Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 77

Vortex
Etiquetas com código de barras (B1018-129)
Tampas de tabuleiro WalkAway (B1018-18)
PROCEDIMENTO
Preparação do painel
1. Retirar os painéis a utilizar do local de armazenamento.
comprometida (não selada, perfurada ou rasgada).
2. Abrir a bolsa e retirar o painel. Se estiver conservado no frigorífico, retirar imediatamente o painel da bolsa de folha de
alumínio.
3. Os painéis não deverão ser utilizados caso se verifique uma das seguintes condições:
A. O dessecante está ausente ou quebrado.
B. Os poços do painel estão descolorados (por exemplo, PHO, vários antimicrobianos).
4. Permitir que os painéis atinjam a temperatura ambiente antes da reidratação. Os painéis podem ser empilhados com
um tabuleiro de cobertura colocado por cima dos mesmos. Todos os painéis abertos devem ser utilizados no mesmo
dia ou então inutilizados.
Preparação do inóculo
O CLSI recomenda que examine periodicamente as densidades do inóculo mediante contagens de colónias. Consultar no
documento M07-A10 do CLSI as recomendações de número de colónias. Os resultados esperados para E. coli ATCC 25922
devem ser aproximadamente 5 x 10
especial à preparação do inóculo, sobretudo com métodos manuais que dependem de técnicas como o Sistema Prompt ou
o inóculo preparado sem a ajuda de um dispositivo fotométrico.
Nota: as técnicas de fase logarítmicas e estacionárias não são suportadas com os produtos MicroScan.
1. Técnica padrão de turvação — Método de inóculo primário
A técnica padrão de turvação é recomendada para a inoculação direta de todos os cocos Gram-positivos aeróbios ou
para a deteção de estafilococos resistentes à meticilina.
A. Utilizando um bastonete aplicador, uma ansa ou uma cotonete esterilizados, tocar na superfície de 4–5 colónias
grandes ou 5–10 colónias pequenas bem isoladas e morfologicamente semelhantes, contidas numa placa de
gelose sem inibidores, incubadas durante 18–24 horas.
B. Emulsione em 3 mL de água para inóculo (água desionizada autoclavada).
C. Colocar uma tampa bem ajustada e agitar a suspensão no agitador vórtex durante 2 a 3 segundos. A turvação
final deve ser equivalente à de um padrão de turvação de 0,5 McFarland. Uma turvação equivalente pode ser
conseguida usando um turbidímetro MicroScan num intervalo de 0,08 ± 0,02.
D. Pipete 0,1 mL (100 μL) da suspensão padronizada em 25 mL de água para inóculo com PLURONIC. Colocar uma
tampa de forma a ficar bem ajustada. Inverter 8–10 vezes para misturar.
2. Sistema Prompt
O Sistema Prompt pode ser utilizado para os cocos Gram-positivos de crescimento mais rápido. Consultar o Prompt
Inoculation procedural manual (Manual de procedimento da inoculação Prompt) para obter instruções acerca da
utilização correta do Sistema Prompt.
Nota: utilizar com cuidado. A subinoculação pode ocorrer com organismos que não satisfazem o requisito de tamanho
e poderá produzir resultados de testes de sensibilidade e identificação incorretos. Adicionalmente, as contagens de
colónias de estafilococos podem ser elevadas com o método Prompt, podendo ser superiores ao intervalo esperado
segundo o CLSI. As contagens de colónias elevadas podem afetar adversamente os resultados de antibióticos que são
afetados pelo inóculo. Consultar a secção Limitações para obter mais informações sobre os agentes antimicrobianos
que se sabe serem dependentes do inóculo.
Reidratação/inoculação do painel
A reidratação e a inoculação são efetuadas utilizando o sistema RENOK com os Inoculators-D (B1013-4). Consultar as
instruções de utilização no RENOK Operator's Manual (Manual do operador do RENOK). Se for utilizado um sistema
alternativo, reidratar com 115 ± 10 μL de água para inóculo (PLURONIC). Deve ser atingida uma concentração final de
3–7 x 10 UFC/mL no poço. Para assegurar a viabilidade e a pureza do organismo testado, deverá preparar-se uma placa
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de verificação de pureza por repicagem do inóculo numa placa de ágar adequada e incubar nas condições adequadas. Se
estiverem presentes dois ou mais tipos de colónias na placa de verificação da pureza, voltar a isolar as colónias e repetir o
teste.
C29870–AD
UFC/mL para as concentrações de teste finais.
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Não utilizar se a integridade da embalagem estiver
O utilizador deve prestar uma atenção
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