Отстраняване На Неизправности; Допълнителна Информация - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• Спесимените преди и след фиксация, както и всички материали, изложени на тяхното влияние, трябва да бъдат третирани
като способни да предадат инфекция и да бъдат изхвърлени, като се прилагат съответните предпазни мерки2. Никога не
пипетирайте реагенти с уста и избягвайте контакт на кожата и лигавиците с реагенти или спесимени. При контакт на реагенти
или спесимени с чувствителни зони измийте зоните с обилно количество вода. Потърсете медицинска помощ.
• Консултирайте се с федералните, държавните или местните регламенти относно изхвърлянето на потенциално токсични
компоненти.
• Свеждайте до минимум микробната контаминация на реагентите, в противен случай може да се появи увеличаване на
неспецифичното оцветяване.
• Извличането, инкубационните времена или температури, различни от посочените, могат да доведат до погрешни резултати.
Всякакви подобни промени трябва да бъдат валидирани от потребителя.
Инструкции за употреба
Първично антитяло PD-1 (CAL20) е разработено за употреба с автоматизираната система BOND (включваща системите Leica
BOND-MAX и Leica BOND-III) в комбинация с BOND Polymer Refine Detection. Препоръчителният протокол за оцветяване за
първичното антитяло PD-1 (CAL20) е IHC Protocol F. Препоръчва се термично индуцирано извличане на епитоп с помощта на
BOND Epitope Retrieval Solution 2 (AR9640) в продължение на 20 минути.
Очаквани резултати
Нормални тъкани
Клонинг CAL20 открива протеина PD-1 в цитоплазмата/мембраната на част от имунните клетки. Оцветяване се наблюдава в
имунните клетки в повечето видове тъкани, по-конкретно в лимфните възли, сливиците, далака и тимусната жлеза. Оцветяване
се наблюдава и в алвеоларните макрофаги. (Общ брой на оценените нормални случаи = 135)
Туморни тъкани
Клонинг CAL20 оцветява 3/101 лимфома (включително 2/6 ангиоимунобластни T-клетъчни лимфома, 1/55 дифузни
B-едроклетъчни лимфома, 1/6 анапластични едроклетъчни лимфома, 0/16 T-клетъчни лимфома, 0/7 лимфома на Ходжкин, 0/5
екстранодални маргиналнозонови В-клетъчни лимфома, 0/3 фоликуларни лимфома, 0/2 лимфома на Бъркит и 0/1 неуточнени
лимфома) и 1/5 тумора на щитовидната жлеза (включително 1/1 фоликуларни карцинома, 0/3 фоликуларни аденома и 0/1
папиларни карцинома на щитовидната жлеза). Не е открито оцветяване (с изключение на инфилтриращите имунни клетки) в
тумори на червата (0/8) (включително 0/6 аденокарцинома и 0/2 аденома), метастатични тумори (0/5), тумори на гърдата (0/5)
(включително 0/3 инвазивни дуктални карцинома и 0/2 фиброаденома), хепатоцелуларни карциноми (0/4), тумори на мозъка
(0/4) (включително 0/3 менингиома и 0/1 астроцитома), тумори на белия дроб (0/4) (включително 0/2 плоскоклетъчни карцинома,
0/1 аденокарцинома и 0/1 дребноклетъчни карцинома), тумори на яйчниците (0/3) (включително 0/1 гранулозноклетъчни тумора,
0/1 аденокарцинома и 0/1 ендометриални аденокарцинома), плоскоклетъчни карциноми на хранопровода (0/3), аденокарциноми
на стомаха (0/3), тумори на надбъбречната жлеза (0/2) (включително 0/1 кортикални аденома и 0/1 адренокортикални
карцинома), преходноклетъчни карциноми на пикочния мехур (0/2), тумори на костите (0/2) (включително 0/1 остеосаркома и
0/1 хондросаркома), плоскоклетъчни карциноми на цервикса (0/2), аденокарциноми на ендометриума (0/2), светлоклетъчни
карциноми на бъбреците (0/2), аденокарциноми на простатата (0/2), тумори на слюнчената жлеза (0/2) (включително 0/1
плеоморфни аденома, 0/1 аденоидни кистозни карцинома), тумори на кожата (0/2) (включително 0/1 плоскоклетъчни карцинома,
0/1 меланома), семиноми (0/2), аденокарциноми на устата (0/1), аденокарциноми на панкреаса (0/1), плоскоклетъчен карцином
на езика и хиперплазия на простатата (общ брой на оценените случаи = 169)
PD-1 (CAL20) се препоръчва за откриване на протеин PD-1 в нормални и неопластични тъкани като допълнение към
конвенционалната хистопатология с използване на неимунологични хистохимични оцветявания.
Специфични ограничения на продукта
Продуктът PD-1 (CAL20) е оптимизиран от Leica Biosystems за употреба с BOND Polymer Refine Detection и спомагателните
реагенти BOND. Потребителите, които се отклоняват от препоръчаните процедури за тестване, трябва да поемат отговорност
за интерпретацията на резултатите на пациентите при тези обстоятелства. Времетраенето на протоколите може да варира
поради вариацията във фиксацията на тъканта и ефективността на усилването на антигена и трябва да се определи емпирично.
Трябва да се използват негативни контроли на реагентите при оптимизиране на условията на извличане и времетраенето на
протоколите.
Отстраняване на неизправности
Разгледайте референция 3 за коригиращо действие.
Свържете се с Вашия местен дистрибутор или регионалния офис на Leica Biosystems, за да съобщите за необичайно
оцветяване.
Допълнителна информация
Допълнителна информация за имунооцветяване с реагенти BOND можете да намерите в „Употреба на реагенти BOND"
във вашата документация за потребителя на BOND под заглавията „Принцип на процедурата", „Необходими материали",
„Приготвяне на спесимен", „Контрол на качеството", „Потвърждаване на анализа", „Интерпретация на оцветяването", „Легенда на
символите на етикетите" и „Общи ограничения".
Библиография
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
PA0216
Page 28