Instruções De Utilização; Mais Informação - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• As amostras, antes e depois da fixação, bem como todos os materiais a elas expostos, devem ser manuseadas como se fossem
capazes de transmitir doenças infeciosas e descartadas com as devidas precauções2. Nunca pipete os reagentes com a boca
e evite o contacto dos reagentes e dos espécimes com a pele e as mucosas. Caso os reagentes ou os espécimes entrarem em
contacto com áreas sensíveis, lave com água abundante. Procure assistência médica.
• Consulte os regulamentos locais, nacionais ou internacionais relativamente à eliminação de eventuais componentes que possam ser
tóxicos.
• Minimize a contaminação microbiana dos reagentes, senão poderá ocorrer um aumento da coloração não específica.
• Recuperação, períodos de incubação ou temperaturas diferentes das especificadas podem originar resultados erróneos. Qualquer
alteração deve ser validada pelo utilizador.
Instruções de utilização
O anticorpo primário PD-1 (CAL20) foi desenvolvido para uso no sistema BOND automatizado (inclui o sistema Leica BOND-MAX e o
sistema Leica BOND-III) em combinação com a BOND Polymer Refine Detection. O protocolo de coloração indicado para o anticorpo
primário PD-1 (CAL20) é o IHC Protocol F. Recomenda-se a recuperação de epítopos induzida por calor utilizando a BOND Epitope
Retrieval Solution 2 (AR9640) durante 20 minutos.
Resultados previstos
Tecidos normais
O clone CAL20 deteta a proteína PD-1 no citoplasma/na membrana de uma proporção das células imunitárias. Observou-se coloração
nas células imunitárias na maioria dos tipos de tecido, e particularmente no nó linfático, amígdala, baço e glândula do timo. Também foi
observada coloração em macrófagos alveolares. (Número total de casos normais avaliados = 135)
Tecidos tumorais
O clone CAL20 corou 3/101 linfomas (incluindo 2/6 linfomas angioimunoblásticos das células T, 1/55 linfomas difusos de grandes
células B, 1/6 linfomas anaplásicos de células grandes, 0/16 linfomas de células T, 0/7 linfomas de Hodgkin, 0/5 linfomas das
células B da zona marginal extranodal, 0/3 linfomas foliculares, 0/2 linfomas de Burkitt e 0/1 linfoma NOS) e 1/5 tumores da tiroide
(incluindo 1/1 carcinoma folicular, 0/3 adenomas foliculares e 0/1 carcinoma papilar da tiroide). Não foi detetada qualquer coloração
(para além das células imunitárias infiltrantes) em tumores do intestino (0/8) (incluindo 0/6 adenocarcinomas e 0/2 adenomas),
tumores metastáticos (0/5), tumores da mama (0/5) (incluindo 0/3 carcinomas ductais invasivos e 0/2 fibroadenomas), carcinomas
hepatocelulares (0/4), tumores cerebrais (0/4) (incluindo 0/3 meningiomas e 0/1 astrocitoma), tumores dos pulmões (0/4) (incluindo 0/2
carcinomas de células escamosas, 0/1 adenocarcinoma e 0/1 carcinoma de pequenas células), tumores dos ovários (0/3) (incluindo
0/1 tumor de células granulosas, 0/1 adenocarcinoma e 0/1 adenocarcinoma endometrioide), carcinomas de células escamosas do
esófago (0/3), adenocarcinomas do estômago (0/3), tumores da glândula adrenal (0/2) (incluindo 0/1 adenoma cortical e 0/1 carcinoma
adrenocortical), carcinomas de células de transição da bexiga (0/2), tumores ósseos (0/2) (incluindo 0/1 osteossarcoma e 0/1
condrossarcoma), carcinomas de células escamosas do colo do útero (0/2), adenocarcinomas endometriais (0/2), carcinomas renais
de células claras (0/2), adenocarcinomas da próstata (0/2), tumores da glândula salivar (0/2) (incluindo 0/1 adenoma pleomórfico, 0/1
carcinoma adenoide cístico), tumores da pele (0/2) (incluindo 0/1 carcinoma de células escamosas, 0/1 melanoma), seminomas (0/2),
um adenocarcinoma oral (0/1), um adenocarcinoma pancreático (0/1), um carcinoma de células escamosas da língua e uma hiperplasia
prostática (número total de casos avaliados = 169)
O PD-1 (CAL20) é recomendado para a deteção da proteína PD-1 em tecidos normais e neoplásicos, como auxiliar da
histopatologia convencional, através da utilização de corantes histoquímicos não imunológicos.
Limitações específicas do produto
O PD-1 (CAL20) foi otimizado na Leica Biosystems para utilização com a BOND Polymer Refine Detection e reagentes auxiliares
BOND. Os utilizadores que se desviem dos procedimentos de teste recomendados devem assumir a responsabilidade pela
interpretação dos resultados do paciente nestas circunstâncias. O tempo de protocolo poderá variar, devido à variação na fixação de
tecido e na eficácia do reforço antigénico, e deve ser determinado empiricamente. Os controlos negativos de reagente deverão ser
utilizados durante a otimização das condições de recuperação e dos tempos de protocolo.
Resolução de problemas
Consulte a referência 3 quanto a medidas corretivas.
Contacte o distribuidor local ou o gabinete regional da Leica Biosystems para comunicar colorações anormais.
Mais informação
Pode encontrar mais informação sobre a ISH com reagentes BOND nas secções Princípio do procedimento, Materiais necessários,
Preparação do espécime, Controlo de qualidade, Verificação do teste, Interpretação da coloração, Significado dos símbolos nos rótulos
e Limitações gerais em "Utilização dos Reagentes BOND" na documentação de utilizador BOND.
Bibliografia
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2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
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3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Data de emissão
03 de Abril de 2020
PA0216
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