Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 135

Vortex
Vonalkódcímke-papír (B1018-129)
WalkAway fedőtálcák (B1018-18)
ELJÁRÁS
Panel előkészítése
1. Vegye ki a tárolóból a használandó paneleket. Ne használjon olyan panelt, amelynek sérült (felbontott, lyukas vagy
szakadt) a csomagolása.
2. Vágja fel a tasakot, és vegye ki belőle a panelt. Ha a panel hűtőben volt tárolva, azonnal vegye ki a fóliatasakból.
3. Ne használja az olyan paneleket, amelyeknél fennáll az alábbiak valamelyike:
A. Nincs a csomagban szárítószer, vagy kiszakadt a szárítószer csomagolása.
B. A panel cellái elszíneződtek (például PHO, különféle antimikrobiális szerek).
4. A rehidratálás előtt hagyja a paneleket szobahőmérsékletűre melegedni. A panelek egymásra helyezhetők; a legfelső
panelre tiszta fedőtálcát kell helyezni. Minden felbontott panelt ugyanazon a napon fel kell használni, vagy ki kell dobni.
Inokulum elkészítése
A CLSI ajánlásai szerint az inokulum sűrűségét a telepszámlálás módszerével rendszeresen ellenőrizni kell. A telepszámra
vonatkozó ajánlásokat lásd az M07-A10 jelű CLSI dokumentumban. A végleges tesztkoncentrációkhoz az E. coli ATCC
25922 várt eredménye közel 5 x 10
különösen a technikától függő manuális módszerek alkalmazásakor, mint például a Prompt rendszer vagy a fotométer nélküli
inokulumkészítés.
Megjegyzés: A MicroScan termékekhez nem használhatók log- és stacionáriusfázis-módszerek.
1. Turbiditási standardot alkalmazó technika – Elsődleges inokulációs módszer
Valamennyi aerob Gram-pozitív baktérium közvetlen leoltásához, valamint a meticillinrezisztens Staphylococcusok
azonosításához a turbiditási standardot alkalmazó technika használata javasolt.
A. Steril pálca, oltókacs vagy vattapálca segítségével érintse meg egy gátló hatást nem kifejtő, 18–24 órás
agarlemezen lévő 4–5 nagyobb vagy 5–10 kisebb, morfológiailag azonos, megfelelően izolált telep felületét.
B. Emulgeálja 3 mL inokulumfolyadékban (autoklávozott, ioncserélt víz).
C. Jól zárja le, majd 2–3 másodpercig vortex keverővel keverje a szuszpenziót. A végső turbiditásnak egyeznie kell
egy 0,5 McFarland turbiditási standardéval. Azonos turbiditás érhető el 0,08 ± 0,02 mérési tartományú MicroScan
turbiditásmérő segítségével.
D. Pipettázzon 0,1 mL (100 μL) standardizált szuszpenziót 25 mL PLURONIC-tartalmú inokulumfolyadékba. Jól zárja
le. Az oldatot 8–10-szer átfordítva jól keverje össze.
2. Prompt rendszer
A Prompt rendszer gyorsan növő Gram-pozitív coccusok esetén használható. A Prompt rendszer megfelelő használatát
a Prompt Inoculation Procedural Manual (A Prompt inokulációs eljárás kézikönyve) ismerteti.
Megjegyzés: körültekintően kell alkalmazni. Elégtelen inokuláció fordulhat elő olyan esetekben, ha a mikroorganizmus
nem felel meg a méretbeli kritériumoknak, ami téves érzékenységi és azonosítási eredményekhez vezethet. Továbbá
a Prompt módszerrel megnőhet továbbá a Staphylococcus-telepek száma, esetlegesen meghaladva a CLSI alapján
várható tartományt.
az antibiogram eredményét. Az ismerten inokulumfüggő antimikrobiális szerek a Limitations (Korlátozások) című
fejezetben találhatók.
Panel rehidratálása/beoltása
A rehidrálás és inokulálás a RENOK rendszer segítségével, Inoculators-D készlettel történik (B1013-4).
használatát lásd RENOK Operator's Manual (A RENOK kezelői kézikönyve). Más rendszer használatakor a rehidratálást
115 ± 10 μL inokulumfolyadékkal (PLURONIC) kell végezni. 3–7 x 10
vizsgált mikroorganizmus életképességének és tisztaságának biztosítása érdekében tiszta tenyészetet tartalmazó lemezt
kell készíteni, amelyhez az inokulumot megfelelő agarlemezre szélesztve, megfelelő körülmények között kell inkubálni. Ha
a tiszta tenyészetet tartalmazó lemezen kettő vagy annál több teleptípus jelenik meg, izolálja újra a telepeket, és ismét
végezze el a vizsgálatot.
Biokémiai felülrétegzés
1. Csepegtetős üveg segítségével legalább 3 csepp ásványolajat használva végezze el az ARG és URE cellák
felülrétegzését. (Ezek a cellák felirattal vannak ellátva a panelen.)
2. Az ásványolajnak teljesen be kell fednie a cellákban lévő táptalajt, de nem folyhat ki a cellákból.
C29870–AD
CFU/mL.
5 1
A megnövekedett telepszám az inokulum megváltoztatásán keresztül hátrányosan érintheti
A felhasználónak gondosan kell eljárnia az inokulum elkészítésekor,
CFU/mL végső cellakoncentrációt kell elérni. A
5
135 of 339
A rendszer