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Le déterminant antigénique du CCP est
dérivé de la protéine précurseur
appartenant à la filaggrine, un groupe
de protéines agrégantes de filaments.
Au cours de la phase finale de la
différenciation des cellules épidermiques,
les résidus arginines de la filaggrine sont
déimmunisés en citrulline.
anticorps visant les séquences de
peptides contenant de la citrulline dans les
principaux déterminants antigéniques sont
des marqueurs prédictifs de la polyarthrite
rhumatoïde chez les patients affectés.
Diverses études ont démontré une
sensibilité entre 41 et 89 % et une
spécificité entre 89 et 99 % des anticorps
anti-CCP pour le diagnostic de la
polyarthrite rhumatoïde (PR).
que les anticorps IgG dirigés contre les
peptides cycliques citrullinés (ACPA) sont
plus spécifiques que le facteur rhumatoïde
(FR), ils sont utilisés pour différentier les
diverses causes d'arthrite.
Principe du test
Le dosage des IgG anti-CCP
sur IMMULITE 2000 est un dosage
immunométrique séquentiel en phase
solide, à deux cycles par
chimiluminescence. La phase solide,
une bille de polystyrène, est revêtue
d'un antigène antipeptide citrulliné (CCP)
cyclique. La phase liquide est constituée
de deux réactifs : 1) à base de protéines
et 2) de la phosphatase alcaline (intestins
de veau) conjuguée à des anticorps
monoclonaux murins anti IgG humaine
conservés dans un tampon.
Au cours du premier cycle, l'échantillon
du patient et le tampon sont incubés
ensemble avec la bille revêtue pendant
30 minutes. Pendant ce temps-là,
l'IgG humaine de l'échantillon
se lie au CCP présent sur la bille.
L'échantillon non lié est ensuite éliminé
grâce à des lavages par centrifugation.
Au cours du second cycle, l'enzyme
conjuguée à l'anticorps monoclonal murin
anti IgG humain est ajouté au godet
réactionnel original pour une incubation
supplémentaire de 30 minutes.
L'enzyme conjuguée à l'anticorps
monoclonal murin anti IgG humain
se lie à l'IgG anti-CCP immobilisé sur
la bille. Le conjugué enzymatique non lié
est ensuite éliminé par lavages
20
avec centrifugation. Enfin, le substrat
chimiluminescent est ajouté au godet
réactionnel contenant la bille, le signal
généré est proportionnel à l'enzyme liée.
Cycles d'incubation : 2 × 30 minutes
Délai d'obtention du premier résultat :
65 minutes
5
Les auto-
Recueil des échantillons
Il est recommandé de clarifier
les échantillons lipémiques
5,6
par ultracentrifugation.
Les échantillons hémolysés
ou très contaminés peuvent donner
des résultats erronés.
La centrifugation des échantillons
7
Etant donné
sériques avant la formation complète
du caillot peut entraîner la présence
de fibrine. Pour éviter les résultats erronés
dus à la présence de fibrine, s'assurer
de la formation complète du caillot avant
8
de centrifuger les échantillons.
La formation du caillot peut prendre plus
de temps avec certains échantillons ;
en particulier ceux prélevés
sur des patients sous anticoagulants.
Les tubes pour prélèvements sanguins
provenant de fabricants différents peuvent
donner des résultats différents,
selon les matériaux et additifs utilisés,
y compris gels ou barrières physiques,
activateurs de la coagulation et/ou
anticoagulants. Le dosage
des IgG anti-CCP sur IMMULITE 2000
n'a pas été testé sur tous les types
de tubes possibles. Consulter le chapitre
Autres types d'échantillon pour plus
de détails sur les tubes qui ont été testés.
Volume nécessaire : 5 µl de sérum
ou plasma (EDTA et Héparine de lithium).
Après une prédilution automatique, 10 µl
de l'échantillon dilués sont utilisés pour les
immunodosage.
Facteur de prédilution automatique : 40
Conservation : Sérum 2 jours à
température ambiante, 7 jours à une
température comprise entre 2–8°C ; ou
12 mois maximum à une température
inférieure ou égale à –20°C.
Plasma 2 jours à température ambiante,
7 jours à une température comprise entre
2–8°C ; ou 8 mois maximum à une
température inférieure ou égale à –20°C.
IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIL2KPI-15, 2022-02)
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