Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 296

OPMERKING: WalkAway SI- en WalkAway plus-instrumenten (en WalkAway-instrumenten met een upgrade voor de
automatische olieoverlayfunctie) voegen automatisch olie toe aan de juiste wells.
Incubatie
1. Panels kunnen in een WalkAway-systeem worden geïncubeerd, maar kunnen ook handmatig worden geïncubeerd aan
de hand van de volgende stappen:
A. Stapel de panels in groepen van 3-5 om te zorgen voor een gelijke verspreiding van de warmte tijdens de incubatie.
B. Plaats een schone afdektray op iedere groep panels om verdamping te voorkomen. Afdektrays mogen opnieuw
worden gebruikt. Ontsmet de afdektrays niet met alcohol. De trays mogen wel met water en zeep worden
schoongemaakt. Spoel goed af en laat aan de lucht drogen.
C. Incubeer de panels gedurende 16-20 uur bij 35 °C in een incubator zonder CO
De panels aflezen
Panels kunnen handmatig worden afgelezen met behulp van de MicroScan-microdilutieviewer, waarbij de resultaten worden
geregistreerd, of op MicroScan-instrumenten (autoSCAN-4- en WalkAway-systemen). Raadpleeg de LabPro Operator's Guide
(Gebruikershandleiding van LabPro) voor informatie over het aflezen van panels met behulp van MicroScan-instrumenten.
1. Haal de panels na 16-20 uur incubatie uit de incubator.
2. Veeg de onderkant van de panels schoon met een pluisvrije doek om eventuele condensatie of vuil te verwijderen.
3. Lees de panels enkel af indien de controlewell helder is en de groeicontrolewell troebel. Lees de antimicrobiële stoffen
niet af als de controlewell troebel is of als er zich geen groei in de groeiwell bevindt. De groei in de wells is als troebelheid
zichtbaar. Dit kan een witte waas zijn in de gehele well, een witte stip in het midden van de well of fijnkorrelige groei
verspreid over de well. Onvoldoende groei wordt aangeduid door een lichte witheid in de well of een heldere kweek.
4. Noteer de resultaten op het juiste werkblad als deze handmatig worden afgelezen.
5. De antimicrobiële gevoeligheden (MIC's) aflezen
A. Lees alle antimicrobiële stoffen, CV, MS, NOV, OPT, NACL en BAC af tegen een zwarte (indirect verlichte)
achtergrond.
B. Voer β-lactamasetests uit voor stafylokokken met een penicilline-MIC van ≤0,12 μg/mL.
C. Noteer de MIC-resultaten als volgt:
a. Noteer de MIC na 16-20 uur incubatie als de laagste antimicrobiële concentratie waarbij groei wordt geremd.
b. Noteer de MIC als groter dan (>) de hoogste concentratie als er groei optreedt in alle concentraties van een
antimicrobiële stof.
c. Noteer de MIC als kleiner dan of gelijk aan (≤) de laagste concentratie als er in geen enkele concentratie van
de antimicrobiële stof groei optreedt.
d. Een heldere well in een reeks groeiwells (bijv. groei bij 1, 2 en 8 µg/mL, maar niet bij 4 µg/mL) wordt een
overgeslagen well genoemd en moet worden genegeerd.
e. Stippelvormige groei in geïsoleerde wells duidt besmetting aan. De test moet dan worden herhaald.
f. Voor stafylokokken met oxacilline moet elke groei worden beschouwd als significant.
D. Voor een nauwkeurige detectie van de weerstand zijn langere incubatietijden nodig voor het volgende:
Incubatie
24 uur
24-48 uur
1. Incubatie van 24 uur is niet vereist voor Staphylococcus sp. bij panels met de cefoxitinescreeningwell.
E. De prestaties van vancomycine op MicroScan-panels werden vergeleken met de microverdunningsmethoden op
vloeibaar medium aanbevolen door CLSI. De resultaten van vancomycine met stafylokokken na incubatie van
16-20 uur (18-20 uur voor aflezingen met autoSCAN-4-instrumenten) werden vergeleken moet die verkregen na
24 uur met de referentiemethode.
F. Voor panels die alleen oxacilline bevatten: stafylokokken moeten worden gerapporteerd als resistent (ongeacht de
MIC) voor de antimicrobiële stoffen ampicilline, amoxicilline/kaliumclavulanaat, ampicilline/sulbactam, ertapenem,
imipenem, meropenem, penicilline, piperacilline/tazobactam, ticarcilline/kaliumclavulanaat en cefalosporine
(behalve ceftaroline) als de MIC's van oxacilline >2 μg/mL zijn voor S. aureus en S. lugdunensis, en ≥0,5 μg/mL
voor coagulase-negatieve stafylokokken behalve S. lugdunensis.
C29870–AD
Organisme
Enterokokken
Stafylokokken
Streptokokken
Enterokokken
Antimicrobiële stoffen
Synergiescreening kanamycine
Oxacilline
1
Synergiescreening kanamycine
Streptomycinesynergie
296 of 339
.
2
1