Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi page 34

• Specimenele, înainte și după fixare, precum și toate materialele expuse la acestea, trebuie manipulate ca și când ar avea potențialul
de a transmite infecții și trebuie eliminate luând măsurile de precauție adecvate2. Nu pipetați niciodată reactivii cu gura și evitați
contactul reactivilor și probelor cu pielea și membranele mucoase. Dacă reactivii sau probele vin în contact cu suprafețele sensibile,
spălați cu apă din abundență. Solicitați asistență medicală.
• Consultați reglementările naționale, județene sau locale pentru informații privind eliminarea oricăror componente cu potențial toxic.
• Reduceți la minimum contaminarea microbiană a reactivilor, în caz contrar poate apărea o creștere a colorării nespecifice.
• Timpii sau temperaturile de recuperare, incubare care diferă de valorile specificate pot genera rezultate eronate. Orice astfel de
modificare trebuie validată de către utilizator.
Instrucțiuni de utilizare
Anticorpul primar PD-1 (CAL20) a fost dezvoltat pentru utilizarea pe sistemul automat BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX și
sistemul Leica BOND-III) în combinație cu BOND Polymer Refine Detection. Protocolul de colorare recomandat pentru anticorpul primar
PD-1 (CAL20) este IHC Protocol F. Se recomandă recuperarea indusă de căldură a epitopilor utilizând BOND Epitope Retrieval Solution
2 (AR9640) timp de 20 de minute.
Rezultate așteptate
Țesuturi normale
Clona CAL20 detectează proteina PD-1 în citoplasma/membrana unei proporții de celule imune. S-a detectat colorația în celulele imune
ale celor mai multe tipuri de țesuturi și, în mod special, în ganglioni limfatici, amigdale, splină și glanda timus. S-a observat de asemenea
colorație în macrofagele alveolare. (Numărul total al cazurilor normale evaluate = 135)
Țesuturi tumorale
Clona CAL20 a colorat 3/101 limfoame (incluzând 2/6 limfoame angioimunoblastice cu celule T, 1/55 limfoame difuze cu celule B mari,
1/6 limfoame anaplastice cu celule mari, 0/16 limfoame cu celule T, 0/7 limfoame Hodgkin, 0/5 limfoame extra nodale de zonă marginală
cu celule B, 0/3 limfoame foliculare, 0/2 limfoame Burkitt și 0/1 limfom NOS) și 1/5 tumori tiroidiene (incluzând 1/1 carcinom folicular,
0/3 adenoame foliculare și 0/1 carcinom tiroidian papilar). Nu a fost detectată vreo colorație (în afara celulelor imune infiltrate) în tumori
intestinale (0/8) (incluzând 0/6 adenocarcinoame și 0/2 adenoame), tumori metastatice (0/5), tumori mamare (0/5) (incluzând 0/3
carcinom ductal invaziv și 0/2 fibroadenoame), carcinoame hepatocelulare (0/4), tumori cerebrale (0/4) (incluzând 0/3 meningioame și
0/1 astrocitom), tumori pulmonare (0/4) (incluzând 0/2 carcinoame cu celula scuamoase, 0/1 adenocarcinom și 0/1 carcinom cu celule
mici), tumori ovariene (0/3) (incluzând 0/1 tumoare cu celule granuloase, 0/1 adenocarcinom și 0/1 adenocarcinom endometrioid),
carcinoame cu celule scuamoase ale esofagului (0/3), adenocarcinoame ale stomacului (0/3), tumori ale glandei suprarenale (0/2)
(incluzând 0/1 adenom cortical și 0/1 carcinom adrenocortical), carcinoame cu celule tranziționale ale vezicii urinare (0/2), tumori osoase
(0/2) (incluzând 0/1 osteosarcom și 0/1 condrosarcom), carcinoame cu celule scuamoase ale colului uterin (0/2), adenocarcinoame
endometriale (0/2), carcinoame cu celule clare ale rinichiului (0/2), adenocarcinoame ale prostatei (0/2), tumori ale glandei salivare (0/2)
(incluzând 0/1 adenom pleomorfic, 0/1 carcinom chistic adenoid), tumori ale pielii (0/2) (incluzând 0/1 carcinom cu celule scuamoase,
0/1 melanom), seminoame (0/2), un adenocarcinom al cavității bucale (0/1), un adenocarcinom pancreatic (0/1), un carcinom cu celule
scuamoase al limbii și o hiperplazie a prostatei (Numărul total al cazurilor evaluate = 169)
PD-1 (CAL20) este recomandat pentru detectarea antigenului PD-1 uman în țesuturile normale și neoplazice, ca adjuvant al
histopatologiei convenționale, utilizând coloranți histochimici non-imunologici.
Restricții specifice produsului
PD-1 (CAL20) a fost optimizat la Leica Biosystems pentru utilizarea cu BOND Polymer Refine Detection și cu reactivii auxiliari BOND.
Utilizatorii care se abat de la procedurile de testare recomandate trebuie să accepte responsabilitatea pentru interpretarea rezultatelor
pacientului în aceste circumstanțe. Timpii protocolului pot varia, datorită variației în fixarea țesutului și eficacității intensificării antigenului,
și trebuie să fie determinați empiric. Atunci când se optimizează condițiile de recuperare și timpii protocolului, trebuie să fie utilizați
reactivi de control negativ.
Rezolvarea problemelor
Consultați referința 3 pentru acțiuni de remediere.
Contactați distribuitorul dumneavoastră local sau biroul regional al Leica Biosystems pentru raportarea colorării neobișnuite.
Informații suplimentare
Informații suplimentare referitoare la imunocolorarea cu reactivii BOND, sub titlurile Principiul procedurii, Materiale necesare, Pregătirea
specimenului, Controlul calității, Verificarea analizei, Interpretarea colorării, Codul simbolurilor de pe etichete și Limitări generale pot fi
găsite în „Utilizarea reactivilor BOND" din documentația dumneavoastră de utilizare a sistemului BOND.
Bibliografie
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Wang C, Hillsamer P and Kim CH. Phenotype, effector function, and tissue localization of PD-1-expressing human follicular helper T
cell subsets. BMC Immunology. 2011; 12:53.
5. Roncador G, Garcia Verdes-Montenegro J, Tedoldi S et al. Expression of two markers of germinal center T cells (SAP and PD-1) in
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica 2007; 92:1059-1066.
6. Dorfman DM, Brown JA, Shahsafaie MS et al. Programmed Death-1 (PD-1) is a marker of germinal center-associated T cells and
angioimmunoblastic T-cell lymphoma. American Journal of Surgical Pathology 2006; 30:802-810.
Data publicării
03 aprilie 2020
PA0216
Page 33