Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi page 25

• Prøver, før og etter fiksering, og alle materialer som er utsatt for dem, skal behandles som om de kan overføre smitte og avhendes
med riktige forholdsregler2. Reagenser skal aldri pipetteres med munnen, og unngå at reagenser eller prøvematerialer kommer i
kontakt med hud eller slimhinner. Hvis reagenser eller prøver kommer i kontakt med følsomme områder, skyll med rikelige mengder
vann. Kontakt lege.
• Se lokale, regionale eller statlige forskrifter for avfallshåndtering av eventuelle potensielle giftkomponenter.
• Minimer mikrobiell kontaminering av reagenser, ellers kan det forekomme en økning i uspesifikk farging.
• Demaskering, inkuberingstider eller temperaturer annet enn det som er angitt, kan gi unøyaktige resultater. Enhver slik endring må
valideres av brukeren.
Bruksanvisning
PD-1 (CAL20) primært antistoff er optimalt utviklet til bruk på BOND-systemet (inkluderer Leica BOND-MAX-systemet og Leica BOND-
III-systemet) i kombinasjon med BOND Polymer Refine Detection. Anbefalt fargingsprotokoll for PD-1 (CAL20) primært antistoff er IHC
Protocol F. Det anbefales varmeindusert epitop demaskering ved bruk av BOND Epitope Retrieval Solution 2 (AR9640) i 20 minutter.
Forventede resultater
Normale vev
Klone CAL20 oppdager PD-1-proteinet i cytoplasma/membranen av en andel immunceller. Farging ble observert i immunceller i de fleste
vevstyper, og spesielt i lymfeknute, mandel, milt og brissel. Farging ble også observert i alveolære makrofager. (Totalt antall evaluerte
normale tilfeller = 135)
Tumorvev
Klone CAL20 farget 3/101 lymfomer (herunder 2/6 angioimmunoblastiske T-cellelymfomer, 1/55 diffuse store B-cellelymfomer, 1/6
anaplastiske store cellelymfomer, 0/16 T-cellelymfomer, 0/7 Hodgkin-lymfomer, 0/5 ekstranodal marginalsone B-cellelymfomer, 0/3
follikulære lymfomer, 0/2 Burkitt-lymfomer og 0/1 lymfom NOS) og 1/5 tumor i skjoldbruskkjertelen (herunder 1/1 follikulært karsinom, 0/3
follikulære adenomer og 0/1 papillært skjoldbrusk-karsinom). Ingen farging (unntatt infiltrerende immunceller) ble oppdaget i tarmsvulster
(0/8) (herunder 0/6 adenokarsinomer og 0/2 adenomer), metastatiske tumorer (0/5), brysttumorer (0/5) (herunder 0/3 invasivt duktalt
karsinom og 0/2 fibroadenomer), hepatocellulære karsinomer (0/4), hjernetumorer (0/4) (herunder 0/3 meningeomer og 0/1 astrocytom),
lungetumorer (0/4) (herunder 0/2 plateepitelkarsinomer, 0/1 adenokarsinom og 0/1 småcellekarsinom), tumorer i eggstokkene (0/3)
(herunder 0/1 granulosa-celletumor, 0/1 adenokarsinom og 0/1 endometrioid adenokarsinom), plateepitelkarsinomer i spiserøret
(0/3), adenokarsinomer i magen (0/3), tumorer i binyrene (0/2) (herunder 0/1 kortikalt adenom og 0/1 adrenokortikal karsinom),
overgangscellekarsinomer i blæren (0/2), bentumorer (0/2) (herunder 0/1 osteosarkom og 0/1 chondrosarcoma), plateepitelkarsinomer i
livmorhalsen (0/2), endometriale adenokarsinomer (0/2), klarcellede karsinomer i nyrene (0/2) adenokarsinomer i prostata (0/2), tumorer
i spyttkjertel (0/2) (herunder 0/1 pleomorft adenom, 0/1 adenoid cystisk karsinom), hudtumorer (0/2) (herunder 0/1 plateepitelkarsinom,
0/1 melanom), seminomer (0/2), et oralt adenokarsinom (0/1), adenokarsinom i bukspyttkjertelen (0/1), en plateepitelkarsinom i tungen,
og en prostatahyperplasi (Totalt antall unormale tilfeller evaluert = 169)
PD-1 (CAL20) anbefales for deteksjon av PD-1-protein i normale og neoplastiske vev, som tillegg til konvensjonell histopatologi
med bruk av ikke-immunologiske histokjemiske farger.
Produktspesifikke begrensninger
PD-1 (CAL20) har blitt optimalisert hos Leica Biosystems til bruk med BOND Polymer Refine Detection og BOND-hjelpereagenser.
Brukere som avviker fra de anbefalte testprosedyrene, må ta ansvaret for tolkningen av pasientresultatene under disse forholdene.
Protokolltidene kan variere pga. variasjon i vevsfiksering og effektiviteten til antigenforsterkningen, og må fastslås empirisk. Det skal
brukes negative reagenskontroller når demaskeringsforhold og protokolltider optimeres.
Feilsøking
Se referanse 3 for utbedringstiltak.
Kontakt din lokale forhandler eller regionale kontor for Leica Biosystems for rapportering av uvanlig misfarging.
Mer informasjon
Mer informasjon om immunfarging med BOND-reagenser, under overskriftene Prinsipp for prosedyren, Nødvendige materialer,
Prøvepreparering, Kvalitetskontroll, Analyseverifisering, Tolkning av farging, Symbolforklaring på etiketter og Generelle begrensninger,
finner du under "Bruk av BOND-reagenser" i BOND-brukerdokumentasjonen.
Bibliografi
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Utstedelsesdato
03 april 2020
PA0216
Page 24