Αντιμετώπιση Προβλημάτων; Πρόσθετες Πληροφορίες - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• Για να πάρετε αντίγραφο του Δελτίου Δεδομένων Ασφαλείας Υλικού, επικοινωνήστε με τον τοπικό σας διανομέα ή το τοπικό γραφείο
της Leica Biosystems, ή εναλλακτικά, επισκεφθείτε τον Ιστότοπο της Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
• Τα δείγματα, πριν και μετά τη μονιμοποίηση, και όλα τα υλικά που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να αντιμετωπίζονται ως ικανά
μετάδοσης λοίμωξης και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις2. Μην κάνετε ποτέ αναρρόφηση
αντιδραστηρίων με πιπέτα από το στόμα και αποφεύγετε την επαφή του δέρματος και των βλεννογόνων με αντιδραστήρια ή δείγματα.
Εάν τα αντιδραστήρια ή τα δείγματα έλθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετε με άφθονες ποσότητες νερού. Ζητήστε τη
συμβουλή ιατρού.
• Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς ή τοπικούς κανονισμούς για την απόρριψη οποιονδήποτε δυνητικώς τοξικών
συστατικών.
• Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διότι ενδέχεται να συμβεί αύξηση μη ειδικής χρώσης.
• Ανάκτηση, χρόνοι ή θερμοκρασίες επώασης διαφορετικές από αυτές που καθορίζονται ενδέχεται να δώσουν εσφαλμένα
αποτελέσματα. Οποιαδήποτε παρόμοια αλλαγή πρέπει να επικυρωθεί από τον χρήστη.
Οδηγίες Xρήσης
Το πρωτογενές αντίσωμα PD-1 (CAL20) αναπτύχθηκε για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα BOND (περιλαμβάνει το σύστημα
Leica BOND-MAX και το σύστημα Leica BOND-III) σε συνδυασμό με το σύστημα ανίχνευσης BOND Polymer Refine Detection. Το
συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης για το πρωτογενές αντίσωμα PD-1 (CAL20) είναι το IHC Protocol F. Συνιστάται ανάκτηση επιτόπου
επαγόμενη με θερμότητα χρησιμοποιώντας το BOND Epitope Retrieval Solution 2 (AR9640) για 20 λεπτά.
Αναμενόμενα αποτελέσματα
Φυσιολογικοί ιστοί
Ο κλώνος CAL20 ανιχνεύει την πρωτεΐνη PD-1 στο κυτταρόπλασμα/τη μεμβράνη ενός ποσοστού των κυττάρων του ανοσοποιητικού.
Παρατηρήθηκε χρώση εντός των κυττάρων του ανοσοποιητικού στους περισσότερους τύπος ιστών και ιδιαίτερα στους λεμφαδένες,
τις αμυγδαλές, τον σπλήνα και τον θύμο αδένα. Επίσης παρατηρήθηκε χρώση στα κυψελιδικά μακροφάγα. (Συνολικός αριθμός
φυσιολογικών περιστατικών που αξιολογήθηκαν = 135)
Όγκοι ιστών
Ο κλώνος CAL20 προκάλεσε χρώση σε 3/101 λεμφώματα (συμπεριλαμβανομένων 2/6 λεμφωμάτων Τ κυττάρων τύπου
αγγειοανοσοβλαστικής λεμφαδενοπάθειας, 1/55 λεμφωμάτων των διάχυτων Β μεγαλοκυττάρων, 1/6 αναπλαστικών λεμφωμάτων των
μεγαλοκυττάρων, 0/16 λεμφωμάτων Τ κυττάρων, 0/7 λεμφωμάτων Hodgkin, 0/5 εξωλεμφαδενικών λεμφωμάτων οριακής ζώνης, 0/3
θυλακιωδών λεμφωμάτων, 0/2 λεμφωμάτων Burkitt και 0/1 λέμφωμα NOS) και 1/5 όγκους του θυρεοειδούς (συμπεριλαμβανομένων 1/1
θυλακιώδους καρκινώματος, 0/3 θυλακιωδών αδενωμάτων και 0/1 θηλώδους καρκινώματος του θυρεοειδούς). Δεν ανιχνεύθηκε χρώση
(εκτός των διηθητικών κυττάρων του ανοσοποιητικού) σε όγκους του εντέρου (0/8) (συμπεριλαμβανομένων 0/6 αδενοκαρκινωμάτων
