Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi page 32

• A mintákat fixálás előtt és után, valamint a velük érintkező összes anyagot fertőzések terjesztésére képes anyagként kell kezelni, és
megfelelő körültekintéssel kell ártalmatlanítani2. Soha ne pipettázza szájjal a reagenseket, továbbá kerülje a bőr és a nyálkahártyák
érintkezését a reagensekkel és a mintákkal. Ha a reagensek vagy minták érzékeny területtel érintkeznek, bő vízzel mossa le az
érintett területet. Forduljon orvoshoz.
• Minden potenciálisan toxikus összetevő ártalmatlanításával kapcsolatban kövesse a szövetségi, állami és helyi előírásokat.
• Minimálisra kell csökkenteni a reagensek mikrobiális szennyeződését, különben megnövekedhet a nem specifikus festődés.
• A megadottaktól eltérő feltárási körülmények, inkubációs idők és hőmérsékletek hibás eredményekhez vezethetnek. A felhasználónak
minden ilyen jellegű változtatást validálnia kell.
Használati útmutató
A PD-1 (CAL20) elsődleges antitest automata BOND rendszerrel (így a Leica BOND-MAX rendszerrel vagy a Leica BOND-III
rendszerrel) és a BOND Polymer Refine Detection kittel való együttes használatra lett kifejlesztve. A PD-1 (CAL20) elsődleges
antitesthez javasolt festési protokoll az IHC Protocol F. A hőindukált epitópfeltáráshoz BOND Epitope Retrieval Solution 2 oldat (AR9640)
20 percig tartó alkalmazása javasolt.
Várható eredmények
Normál szövetek
A CAL20 klón kimutatja a PD-1 fehérjét az immunsejtek egy részének citoplazmájában/membránjában. Festődés volt megfigyelhető
az immunsejteken belül a legtöbb szövettípusban, különösen a nyirokcsomókban, a tonsillában, a lépben és a csecsemőmirigyben. Az
alveoláris makrofágokban is volt megfigyelhető festődés. (Vizsgált normál esetek összesített száma = 135)
Tumorszövetek
A CAL20 klón megfestett 3/101 limfómát (beleértve 2/6 angioimmunoblasztos T-sejtes limfómát, 1/55 diffúz nagy B-sejtes limfómát, 1/6
anaplasztikus nagysejtes limfómát, 0/16 T-sejtes limfómát, 0/7 Hodgkin-limfómát, 0/5 extranodális marginális zóna B-sejtes limfómát,
0/3 follikuláris limfómát, 0/2 Burkitt-limfómát és 0/1 k. m. n. limfómát) és 1/5 pajzsmirigydaganatot (beleértve 1/1 follikuláris karcinómát,
0/3 follikuláris adenómát és 0/1 papilláris pajzsmirigy-karcinómát). Nem volt festődés (az infiltráló immunsejtek kivételével) észlelhető
béldaganatok (0/8) (beleértve 0/6 adenokarcinómát és 0/2 adenómát), áttétes daganatok (0/5), emlődaganatok (0/5) (beleértve 0/3
invazív duktális karcinómát és 0/2 fibroadenómát), hepatocelluláris karcinómák (0/4), agydaganatok (0/4) (beleértve 0/3 meningiómát
és 0/1 asztrocitómát), tüdődaganatok (0/4) (beleértve 0/2 laphámsejtes karcinómát, 0/1 adenokarcinómát és 0/1 kissejtes karcinómát),
petefészek-daganatok (0/3) (beleértve 0/1 granulosasejtes daganatot, 0/1 adenokarcinómát és 0/1 endometrioid adenokarcinómát),
laphámsejtes nyelőcső-karcinómák (0/3), gyomor-adenokarcinómák (0/3), mellékvese-daganatok (0/2) (beleértve 0/1 kortikális
adenómát és 0/1 adrenokortikális karcinómát), átmeneti sejtes húgyhólyag-karcinómák (0/2), csontdaganatok (0/2) (beleértve
0/1 oszteoszarkómát és 0/1 chondroszarkómát), laphámsejtes méhnyak-karcinómák (0/2), endometrium-adenokarcinómák (0/2),
világossejtes vesekarcinómák (0/2), prosztata-adenokarcinómák (0/2), nyálmirigy-daganatok (0/2) (beleértve 0/1 pleomorf adenómát,
0/1 adenoid cisztikus karcinómát), bőrdaganatok (0/2) (beleértve 0/1 laphámsejtes karcinómát, 0/1 melanómát), szeminómák (0/2), egy
orális adenokarcinóma (0/1), egy hasnyálmirigy-adenokarcinóma (0/1), egy laphámsejtes nyelvkarcinóma és egy prosztata hiperplázia
esetében (Vizsgált esetek összesített száma = 169)
A PD-1 (CAL20) a PD-1 fehérje detektálására ajánlott normális és tumoros szövetekben, a nem immunológiai hisztokémiai
festést használó hagyományos kórszövettani eljárások kiegészítéseként.
Termékspecifikus korlátozások
A PD-1 (CAL20) terméket a Leica Biosystems a BOND Polymer Refine Detection kittel és a BOND segédreagensekkel való használatra
optimalizálta. A tesztelési eljárásoktól való eltérés esetén a felhasználó felelőssége a betegeredmények értelmezése az adott
körülmények között. A protokoll végrehajtásához szükséges idő a szövet fixálásának és az antigén-erősítés hatékonyságának eltérései
miatt változó lehet, ezért tapasztalati alapon történő meghatározást igényel. A feltárási körülmények és a protokollidők optimalizálásakor
negatív reagenskontrollokat kell használni.
Hibaelhárítás
A javító intézkedéseket lásd a 3. hivatkozásban.
Szokatlan festődés bejelentéséhez forduljon a Leica Biosystems helyi forgalmazójához vagy regionális irodájához.
További információk
A BOND reagensekkel végzett immunfestésre vonatkozó további információkat a BOND felhasználói dokumentáció „BOND reagensek
használata" című részében talál a következő szakaszokban: Az eljárás elve, Szükséges anyagok, A minták előkészítése, Minőség-
ellenőrzés, A teszt ellenőrzése, A festődés értelmezése, A címkéken szereplő szimbólumok magyarázata és Általános korlátozások.
Szakirodalom
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Kiadás dátuma
2020 április 03
PA0216
Page 31