte toutes les spécifications techniques garanties et/ou les carac- téristiques convenues.