Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi page 14

• Consulte os regulamentos locais, nacionais ou internacionais relativamente à eliminação de eventuais componentes que possam ser
tóxicos.
• Minimize a contaminação microbiana dos reagentes, senão poderá ocorrer um aumento da coloração não específica.
• Recuperação, períodos de incubação ou temperaturas diferentes das especificadas podem originar resultados erróneos. Qualquer
alteração deve ser validada pelo utilizador.
Instruções de utilização
O anticorpo primário p16 (6H12) foi desenvolvido para uso no sistema BOND automatizado (inclui o sistema Leica BOND-MAX e o
sistema Leica BOND-III) em combinação com a BOND Polymer Refine Detection. O protocolo de coloração indicado para o anticorpo
primário p16 (6H12) é o IHC Protocol F. Recomenda-se a recuperação de epitopos induzida por calor utilizando a BOND Epitope
Retrieval Solution 2 durante 20 minutos.
Resultados previstos
Tecidos normais
O clone 6H12 deteta a proteína p16 que é expressa num padrão altamente limitado em determinadas células em tecidos específicos.
O padrão de coloração é nuclear, mas a coloração citoplásmica é observada na maioria dos tipos de células que expressam p16. Foi
observada imunorreatividade no epitélio de cripta reticulada e células dendríticas foliculares nas amígdalas, células ilhotas no pâncreas,
células de Leydig dos testículos, células uroteliais dispersas e nas células epiteliais glandulares ocasionais no endométrio. Foi
observada uma coloração fraca ocasional nas glândulas antrais do estômago, glandular e mioepitélio na mama e na glândula adrenal.
Também foi observada coloração dos macrófagos e alguns fibroblastos. Não foi observada coloração adicional numa variedade de
outros tecidos normais avaliados (número total de casos normais = 149).
Tecidos tumorais
O clone 6H12 corou 30/42 cancros cervicais (incluindo 25/31 carcinomas de células escamosas do útero, 2/4 adenocarcinomas
do útero, 2/2 adenocarcinomas endometrioides, 1/2 adenocarcinomas endocervicais, 0/2 adenocarcinomas do tipo intestinal e 0/1
carcinomas papilares serosos), 21/39 carcinomas de células escamosas orofaríngicas, 3/6 tumores da mama (incluindo 2/4 carcinomas
ductais invasivos e 1/2 fibroadenomas), 2/10 tumores do intestino (incluindo 2/4 adenocarcinomas do cólon, 0/3 adenocarcinomas do
reto, 0/2 adenomas do intestino e 0/1 adenocarcinomas do intestino delgado), 2/5 carcinomas hepatocelulares, 2/5 tumores na cabeça e
pescoço (incluindo 1/1 adenocarcinoma da cavidade oral, 1/1 adenoma pleomórfico da glândula salivar, 0/1 carcinoma adenoide cístico,
0/1 carcinoma de células escamosas da língua e 0/1 carcinoma nasofaríngeo), 2/4 tumores cerebrais (incluindo 1/3 meningiomas
e 1/1 astrocitoma), 2/4 adenocarcinomas do estômago, 2/4 tumores pulmonares (incluindo 1/1 adenocarcinoma, 1/1 carcinoma de
pequenas células e 0/2 carcinoma de células escamosas), 2/3 adenocarcinomas da próstata, 2/2 adenocarcinomas do endométrio, 1/5
tumores da tiroide (incluindo 1/1 carcinoma folicular, 0/1 adenocarcinoma papilar folicular e 0/3 adenomas), 1/5 tumores metastáticos,
1/4 carcinomas de células escamosas do esófago, 1/4 tumores dos ovários (incluindo 1/2 adenocarcinomas endometrioides, 0/1
tumor de célula granulosa e 0/1 adenocarcinoma), 1/2 tumores dos ossos (incluindo 1/1 condrossarcoma e 0/1 osteossarcoma) e 1/1
adenocarcinoma do pâncreas. Não foi detetada coloração em linfomas (0/3), tumores da bexiga (0/3), tumores renais (0/3), tumores da
pele (0/3), tumores adrenais (0/2), seminomas (0/2) e uma hiperplasia da próstata (0/1). (Número total de casos anormais avaliados =
162).
O p16 (6H12) é recomendado para a deteção da proteína p16 em tecidos normais e neoplásicos, como auxiliar da
histopatologia convencional, através da utilização de corantes histoquímicos não imunológicos.
Limitações específicas do produto
O p16 (6H12) foi otimizado na Leica Biosystems para utilização com a BOND Polymer Refine Detection e reagentes auxiliares BOND.
Os utilizadores que se desviem dos procedimentos de teste recomendados devem assumir a responsabilidade pela interpretação dos
resultados do paciente nestas circunstâncias. O tempo de protocolo poderá variar, devido à variação na fixação de tecido e na eficácia
do reforço antigénico, e deve ser determinado empiricamente. Os controlos negativos de reagente deverão ser utilizados durante a
otimização das condições de recuperação e dos tempos de protocolo.
Resolução de problemas
Consulte a referência 3 quanto a medidas corretivas.
Contacte o distribuidor local ou o gabinete regional da Leica Biosystems para comunicar colorações anormais.
Mais informação
Pode encontrar mais informação sobre a ISH com reagentes BOND nas secções Princípio do procedimento, Materiais necessários,
Preparação da amostra, Controlo de qualidade, Verificação do ensaio, Interpretação da coloração, Significado dos símbolos nos rótulos
e Limitações gerais em "Utilização dos Reagentes BOND" na documentação de utilizador BOND.
Bibliografia
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Data de Emissão
02 de Julho de 2019
PA0016
Page 13