Publicité
Un « marqueur » de diagnostic est un réactif qui est utilisé pour détecter un antigène spécifique ou
un site de liaison ADN/ARN dans un échantillon de tissu. Le marqueur est l'anticorps primaire dans
l'IHC ou la sonde dans l'ISH (voir ci-dessous).
Hybridation in situ (ISH)
Les techniques de biologie moléculaire ont largement fait progresser notre compréhension de la maladie.
L'hybridation in situ associe des techniques de biologie moléculaire et d'histologie en permettant la visualisation de
l'ADN ou de l'ARN dans le contexte de la cellule. Depuis la mise au point de la technique de détection des acides
6
nucléiques en 1969
, les améliorations apportées aux protocoles d'hybridation in situ en ont fait un outil toujours
plus appréciable en pathologie clinique et à des fins expérimentales.
L'hybridation in situ utilise la liaison complémentaire des bases nucléotidiques de l'ADN ou l'ARN. Une sonde d'acide
nucléique marquée se lie spécifiquement à sa séquence complémentaire sur un échantillon cellulaire ou tissulaire
fixé. L'application d'un anticorps spécifique du marqueur, suivie des réactifs de détection à polymère BOND,
permettent de visualiser la sonde. Le système automatisé et les réactifs BOND offrent une alternative fiable et
efficace à la lourdeur de la technique manuelle.
14.1.1 Systèmes de détection BOND
Leica Biosystems offre une gamme de systèmes de détection conçus spécifiquement pour le système BOND. Au
premier rang desquels figure le système BOND Polymer Refine Detection™, qui permet une coloration de haute
intensité à résolution élevée sans nécessiter l'utilisation de streptavidine et de biotine.
Les systèmes de détection BOND sont répertoriés dans les sections ci-dessous.
14.1.1.1 BOND Polymer Refine Detection
l
14.1.1.2 BOND Polymer Refine Red Detection
l
14.1.1.1 BOND Polymer Refine Detection
Le module de traitement BOND-PRIME utilise une version différente de ce système de détection. Il
est fourni dans un plateau à double système de réactifs et le récipient à réactif d'hématoxyline est un
élément accessoire distinct. Pour plus d'informations, reportez-vous au manuel d'utilisation BOND-
PRIME distinct.
Le système à polymère BOND DAB, BOND Polymer Refine Detection, fournit une coloration de haute intensité avec
une délimitation franche de la liaison de l'anticorps à l'antigène cible ou de la sonde à l'acide nucléique. Le système
n'utilise pas de streptavidine et de biotine, éliminant la coloration non spécifique résultant de la biotine endogène. La
biotine endogène est répandue dans certains tissus, comme le tractus gastro-intestinal, les reins, le foie et le
carcinome mammaire. Les systèmes de détection à polymère BOND présentent une sensibilité plus élevée que les
systèmes utilisant le marquage à la streptavidine-biotine, ce qui permet des concentrations plus faibles en anticorps
et des temps de traitement plus rapides.
Système BOND Manuel d'utilisation BOND 7, 49.7556.510 A04
Droits d'auteur © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
Chapitre 14 Utilisation des réactifs BOND
343
Publicité
