Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi page 25

• Se lokale, regionale eller statlige forskrifter for avfallshåndtering av eventuelle potensielle giftkomponenter.
• Minimer mikrobiell kontaminering av reagenser, ellers kan det forekomme en økning i uspesifikk farging.
• Demaskering, inkuberingstider eller temperaturer annet enn det som er angitt, kan gi unøyaktige resultater. Enhver slik endring må
valideres av brukeren.
Bruksanvisning
p16 (6H12) primært antistoff er optimalt utviklet til bruk på BOND-systemet (inkluderer Leica BOND-MAX-systemet og Leica BOND-
III-systemet) i kombinasjon med BOND Polymer Refine Detection. Anbefalt fargingsprotokoll for p16 (6H12) primært antistoff er IHC
Protocol F. Det anbefales varmeindusert epitop demaskering ved bruk av BOND Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minutter.
Forventede resultater
Normale vev
Klon 6H12 detekterer p16-proteinet som uttrykkes i et svært begrenset mønster i visse celler i spesifikke vev. Fargemønsteret er
kjernefysisk, men cytoplasmisk farging observeres i de fleste celletyper som uttrykker p16. Immunoreaktivitet ble observert i retikulert
kryptepitel og follikulære dendritiske celler i mandel, øyeceller i bukspyttkjertelen, Leydigceller i testisklene, spredte urotelceller og
sporadiske glandulære epitelceller i endometrium. Sporadisk svak farging ble sett i antralkjertler i mage, glandular og myo-epitel i brystet
og i binyrene. Farge i makrofager og noen fibroblaster ble også sett. Ingen ytterligere farging ble observert i en rekke andre normale
vurderte vev (totalt antall normale tilfeller = 149).
Tumorvev
Klon 6H12-farget 30/42 livmorhalskreft (inkludert 25/31 plateepitelkarsinomer i livmorhalsen, 2/4 adenokarcinomer i livmorhalsen,
2/2 endometriide adenokarcinomer, 1/2 endokervikal adenokarcinomer, 0/2 intestinal type adenokarcinomer og 0/1 serøs papillære
karcinomer), 21/39 orofaryngeal plateepitelkarsinom, 3/6 brysttumorer (inkludert 2/4 invasive duktale karcinomer og 1/2 fibroadenomas),
2/10 tumorer i tarmen (inkludert 2/4 adenokarcinomer i tykktarmen, 0/3 adenokarcinomer i endetarmen, 0/2 adenomer i tarmen og 0/1
adenokarcinomer i tynntarmen), 2/5 hepatocellulære karcinomer, 2/5 hode og hals-tumorer (inkludert 1/1 adenokarcinom i munnhulen,
1/1 Pleomorft adenom i spyttkjertelen, 0/1 adenoid cystisk karcinom, 0/1 squamous cellekarsinom i tungen og 0/1 nasopharyngeal
carcinoma), 2/4 hjernesvulster (inkludert 1/3 meningiomer og 1/1 astrocytom), 2/4 adenokarcinomer i magen, 2/4 lungetumorer (inkludert
1/1 adenokarcinom, 1/1 småcellet karcinom og 0/2 plateepitelkarsinom), 2/3 adenokarcinomer i prostata, 2/2 adenokarcinomer i
endometrium, 1/5 skjoldbrusktumorer (inkludert 1/1 follikulær karcinom, 0/1 follikkel papillær adenokarcinom og 0 / 3 adenomer), 1/5
metastaserende svulster, 1/4 squamous cellcarcinomer i spiserøret, 1/4 ovarie tumorer (inkludert 1/2 endometrioid adenokarcinomer, 0/1
granulosa celletumor og 0/1 adenokarcinom), 1/2 bensvulster (inkludert 1/1 kondrosarkom og 0/1 osteosarkom) og 1/1 adenokarsinom
i bukspyttkjertelen. Ingen farging ble oppdaget i lymfomer (0/3), blæretumorer (0/3), nyretumorer (0/3), hudtumorer (0/3), binyretumorer
(0/2), seminomer (0/2) og en prostatahyperplasi (0/1). (Totalt antall unormale tilfeller evaluert = 162).
p16 (6H12) anbefales for deteksjon av p16-protein i normale og neoplastiske vev, som tillegg til konvensjonell histopatologi
med bruk av ikke-immunologiske histokjemiske farger.
Produktspesifikke begrensninger
p16 (6H12) har blitt optimalisert hos Leica Biosystems til bruk med BOND Polymer Refine Detection og BOND-hjelpereagenser.
Brukere som avviker fra de anbefalte testprosedyrene, må ta ansvaret for tolkningen av pasientresultatene under disse forholdene.
Protokolltidene kan variere pga. variasjon i vevsfiksering og effektiviteten til antigenforsterkningen, og må fastslås empirisk. Det skal
brukes negative reagenskontroller når demaskeringsforhold og protokolltider optimeres.
Feilsøking
Se referanse 3 for utbedringstiltak.
Kontakt din lokale forhandler eller regionale kontor for Leica Biosystems for rapportering av uvanlig misfarging.
Mer informasjon
Mer informasjon om immunfarging med BOND-reagenser, under overskriftene Prinsipp for prosedyren, Nødvendige materialer,
Forberedelse av prøvematerialer, Kvalitetskontroll, Analyseverifisering, Tolkning av farging, Symbolforklaring på etiketter og Generelle
begrensninger, finner du under "Bruk av BOND-reagenser" i BOND-brukerdokumentasjonen.
Bibliografi
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Utstedelsesdato
02 juli 2019
PA0016
Page 24