Sorun Giderme - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• Fiksasyon öncesinde ve sonrasında numuneler ve bunlara maruz kalmış tüm materyallere enfeksiyon bulaştırabilirlermiş gibi
davranılması ve uygun önlemlerle atılmaları gerekir2. Reaktifleri hiçbir zaman ağızla pipetlemeyin. Cildin ve mukoz membranların
reaktifler ve örneklerle temas etmesini önleyin. Reaktifler veya örnekler hassas bölgelere temas ederse bol miktarda suyla yıkayın.
Tıbbi yardım isteyin.
• Potansiyel olarak toksik bileşenlerin atılmasıyla ilgili yerel, ulusal veya bölgesel düzenlemeleri dikkate alın.
• Reaktiflerin mikrobik kontaminasyonunu minimize edin, aksi takdirde spesifik olmayan boyamada bir artış meydana gelebilir.
• Belirtilenlerin dışındaki geri kazanım, inkübasyon süreleri veya sıcaklıklar hatalı sonuçlara neden olabilir. Bu tür herhangi bir değişiklik
kullanıcı tarafından doğrulanmalıdır.
Kullanım Talimatları
PD-1 (CAL20) primer antikoru BOND polymer Refine Detection ile birlikte otomatik BOND sisteminde (Leica BOND-MAX sistemi ve
Leica BOND-III sistemini içeren) kullanılmak üzere geliştirilmiştir. PD-1 (CAL20) primer antikor için önerilen boyama protokolü IHC
Protocol F'tir. BOND Epitope Retrieval Solution 2 (AR9640) kullanılarak 20 dakika ısı indüklü epitop alımı önerilir.
Öngörülen Sonuçlar
Normal Dokular
Klon CAL20, bağışıklık hücrelerinin bir bölümünün sitoplazmasında/membranında bulunan PD-1 proteinini tespit eder. Özellikle lenf
nodu, bademcik, dalak ve timus bezi olmak üzere çoğu doku türünün bağışıklık hücrelerinde boyanma gözlendi. Boyama alveolar
makrofajlarda da gözlendi. (Değerlendirilen toplam normal vaka sayısı = 135)
Tümör Dokuları
Klon CAL20, 3/101 lenfomayı (2/6 anjiyoimmünoblastik T hücreli lenfoma, 1/55 diffüz büyük B hücreli lenfoma, 1/6 anaplastik büyük
hücreli lenfoma, 0/16 T hücreli lenfoma, 0/7 Hodgkin lenfoma, 0/5 ekstra nodal marjinal bölge B lenfoma, 0/3 foliküler lenfoma, 0/2
Burkitt lenfoma ve 0/1 lenfoma NOS dahil) ve 1/5 tiroid tümörünü (1/1 foliküler karsinom, 0/3 folliküler adenom ve 0/1 papiler tiroid
karsinomu dahil) boyadı. Bağırsak tümörlerinde (0/8) (0/6 adenokarsinom ve 0/2 adenom dahil), metastatik tümörlerde (0/5), meme
tümörlerinde (0/5) (0/3 invazif duktal karsinom ve 0/2 fibroadenom dahil), hepatosellüler karsinomda (0/4), beyin tümörlerinde (0/4)
(0/3 meninjiyom ve 0/1 astrositom dahil), akciğer tümörlerinde (0/4) (0/2 skuamöz hücreli karsinom , 0/1 adenokarsinomve 0/1
küçük hücreli karsinom dahil), yumurtalık tümörlerinde (0/3) (0/1 granüloza hücre tümörü, 0/1 adenokarsinom ve 0/1 endometrioid
adenokarsinom dahil), özofagus skuamöz hücreli karsinomda (0/3), mide adenokarsinomlarda (0/3), adrenal bez tümörlerinde (0/2)
(0/1 kortikal adenom ve 0/1 adrenokortikal karsinom dahil), mesane transizyonel hücre karsinomlarında (0/2), kemik tümörlerinde (0/2)
(0/1 osteosarkom ve 0/1 kondrosarkom dahil), servikal skuamöz hücreli karsinomda (0/2), endometrioid adenokarsinomda (0/2), böbrek
berrak hücreli karsinomlarda (0/2), prostat adenokarsinomlarında (0/2), tükürük bezi tümörlerinde (0/2) (0/1 pleomorfik adenom, 0/1
adenoid kistik karsinom dahil), cilt tümörlerinde (0/2) (0/1 skuamöz hücreli karsinom, 0/1 melanom dahil), seminomlarda (0/2) ve bir
oral adenokarsinomda (0/1), bir pankreatik adenokarsinomda (0/1), bir dil skuamöz hücreli karsinomda ve bir prostat hiperplazisinde
boyanma tespit edilmedi (infiltratif bağışıklık hücreleri dışında) (Değerlendirilen toplam vaka sayısı = 169)
PD-1 (CAL20), immünolojik olmayan histokimyasal boyamalar kullanılarak yapılan geleneksel histopatolojiye yardımcı olarak
normal ve neoplastik dokularda PD-1 proteininin saptanması için önerilir.
Ürüne Özgü Sınırlamalar
PD-1 (CAL20), BOND Polymer Refine Detection'la ve BOND yardımcı reaktiflerle kullanılmak üzere Leica Biosystems'ta optimize
edilmiştir. Önerilen test prosedürlerinden sapan kullanıcılar bu şartlar altında hasta sonuçlarının yorumlanmasının sorumluluğunu
almalıdır. Doku fiksasyonu ve antijen alımının etkinliğindeki değişkenlikler nedeniyle protokol süreleri değişiklik gösterebilir ve bu süreler
ampirik olarak belirlenmelidir. Geri kazanım koşulları ve protokol süreleri optimize edilirken negatif reaktif kontrolleri kullanılmalıdır.

Sorun Giderme

İyileştirici işlem için referans 3'e bakın.
Olağan dışı bir boyamayı bildirmek için yerel distribütörünüzle veya Leica Biosystems bölge ofisiyle iletişime geçin.
Daha Fazla Bilgi
BOND reaktifleri ile immün-boyama hakkında daha fazla bilgi BOND kullanıcı belgelerinizde "BOND Reaktiflerinin Kullanımı"
bölümündeki Principle of the Procedure (Prosedür İlkesi), Materials Required (Gereken Materyaller), Specimen Preparation (Numune
Hazırlama), Quality Control (Kalite Kontrol), Assay Verification (Miktar Tayini Doğrulama), Interpretation of Staining (Boyanmanın
Yorumlanması), Key to Symbols on Labels (Etiketlerdeki Semboller için Anahtar) ve General Limitations (Genel Sınırlamalar) başlıkları
altında bulunabilir.
Kaynakça
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Yayın Tarihi
03 Nisan 2020
PA0216
Page 26