Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi page 44

• Likvidáciu prípadných potenciálne toxických súčastí definujú federálne, štátne alebo miestne predpisy.
• Minimalizujte mikrobiálnu kontamináciu činidiel. V opačnom prípade môže dôjsť k zvýšeniu nešpecifického zafarbenia.
• Nedodržanie predpísaných dôb záchytu, inkubačných dôb alebo teplôt môže viesť k nesprávnym výsledkom. Všetky takéto zmeny si
vyžadujú validáciu používateľom.
Návod na použitie
Primárna protilátka p16 (6H12) bola vytvorená na použitie v automatizovanom systéme BOND (zahŕňa systémy Leica BOND-MAX a
Leica BOND-III) v kombinácii so systémom BOND Polymer Refine Detection. Odporúčaný protokol farbenia pre primárnu protilátku p16
(6H12) je IHC Protocol F. Záchyt epitopov s tepelnou indukciou sa odporúča s použitím roztoku BOND Epitope Retrieval Solution 2 na
20 minút.
Očakávané výsledky
Normálne tkanivá
Klon 6H12 deteguje proteín p16, ktorý je v určitých bunkách v rámci špecifických tkanív vyjadrený veľmi obmedzeným vzorom. Vzor
farbenia je nukleárny, ale cytoplazmické zafarbenie bolo zistené vo väčšine typov buniek, ktoré vyjadrujú proteín p16. Imunoreaktivita
bola zistená v retikulovanom epiteli krýpt a folikulárnych dendritických bunkách mandlí, ostrovčekových bunkách v pankrease,
Leydigovych bunkách v semenníkoch, rozptýlených urotelových bunkách a v príležitostných bunkách žľazového epitelu v endometriu.
Príležitostne slabé zafarbenie bolo pozorované v antrálnych žalúdkových žľazách, glandulárnom epiteli a myoepiteli prsníka a
nadobličkách. Bolo tiež pozorované zafarbenie makrofágov a niektorých fibroblastov. V rôznych ďalších normálnych tkanivách nebolo
pozorované žiadne zafarbenie (celkový počet normálnych prípadov = 149).
Nádorové tkanivá
Klon 6H12 zafarbil 30/42 prípadov rakoviny krčka maternice (vrátane 25/31 skvamocelulárnych karcinómov krčka maternice,
2/4 adenokarcinómov krčka maternice, 2/2 endometrioidných adenokarcinómov, 1/2 endocervikálnych adenokarcinómov, 0/2
adenokarcinómov črevného typu a 0/1 seróznych papilárnych karcinómov), 21/39 orofaryngálnych skvamocelulárnych karcinómov,
3/6 nádorov prsníka (vrátane 2/4 invazívnych duktálnych karcinómov a 1/2 fibroadenómov), 2/10 nádorov čriev (vrátane 2/4
adenokarcinómov hrubého čreva, 0/3 adenokarcinómov konečníka, 0/2 adenómov čriev a 0/1 adenokarcinómov tenkého čreva),
2/5 hepatocelulárnych karcinómov), 2/5 nádorov hlavy a krku (vrátane 1/1 adenokarcinómu ústnej dutiny, 1/1 pleomorfného
adenómu slinnej žľazy, 0/1 adenoidného cystického karcinómu, 0/1 skvamocelulárneho karcinómu jazyka a 0/1 nazofaryngálneho
karcinómu), 2/4 nádorov mozgu (vrátane 1/3 meningiómov a 1/1 astrocytómu), 2/4 adenokarcinómov žalúdka, 2/4 nádorov pľúc
(vrátane 1/1 adenokarcinómu, 1/1 malobunkového karcinómu a 0/2 skvamocelulárneho karcinómu), 2/3 adenokarcinómov prostaty,
2/2 adenokarcinómov endometria, 1/5 nádorov štítnej žľazy (vrátane 1/1 folikulárnych karcinómov, 0/1 folikulárneho papilárneho
adenokarcinómu a 0/3 adenómov), 1/5 metastatických nádorov, 1/4 skvamocelulárnych karcinómoch pažeráka, 1/4 nádorov vaječníkov
(vrátane 1/2 endometrioidných adenokarcinómov, 0/1 nádoru granulóznych buniek a 0/1 adenokarcinómu), 1/2 nádorov kostí (vrátane
1/1 chondrosarkómu a 0/1 osteosarkómu) a 1/1 adenokarcinómu pankreasu. Nebolo detegované žiadne zafarbenie lymfómov (0/3),
nádorov močového mechúra (0/3), nádorov obličiek (0/3), nádorov kože (0/3), nádorov nadobličiek (0/2), seminómov (0/2) a prostatickej
hyperplázie (0/1). (Celkový počet abnormálnych vyšetrených prípadov = 162).
p16 (6H12) sa odporúča na detekciu proteínu p16 v normálnych a neoplastických tkanivách ako doplnok konvenčnej
histopatológie za použitia neimunologických histochemických farbení.
Špecifické obmedzenia pre tento výrobok
p16 (6H12) bol v spoločnosti Leica Biosystems optimalizovaný na použitie so systémom BOND Polymer Refine Detection a pomocnými
činidlami BOND. Používatelia, ktorí sa odchýlia od odporúčaných testovacích postupov, musia akceptovať zodpovednosť za
interpretáciu výsledkov pacienta za týchto okolností. Časy podľa protokolu sa môžu líšiť z dôvodu odchýlok vo fixácii tkaniva a účinnosti
zvýraznenia antigénu a musia sa zistiť empiricky. Pri optimalizácii podmienok záchytu a časov podľa protokolov je potrebné použiť
negatívne kontroly činidlom.
Riešenie problémov
Pri náprave môže byť nápomocná referencia 3.
Neobvyklé zafarbenie ohláste miestnemu distribútorovi alebo regionálnej pobočke spoločnosti Leica Biosystems.
Ďalšie informácie
Ďalšie informácie o imunofarbení s činidlami BOND nájdete v častiach Princíp postupu, Požadované materiály, Príprava vzorky, Kontrola
kvality, Overenie testu, Interpretácia zafarbenia, Legenda k symbolom na označení a Všeobecné limitácie v používateľskej dokumentácii
k systému BOND „Používanie činidiel BOND".
Literatúra
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Dátum vydania
02 júl 2019
PA0016
Page 43