και 0/2 αδενωμάτων), μεταστατικούς όγκους (0/5), όγκους του μαστού (0/5) (συμπεριλαμβανομένων 0/3 διηθητικών πορογενών
καρκινωμάτων και 0/2 ιναδενωμάτων), ηπατοκυτταρικά καρκινώματα (0/4), όγκους του εγκεφάλου (0/4) (συμπεριλαμβανομένων 0/3
μηνιγγιωμάτων και 0/1 αστροκυτώματος), όγκους του πνεύμονα (0/4) (συμπεριλαμβανομένων 0/2 καρκινωμάτων πλακωδών κυττάρων,
0/1 αδενοκαρκινώματος και 0/1 μικροκυτταρικού καρκινώματος), όγκους των ωοθηκών (0/3) (συμπεριλαμβανομένου 0/1 όγκου των
κυττάρων της κοκκώδους στιβάδας, 0/1 αδενοκαρκινώματος και 0/1 αδενοκαρκινώματος του ενδομητρίου), καρκινώματα πλακωδών
κυττάρων του οισοφάγου (0/3), αδενοκαρκινώματα του στομάχου (0/3), όγκους των επινεφριδίων (0/2), (συμπεριλαμβανομένων 0/1
αδενώματος του φλοιού και 0/1 φλοιοεπινεφριδιακού καρκινώματος), καρκινώματα των μεταβατικών κυττάρων της ουροδόχου κύστης
(0/2), όγκους των οστών (0/2) (συμπεριλαμβανομένων 0/1 οστεοσαρκώματος 0/1 χονδροσαρκώματος), καρκινώματα πλακωδών
κυττάρων του τραχήλου της μήτρας (0/2), αδενοκαρκινώματα του ενδομητρίου (0/2), διαυγοκυτταρικά καρκινώματα του νεφρού (0/2),
αδενοκαρκινώματα του προστάτη (0/2), όγκους των σιελογόνων αδένων (0/2) (συμπεριλαμβανομένων 0/1 πλειομορφικού αδενώματος,
0/1 αδενοειδούς κυστικού καρκινώματος), όγκους του δέρματος (0/2) (συμπεριλαμβανομένων 0/1 καρκινώματος πλακωδών κυττάρων,
0/1 μελανώματος), σεμινώματα (0/2), ένα στοματικό αδενοκαρκίνωμα (0/1), ένα αδενοκαρκίνωμα στο πάγκρεας (0/1), ένα καρκίνωμα
πλακωδών κυττάρων της γλώσσας και μια υπερπλασία προστάτη (Συνολικός αριθμός περιστατικών που αξιολογήθηκαν = 169)
Το PD-1 (CAL20) συνιστάται για την ανίχνευση της ανθρώπινης πρωτεΐνης PD-1 σε φυσιολογικούς και νεοπλασματικούς
ιστούς, ως συμπλήρωμα της συμβατικής ιστοπαθολογίας χρησιμοποιώντας μη ανοσολογικές ιστοχημικές χρώσεις.
Περιορισμοί που Αφορούν ειδικά το Προϊόν
Το PD-1 (CAL20) έχει βελτιστοποιηθεί στη Leica Biosystems για χρήση με το BOND Polymer Refine Detection και τα βοηθητικά
αντιδραστήρια BOND. Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις προτεινόμενες διαδικασίες εξέτασης πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη για
την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω της
διαφοροποίησης στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και πρέπει να προσδιορίζονται
εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να χρησιμοποιούνται
αντιδραστήρια ως αρνητικοί μάρτυρες.
Αντιμετώπιση προβλημάτων
Ανατρέξτε στην παραπομπή 3 για διορθωτικές ενέργειες.
Επικοινωνήστε με τον τοπικό διανομέα ή το τοπικό γραφείο της Leica Biosystems για να αναφέρετε ασυνήθιστη χρώση.
Πρόσθετες πληροφορίες
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια BOND, υπό τους τίτλους «Αρχή της
Διαδικασίας», «Απαιτούμενα υλικά», «Προετοιμασία Δείγματος», «Ποιοτικός Έλεγχος», «Επαλήθευση Προσδιορισμού», «Ερμηνεία της
Χρώσης», «Υπόμνημα για τα σύμβολα στις ετικέτες» και «Γενικοί Περιορισμοί» στην ενότητα «Χρήση αντιδραστηρίων BOND» στο υλικό
τεκμηρίωσης χρήσης της BOND.
PA0216
Page 17