Řešení Problémů - Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi

• Údaje o likvidaci jakýchkoli potenciálně toxických komponent prostudujte ve federálních, státních nebo místních nařízeních.
• Minimalizujte mikrobiální kontaminaci reagencií, mohlo by dojít ke zvýšení výskytu nespecifického barvení.
• Získávání, inkubační doby nebo teploty jiné než specifikované mohou vést k chybným výsledkům. Všechny takové změny musí být
uživatelem validovány.
Návod k použití
Primární protilátka p16 (6H12) byla vyvinuta k použití v automatickém systému BOND system (včetně systému Leica BOND-MAX
system a Leica BOND-III system) v kombinaci se soupravou BOND Polymer Refine Detection. Protokol doporučeného barvení primární
protilátky p16 (6H12) je IHC Protocol F. Teplem indukované odmaskování epitopu se doporučuje s použitím roztoku BOND Epitope
Retrieval Solution 2 po dobu 20 minut.
Očekávané výsledky
Normální tkáně
Klon 6H12 detekuje p16 exprimovaný ve velmi omezeném vzoru v určitých buňkách v konkrétních tkáních. Vzor barvení je nukleární,
ale ve většině typů buněk, které exprimují protein p16 bylo pozorováno cytoplazmatické barvení. Imunoreaktivita byla pozorována
v retikulárním epitelu krypt a folikulárních dendritických buňkách tonzily, ostrůvkových buňkách pankreatu, Leydigových buňkách
varlat, roztroušených urotheliálních buňkách a v občasných žlázových epiteliálních buňkách v endometriu. Občasné slabé barvení
bylo pozorováno v antrálních žlázách žaludku, žlázovém epitelu a myoepitelu prsu a v nadledvinách. Bylo rovněž pozorováno barvení
makrofágů a některých fibroblastů. Další barvení nebylo zjištěno u různých ostatních normálních tkání (celkový počet normálních tkání
= 149).
Nádorové tkáně
Klon 6H12 barvil 30/42 nádorů děložního hrdla (včetně 25/31 dlaždicobuněčných karcinomů děložního hrdla, 2/4 adenokarcinomů
děložního hrdla, 2/2 endometrioidních adenokarcinomů, 1/2 endocervikálních karcinomů, 0/2 adenokarcinomů intestinálního typu a
0/1 serózního papilárního karcinomu), 21/39 orofaryngeálních dlaždicobuněčných karcinomů, 3/6 nádorů prsu (včetně 2/4 invazivních
duktálních karcinomů a 1/2 fibroadenomů), 2/10 nádorů střev (včetně 2/4 adenokarcinomů tlustého střeva, 0/3 adenokarcinomů rekta,
0/2 adenomů střeva a 0/1 adenokarcinomu tenkého střeva), 2/5 hepatocelulárních karcinomů, 2/5 nádorů hlavy a krku (včetně 1/1
adenokarcinomu dutiny ústní, 1/1 pleomorfního adenomu slinné žlázy, 0/1 adenoidního cystického karcinomu, 0/1 dlaždicobuněčného
karcinomu jazyka a 0/1 nasofaryngeálního karcinomu), 2/4 nádorů mozku (včetně 1/3 meningiomů a 1/1 astrocytomu), 2/4
adenokarcinomů žaludku, 2/4 nádorů plic (včetně 1/1 adenokarcinomu, 1/1 malobuněčného karcinomu a 0/2 dlaždicobuněčných
karcinomů), 2/3 adenokarcinomů prostaty, 2/2 adenokarcinomů endometria, 1/5 nádorů štítné žlázy (včetně 1/1 folikulárního karcinomu,
0/1 folikulárního papilárního adenokarcinomu a 0/3 adenomů), 1/5 metastatických nádorů, 1/4 dlaždicobuněčných karcinomů jícnu,
1/4 nádorů vaječníku (včetně 1/2 endometrioidních adenokarcinomů, 0/1 nádoru z buněk granulózy a 0/1 adenokarcinomu), 1/2
kostních nádorů (včetně 1/1 chondrosarkomu a 0/1 osteosarkomu) a 1/1 adenokarcinomu pankreatu. Barvení nebylo pozorováno u
lymfomů (0/3), nádorů močového měchýře (0/3), nádorů ledvin (0/3), kožních nádorů (0/3), adrenálních nádorů (0/2), seminomů (0/2) a
hyperplazie prostaty (0/1). (Celkový počet vyšetřených abnormálních tkání = 162).
Protilátka p16 (6H12) se doporučuje k detekci proteinu p16 v normálních a neoplastických tkáních, jako doplněk ke konvenční
histopatologii s použitím neimunologických histochemických nátěrů.
Omezení specifická pro tento produkt
p16 (6H12) byla společností Leica Biosystems optimalizována pro použití se soupravou BOND Polymer Refine Detection a s pomocnými
reagenciemi BOND. Uživatelé, kteří se při vyšetření odchýlí od doporučeného postupu, musí za těchto okolností přijmout odpovědnost
za interpretaci výsledků u pacienta. Doby uvedené v protokolu se mohou lišit v důsledku odchylek při fixaci tkání a účinnosti při
zvýraznění antigenu a musí být stanoveny empiricky. Při optimalizaci podmínek při získávání a dob v protokolu musí být použity
reagencie pro negativní kontrolu.
Řešení problémů
Nápravná opatření jsou uvedena v odkaze 3.
S hlášením neobvyklého barvení kontaktujte místního distributora nebo oblastní kancelář společnosti Leica Biosystems.
Další informace
Další informace o imunobarvení reagenciemi BOND naleznete pod názvy Princip metody, Potřebné materiály, Příprava vzorku, Kontrola
kvality, Ověření testů, Interpretace barvení, Vysvětlení symbolů na štítcích a Obecná omezení v uživatelské dokumentaci BOND, v bodě
„Použití reagencií BOND".
Literatura
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Datum vydání
02 červenec 2019
PA0016
Page 41