Solución De Problemas - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• Las preparaciones, antes y después de ser fijadas, y todos los materiales expuestos a ellas, deben ser tratados como sustancias
capaces de transmitir infecciones y deben eliminarse tomando las precauciones adecuadas2. Nunca pipetee reactivos con la boca;
evite el contacto de la piel y las mucosas con reactivos o preparaciones. Si los reactivos o las preparaciones entran en contacto con
zonas delicadas, lávelas con abundante agua. Consulte con un médico.
• Consulte la normativa pertinente sobre la eliminación de componentes potencialmente tóxicos.
• Reduzca al mínimo la contaminación microbiana de los reactivos; de lo contrario, podría producirse un aumento de la tinción inespecífica.
• La recuperación, los tiempos de incubación y las temperaturas distintos a los especificados pueden dar lugar a resultados erróneos.
Cualquiera de estos cambios debe ser validado por el usuario.
Instrucciones de uso
El anticuerpo primario PD-1 (CAL20) se ha desarrollado para usarse en el sistema BOND automatizado (incluye el sistema Leica
BOND-MAX y el sistema Leica BOND-III) en combinación con la BOND Polymer Refine Detection. El protocolo de tinción recomendado
para el anticuerpo primario PD-1 (CAL20) es IHC Protocol F. Se recomienda la recuperación del epítopo inducido por calor usando
BOND Epitope Retrieval Solution 2 (AR9640) durante 20 minutos.
Resultados esperados
Tejidos normales
El clon CAL20 detecta la proteína PD-1 en el citoplasma/la membrana de una proporción de células inmunitarias. Se observó tinción
dentro de las células inmunitarias de la mayor parte de tipos de tejidos y, en concreto, en el nódulo linfático, la amígdala, el bazo y la
glándula del timo. También se observó tinción en los macrófagos alveolares. (Cifra total de casos normales evaluados = 135)
Tejidos tumorales
El clon CAL20 tiñó 3/101 linfomas (incluyendo 2/6 linfomas angioinmunoblásticos de células T, 1/55 linfomas difusos de células B
grandes, 1/6 linfomas anaplásicos de células grandes, 0/16 linfomas de células T, 0/7 linfomas de Hodgkin, 0/5 linfomas de células B
de zona marginal extranodal, 0/3 linfomas foliculares, 0/2 linfomas de Burkitt y 0/1 linfoma NOS) y 1/5 tumores tiroideos (incluyendo 1/1
carcinoma folicular, 0/3 adenomas foliculares y 0/1 carcinoma papilar tiroideo). No se detectó tinción (excepto en células inmunitarias
infiltrantes) en los tumores intestinales (0/8) (incluyendo 0/6 adenocarcinomas y 0/2 adenomas), tumores metastásicos (0/5), tumores de
mama (0/5) (incluidos 0/3 carcinomas ductales invasivos y 0/2 fibroadenomas), carcinomas hepatocelulares (0/4), tumores cerebrales
(0/4) (incluyendo 0/3 meningiomas y 0/1 astrocitoma), tumores pulmonares (0/4) (incluyendo 0/2 carcinomas de células escamosas,
0/1 adenocarcinoma y 0/1 carcinoma de células pequeñas), tumores ováricos (0/3) (incluyendo 0/1 tumor de célula granulosa,
0/1 adenocarcinoma y 0/1 adenocarcinoma endometrial), carcinomas de células escamosas del esófago (0/3), adenocarcinomas
estomacales (0/3), tumores de la glándula adrenal (0/2) (incluyendo 0/1 adenoma cortical y 0/1 carcinoma adrenocortical), carcinomas
de células de transición de la vejiga (0/2), tumores óseos (0/2) (incluyendo 0/1 osteosarcoma y 0/1 condrosarcoma), carcinomas
de células escamosas del cuello uterino (0/2), adenocarcinomas endometriales (0/2), carcinomas de células claras del riñón (0/2),
adenocarcinomas de la próstata (0/2), tumores de las glándulas salivales (0/2) (incluyendo 0/1 adenoma pleomórfico, 0/1 carcinoma
adenoide cístico), tumores de piel (0/2) (incluyendo 0/1 carcinoma de células escamosas, 0/1 melanoma), seminomas (0/2), un
adenocarcinoma oral (0/1), un adenocarcinoma pancreático (0/1), un carcinoma de células escamosas de la lengua y una hiperplasia
prostática (Número total de casos evaluados = 169)
El PD-1 (CAL20) está recomendado para la detección de la proteína PD-1 en tejidos normales y neoplásicos, como
complemento de la histopatología tradicional con tinciones histoquímicas no inmunológicas.
Limitaciones específicas del producto
El PD-1 (CAL20) se ha optimizado en Leica Biosystems para su uso con BOND Polymer Refine Detection y reactivos auxiliares BOND.
Los usuarios que no sigan los procedimientos de prueba recomendados deben aceptar la responsabilidad de la interpretación de los
resultados de pacientes en esas circunstancias. Los tiempos del protocolo puede oscilar, debido a la variación en la fijación del tejido y
la eficacia de la mejora del antígeno, y deben determinarse empíricamente. Se utilizarán controles de los reactivos negativos a la hora
de optimizar las condiciones de la recuperación y los tiempos del protocolo.
Solución de problemas
Consulte la referencia 3 para encontrar la acción correctora.
Póngase en contacto con su distribuidor local o con la sucursal regional de Leica Biosystems para notificar tinciones anormales.
Información adicional
Se puede encontrar información adicional sobre la inmunotinción con los reactivos BOND en los apartados Principio del procedimiento,
Materiales necesarios, Preparación de las preparaciones, Control de calidad, Verificación del ensayo, Interpretación de la tinción,
Explicación de los símbolos de las etiquetas y Limitaciones generales en la sección "Uso de los reactivos BOND" de la documentación
del usuario del sistema BOND.
Bibliografía
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Fecha de publicación
03 de abril de 2020
PA0216
Page 11