Odpravljanje Težav; Dodatne Informacije - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• Z vzorci, pred fiksiranjem in po njem, in vsemi materiali, s katerimi so prišli v stik, morate rokovati, kot da bi lahko prenašali okužbe, in
pri njihovem odstranjevanju slediti ustreznim previdnostnim ukrepom2. Nikoli ne pipetirajte reagentov skozi usta; pazite, da reagenti
in vzorci ne pridejo v stik s kožo ali sluznicami. Če reagenti ali vzorci pridejo v stik z občutljivimi deli, jih izperite z obilo vode. Poiščite
zdravniško pomoč.
• Sledite zveznim, državnim ali lokalnim predpisom za odstranjevanje katerih koli morebitno strupenih sestavin.
• Pazite, da ne pride do mikrobne okužbe reagentov, saj lahko povzroči nespecifično barvanje.
• Če uporabite čas ali temperature razkrivanja in inkubacije, ki se razlikujejo od navedenih, lahko pridobite napačne rezultate.
Uporabnik mora validirati morebitne spremembe.
Navodila za uporabo
Primarno protitelo PD-1 (CAL20) je bilo razvito za uporabo na avtomatiziranem sistemu BOND (vključuje sistem Leica BOND-MAX
in sistem Leica BOND-III) skupaj s sistemom BOND Polymer Refine Detection. Priporočeni protokol barvanja za primarno protitelo
PD-1 (CAL20) je protokol IHC Protocol F. Za toplotno pridobivanje epitopa se priporoča 20-minutna uporaba raztopine BOND Epitope
Retrieval Solution 2 (AR9640).
Pričakovani rezultati
Normalna tkiva
Klon CAL20 zazna protein PD-1 v citoplazmi/membrani dela imunskih celic. Obarvanje so opazili v imunskih celicah večine vrst tkiva,
zlasti v limfnem vozlu, nebnici, vranici in priželjcu. Obarvanje so opazili tudi pri alveolarnih makrofagih. (Skupno število ocenjenih
normalnih primerov = 135)
Tumorska tkiva
Klon CAL20 je obarval 3/101 limfomov (vključno z 2/6 angioimunoblastnih T-celičnih limfomov, 1/55 razpršenih velikih B-celičnih
limfomov, 1/6 anaplastičnih velikoceličnih limfomov, 0/16 T-celičnih limfomov, 0/7 Hodgkinovih limfomov, 0/5 B-celičnih limfomov
zunanjega vozla marginalnega območja, 0/3 folikularnih limfomov, 0/2 Burkittovih limfomov in 0/1 limfoma NOS) ter 1/5 tumorjev
ščitnice (vključno z 1/1 folikularnega karcinoma, 0/3 folikularnih adenomov in 0/1 papilarnega karcinoma ščitnice). Obarvanja (z izjemo
infiltrirajočih imunskih celic) niso opazili pri črevesnih tumorjih (0/8) (vključno z 0/6 adenokarcinomov in 0/2 adenomov), metastatskih
tumorjih (0/5), tumorjih dojke (0/5) (vključno z 0/3 invazivnih duktalnih karcinomov in 0/2 fibroadenomov), hepatocelularnih karcinomih
(0/4), možganskih tumorjih (0/4) (vključno z 0/3 meningiomov in 0/1 astrocitoma), pljučnih tumorjih (0/4) (vključno z 0/2 ploščatoceličnih
karcinomov, 0/1 adenokarcinoma in 0/1 drobnoceličnega karcinoma), tumorjih jajčnikov (0/3) (vključno z 0/1 tumorja granuloznih celic,
0/1 adenokarcinoma in 0/1 endometrioidnega adenokarcinoma), ploščatoceličnih karcinomih požiralnika (0/3), adenokarcinomih želodca
(0/3), tumorjih nadledvične žleze (0/2) (vključno z 0/1 kortikalnega adenoma in 0/1 adrenokortikalnega karcinoma), karcinomih prehodnih
celic sečnega mehurja (0/2), kostnih tumorjih (0/2) (vključno z 0/1 osteosarkoma in 0/1 hondrosarkoma), ploščatoceličnih karcinomih
materničnega vratu (0/2), endometrijskih adenokarcinomih (0/2), svetloceličnih karcinomih ledvic (0/2), adenokarcinomih prostate
(0/2), tumorjih žleze slinavke (0/2) (vključno z 0/1 pleomorfnega adenoma, 0/1 adenoidnega cističnega karcinoma), kožnih tumorjih
(0/2) (vključno z 0/1 ploščatoceličnega karcinoma, 0/1 melanoma), seminomih (0/2), oralnem adenokarcinomu (0/1), adenokarcinomu
trebušne slinavke (0/1), ploščatoceličnem karcinomu jezika in hiperplaziji prostate (skupno število ocenjenih primerov = 169).
Izdelek PD-1 (CAL20) se priporoča za zaznavanje proteina PD-1 v normalnih in neoplastičnih tkivih kot dodatna analiza ob
konvencionalni histopatologiji z uporabo neimunskih histokemičnih barvil.
Specifične omejitve izdelka
Družba Leica Biosystems je protitelo PD-1 (CAL20) optimizirala za uporabo s sistemom BOND Polymer Refine Detection in pomožnimi
reagenti BOND. Uporabniki, ki odstopijo od priporočenih preizkusnih postopkov, morajo prevzeti odgovornost za razlago bolnikovih
rezultatov pod temi pogoji. Trajanje protokola se lahko spremeni zaradi razlik pri fiksiranju tkiv in učinkovitosti izboljšave antigena ter se
mora določiti empirično. Uporabiti morate negativne kontrolne reagente, kadar optimizirate pogoje razkrivanja in trajanje protokola.
Odpravljanje težav
Glejte 3. navedbo za ukrep za odpravljanje napake.
Če želite poročati o nenavadnem obarvanju, se obrnite na svojega lokalnega distributerja ali regionalno pisarno družbe Leica
Biosystems.

Dodatne informacije

Dodatne informacije o imunološkem barvanju z reagenti BOND lahko najdete v priloženi dokumentaciji za uporabnike sistema BOND
»Uporaba reagentov BOND« v poglavjih Načelo postopka, Potrebni materiali, Priprava vzorcev, Kontrola kakovosti, Verifikacija testa,
Tolmačenje obarvanja, Legenda za simbole na oznakah in Splošne omejitve.
Literatura
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Datum izdaje
03 april 2020
PA0216
Page 40