Ulteriori Informazioni - Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi

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Per lo smaltimento di eventuali componenti potenzialmente tossici consultare i regolamenti nazionali, regionali o locali.
Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti, allo scopo di evitare un aumento di colorazione aspecifica.
Tempi di recupero o incubazione o temperature diversi da quelli specificati possono generare risultati erronei. Qualsiasi cambiamento
del genere deve essere convalidato dall'utilizzatore.
Istruzioni per l'uso
L'anticorpo primario p16 (6H12) è stato sviluppato per l'uso nel sistema automatizzato BOND (include il sistema Leica BOND-MAX e il
sistema Leica BOND-III ) in combinazione con il BOND Polymer Refine Detection. Il protocollo di colorazione consigliato per l'anticorpo
primario p16 (6H12) è l'IHC Protocol F. Per lo smascheramento termoindotto dell'epitopo si consiglia l'uso della BOND Epitope Retrieval
Solution 2 per 20 minuti.
Risultati attesi
Tessuti normali
Il clone 6H12 rileva la proteina p16 espressa in un modello altamente limitato in determinate cellule all'interno di tessuti specifici.
Il modello di colorazione è nucleare, sebbene la colorazione citoplasmatica sia osservata nella maggior parte dei tipi di cellule che
esprimono p16. È stata osservata immunoreattività nell'epitelio reticolato delle cripte e nelle cellule dendritiche follicolari delle tonsille,
nelle isole di Langerhans del pancreas, nelle cellule di Leydig dei testicoli, nelle cellule sparse uroteliali e occasionalmente nelle cellule
epiteliali ghiandolari dell'endometrio. È stata occasionalmente osservata colorazione debole nelle ghiandole antrali dello stomaco,
nell'epitelio ghiandolare e nel mioepitelio del seno e nel surrene. È stata inoltre osservata colorazione dei macrofagi e di alcuni
fibroblasti. Nessuna ulteriore colorazione è stata riscontrata in una serie di altri tessuti normali esaminati (Numero totale di casi normali
= 149).
Tessuti neoplastici
Il clone 6H12 ha colorato 30 di 42 cancri cervicali (compresi 25 di 31 carcinomi a cellule squamose della cervice, 2 di 4 adenocarcinomi
della cervice, 2 di 2 adenocarcinomi endometrioidi, 1 di 2 adenocarcinomi endocervicali, 0 di 2 adenocarcinomi di tipo intestinale e 0 di 1
carcinoma sieroso papillare), 21 di 39 carcinomi orofaringei a cellule squamose, 3 di 6 tumori del seno (compresi 2 di 4 carcinomi duttali
invasivi e 1 di 2 fibroadenomi), 2 di 10 tumori dell'intestino (compresi 2 di 4 adenocarcinomi del colon, 0 di 3 adenocarcinomi del retto,
0 di 2 adenomi dell'intestino e 0 di 1 adenocarcinoma dell'intestino tenue), 2 di 5 carcinomi epatocellulari, 2 di 5 tumori della testa e del
collo (compresi 1 di 1 adenocarcinoma della cavità orale, 1 di 1 adenoma pleomorfo delle ghiandole salivari, 0 di 1 carcinoma adenoido-
cistico, 0 di 1 carcinoma a cellule squamose della lingua e 0 di 1 carcinoma nasofaringeo), 2 di 4 tumori del cervello (compresi 1 di 3
meningiomi e 1 di 1 astrocitoma), 2 di 4 adenocarcinomi dello stomaco, 2 di 4 tumori del polmone (compresi 1 di 1 adenocarcinoma,
1 di 1 carcinoma a piccole cellule e 0 di 2 carcinomi a cellule squamose), 2 di 3 adenocarcinomi della prostata, 2 di 2 adenocarcinomi
dell'endometrio, 1 di 5 tumori della tiroide (compresi 1 di 1 carcinoma follicolare, 0 di 1 adenocarcinoma papillare follicolare e 0 di
3 adenomi), 1 di 5 tumori metastatici, 1 di 4 carcinomi a cellule squamose dell'esofago, 1 di 4 tumori dell'ovaio (compresi 1 di 2
adenocarcinomi endometrioidi, 0 di 1 tumore a cellule della granulosa e 0 di 1 adenocarcinoma), 1 di 2 tumori alle ossa (compresi 1 di 1
condrosarcoma e 0 di 1 osteosarcoma) e 1 di 1 adenocarcinoma del pancreas. Nessuna colorazione è stata rilevata nei linfomi (0 di 3),
nei tumori della vescica (0 di 3), nei tumori renali (0 di 3), nei tumori della pelle (0 di 3), nei tumori del surrene (0 di 2), nei seminomi (0 di
2) e in una iperplasia prostatica (0 di 1). (Numero totale di casi anomali esaminati = 162).
L'uso di p16 (6H12) è consigliato per il rilevamento della proteina p16 in tessuti normali e neoplastici, in aggiunta
all'istopatologia convenzionale che si avvale di colorazioni istochimiche non immunologiche.
Limitazioni specifiche per il prodotto
Il p16 (6H12) è stato ottimizzato da Leica Biosystems per l'uso con il BOND Polymer Refine Detection e con i reagenti ausiliari BOND.
Gli utenti che modificano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilità dell'interpretazione dei risultati relativi ai
pazienti in tali circostanze. I tempi previsti dal protocollo possono variare in base alle differenze di fissazione tissutale e all'efficienza
di potenziamento dell'antigene e, pertanto, devono essere definiti empiricamente. Durante l'ottimizzazione delle condizioni di
riconoscimento e dei tempi del protocollo occorre utilizzare controlli negativi del reagente.
Ricerca e risoluzione problemi
Per le azioni di rimedio consultare il riferimento bibliografico n. 3.
Se si notano colorazioni inusuali, informarne il distributore di zona o l'ufficio regionale Leica Biosystems.

Ulteriori informazioni

Ulteriori informazioni sull'immunocolorazione con i reagenti BOND, sotto le intestazioni Principio della procedura, Materiali necessari,
Preparazione del campione, Controllo qualità, Verifica del saggio, Interpretazione della colorazione, Legenda dei simboli sulle etichette e
Limitazioni generali, possono essere reperite in "Uso dei reagenti BOND" nella documentazione per l'utilizzatore BOND.
Bibliografia
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Data di pubblicazione
02 Iuglio 2019
PA0016
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