Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi page 43

• Údaje o likvidaci jakýchkoli potenciálně toxických komponent prostudujte ve federálních, státních nebo místních nařízeních.
• Minimalizujte mikrobiální kontaminaci reagencií, mohlo by dojít ke zvýšení výskytu nespecifického barvení.
• Získávání, inkubační doby nebo teploty jiné než specifikované mohou vést k chybným výsledkům. Všechny takové změny musí být
uživatelem validovány.
Návod k použití
Primární protilátka PD-1 (CAL20) byla vyvinuta k použití v automatickém systému BOND system (včetně systému Leica BOND-MAX
system a Leica BOND-III system) v kombinaci se soupravou BOND Polymer Refine Detection. Protokol doporučeného barvení primární
protilátky PD-1 (CAL20) je IHC Protocol F. Teplem indukované odmaskování epitopu se doporučuje s použitím roztoku BOND Epitope
Retrieval Solution 2 (AR9640) po dobu 20 minut.
Očekávané výsledky
Normální tkáně
Klon CAL20 detekuje protein PD-1 v cytoplazmě/membráně části imunních buněk. Barvení bylo pozorováno v imunních buňkách ve
většině typů tkání a zejména v lymfatických uzlinách, tonzile, slezině a brzlíku. Barvení bylo pozorováno také u alveolárních makrofágů.
(Celkový počet normálních vyšetřovaných tkání = 135)
Nádorové tkáně
Klon CAL20 zbarvil 3/101 lymfomů (včetně 2/6 angioimunoblastických lymfomů T buněk, 1/55 difuzních velkých lymfomů B buněk,
1/6 anaplastických velkobuněčných lymfomů, 0/16 lymfomů T buněk, 0/7 Hodgkinových lymfomů, 0/5 extranodálního B-buněčného
lymfomu z buněk marginální zóny, 0/3 folikulárních lymfomů, 0/2 Burkittových lymfomů a 0/1 lymfom blíže nespecifikovaný) a 1/5
nádorů štítné žlázy (včetně 1/1 folikulárního karcinomu, 0/3 folikulárních adenomů a 0/1 papilárního karcinomu štítné žlázy). Žádné
zbarvení (vyjma infiltrujících imunních buněk) nebylo detekováno u nádorů střev (0/8) (včetně 0/6 adenokarcinomů a 0/2 adenomů),
metastatických nádorů (0/5), nádorů prsu (0/5) (včetně 0/3 invazivního duktálního karcinomu a 0/2 fibroadenomů), hepatocelulárních
karcinomů (0/4), nádorů mozku (0/4) (včetně 0/3 meningiomů a 0/1 astrocytomu), nádorů plic (0/4) (včetně 0/2 dlaždicobuněčných
karcinomů, 0/1 adenokarcinomu a 0/1 malobuněčného karcinomu), nádorů vaječníků (0/3) (včetně 0/1 nádoru buněk granulózy,
0/1 adenokarcinomu a 0/1 endometrioidního adenokarcinomu), dlaždicobuněčných karcinomů jícnu (0/3), adenokarcinomů žaludku
(0/3), nádorů nadledvinek (0/2) (včetně 0/1 kortikálního adenomu a 0/1 adrenokortikálního karcinomu), karcinomů přechodných
buněk močového měchýře (0/2), nádorů kostí (0/2) (včetně 0/1 osteosarkomu a 0/1 chondrosarkomu), dlaždicobuněčných karcinomů
děložního čípku (0/2), adenokarcinomů endometria (0/2), světlobuněčných karcinomů ledvin (0/2), adenokarcinomů prostaty (0/2),
nádorů slinných žláz (0/2) (včetně 0/1 pleomorfního adenomu, 0/1 adenoidního cystického karcinomu), nádorů kůže (0/2) (včetně 0/1
dlaždicobuněčného karcinomu, 0/1 melanomu), seminomů (0/2), adenokarcinomu dutiny ústní (0/1), adenokarcinomu slinivky břišní
(0/1), dlaždicobuněčného karcinomu jazyka a hyperplazie prostaty (celkový počet hodnocených případů = 169)
Protilátka PD-1 (CAL20) se doporučuje k detekci proteinu PD-1 v normálních a neoplastických tkáních, jako doplněk ke
konvenční histopatologii s použitím neimunologických histochemických nátěrů.
Omezení specifická pro tento produkt
PD-1 (CAL20) byla společností Leica Biosystems optimalizována pro použití se soupravou BOND Polymer Refine Detection a s
pomocnými reagenciemi BOND. Uživatelé, kteří se při vyšetření odchýlí od doporučeného postupu, musí za těchto okolností přijmout
odpovědnost za interpretaci výsledků u pacienta. Doby uvedené v protokolu se mohou lišit v důsledku odchylek při fixaci tkání a
účinnosti při zvýraznění antigenu a musí být stanoveny empiricky. Při optimalizaci podmínek při získávání a dob v protokolu musí být
použity reagencie pro negativní kontrolu.
Řešení problémů
Nápravná opatření jsou uvedena v odkaze 3.
S hlášením neobvyklého barvení kontaktujte místního distributora nebo oblastní kancelář společnosti Leica Biosystems.
Další informace
Další informace o imunobarvení reagenciemi BOND naleznete pod názvy Princip metody, Potřebné materiály, Příprava vzorku, Kontrola
kvality, Ověření testů, Interpretace barvení, Vysvětlení symbolů na štítcích a Obecná omezení v uživatelské dokumentaci BOND, v bodě
„Použití reagencií BOND".
Literatura
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Datum vydání
03 duben 2020
PA0216
Page 42