Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi page 16

• Prover, både före och efter fixering, samt all materiel som exponeras för dem, bör behandlas och avfallshanteras som potentiellt
smittbärande material2. Munpipettera aldrig reagens och undvik att hud eller slemhinnor kommer i kontakt med reagens eller prover.
Om reagens eller prover skulle komma i kontakt med känsliga områden bör du tvätta dig med rikliga mängder vatten. Rådgör med
läkare.
• Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser och
förordningar.
• Minimera mikrobisk kontaminering av reagens annars kan en ökning av icke-specificerad färgning ske.
• Återvinning, inkubationstider eller temperaturer som avviker mot dem angivna kan ge felaktiga resultat. All sådan ändring måste
bekräftas av användaren.
Bruksanvisning
PD-1 (CAL20) primär antikropp utvecklades för användning i det automatiska BOND-systemet (inkluderar Leica BOND-MAX-systemet
och Leica BOND-III -systemet) i kombination med BOND Polymer Refine Detection. Det rekommenderade färgningsprotokollet för PD-1
(CAL20) primär antikropp är IHC Protocol F. Värmeinducerad epitopåtervinning rekommenderas med användning av BOND Epitope
Retrieval Solution 2 (AR9640) i 20 minuter.
Förväntade resultat
Normala vävnader
Klon CAL20 detekterar PD-1-proteinet i cytoplasman/membranet hos en andel av immuncellerna. Färgning observerades i immunceller i
de flesta vävnadstyper, särskilt i lymfkörtlar, tonsiller, mjälte och tymuskörtlar. Färgning observerades även i alveolära makrofager. (Totalt
antal utvärderade normalfall = 135)
Tumörvävnader
Klon CAL20 färgade 3/101 lymfom (inklusive 2/6 angioimmunoblastiska T-cellslymfom, 1/55 diffusa storcelliga B-lymfom, 1/6
anaplastiska storcelliga lymfom, 0/16 T-cellslymfom, 0/7 Hodgkins lymfom, 0/5 extranodala B-cellslymfom i marginalzonen, 0/3 follikulära
lymfom, 0/2 Burkitts lymfom och 0/1 lymfom NOS) och 1/5 sköldkörteltumörer (inklusive 1/1 follikulärt karcinom, 0/3 follikulära adenom
och 0/1 papillära sköldkörtelkarcinom). Ingen färgning (utom för infiltrerande immunceller) detekterades i tarmtumörer (0/8) (inklusive
0/6 adenokarcinom och 0/2 adenom), metastatiska tumörer (0/5), brösttumörer (0/5) (inklusive 0/3 invasiva duktala karcinom och 0/2
fibroadenom), hepatocellulära karcinom (0/4), hjärntumörer (0/4) (inklusive 0/3 meningiom och 0/1 astrocytom), lungtumörer (0/4)
(inklusive 0/2 skivcellkarcinom, 0/1 adenokarcinom och 0/1 småcellskarcinom), äggstockstumörer (0/3) (inklusive 0/1 granulosacelltumör,
0/1 adenokarcinom och 0/1 endometrioida adenokarcinom), skivepitelkarcinom i matstrupen (0/3), adenokarcinom i magsäcken
(0/3), binjuretumörer (0/2) (inklusive 0/1 kortikala adenom och 0/1 adrenokortikala karcinom), övergångscellskarcinom i urinblåsan
(0/2), bentumörer (0/2) (inklusive 0/1 osteosarkom och 0/1 kondrosarkom), skivepitelkarcinom i livmoderhalsen (0/2), endometriala
adenokarcinom (0/2), klarcellskarcinom i njurarna (0/2), adenokarcinom i prostata (0/2), spottkörteltumörer (0/2) (inklusive 0/1 pleomorfa
adenom, 0/1 adenoida cystiska karcinom), hudtumörer (0/2) (inklusive 0/1 skivepitelkarcinom, 0/1 melanom), seminom (0/2), ett oralt
adenokarcinom (0/1), ett bukspottkörteladenokarcinom (0/1), ett skivepitelkarcinom i tungan och en prostatahyperplasi (Totalt antal
utvärderade fall = 169)
PD-1 (CAL20) rekommenderas för detektering av humant PD-1-protein i normala eller neoplastiska vävnader, som tillägg till
konventionell histopatologi med användande av icke-immunologiska histokemiska fläckar.
Produktspecifika begränsningar
PD-1 (CAL20) har optimerats hos Leica Biosystems för användning med BOND Polymer Refine Detection samt BOND-hjälpreagenser.
Användare som avviker från rekommenderade testprocedurer måste ta ansvar för tolkningen av patientens resultat under sådana
omständigheter. Protokolltiderna kan variera beroende på variation i vävnadsfixering och effektiviteten av antigenförstärkning och måste
bestämmas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas vid optimering av återvinningsförhållanden och protokolltider.
Felsökning
Se referens 3 för korrigerande åtgärder.
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.
Mer information
Mer information om immunfärgning med BOND-reagens finns under rubrikerna Förfarandeprincip, Nödvändiga materiel, Förbereda
provexemplet, Kvalitetskontroll, Verifiering av analyser, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna
begränsningar i "Använda BOND-reagens" i din BOND användardokumentation.
Bibliografi
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Utgivningsdatum
03 april 2020
PA0216
Page 15