Οδηγίες Χρήσης; Αντιμετώπιση Προβλημάτων; Πρόσθετες Πληροφορίες - Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi

• Τα δείγματα, πριν και μετά τη μονιμοποίηση, και όλα τα υλικά που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να αντιμετωπίζονται ως ικανά
μετάδοσης λοίμωξης και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις². Μην κάνετε ποτέ αναρρόφηση
αντιδραστηρίων με πιπέτα με το στόμα και αποφεύγετε την επαφή του δέρματος και των βλεννογόνων με αντιδραστήρια ή δείγματα.
Εάν τα αντιδραστήρια ή τα δείγματα έλθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετε με άφθονες ποσότητες νερού. Ζητήστε τη
συμβουλή ιατρού.
• Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς ή τοπικούς κανονισμούς για την απόρριψη οποιονδήποτε δυνητικώς τοξικών
συστατικών.
• Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διότι ενδέχεται να συμβεί αύξηση μη ειδικής χρώσης.
• Ανάκτηση, χρόνοι ή θερμοκρασίες επώασης διαφορετικές από αυτές που καθορίζονται ενδέχεται να δώσουν εσφαλμένα
αποτελέσματα. Οποιαδήποτε παρόμοια αλλαγή πρέπει να επικυρωθεί από τον χρήστη.
Οδηγίες χρήσης
Το πρωτογενές αντίσωμα p16 (6H12) αναπτύχθηκε για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα BOND (περιλαμβάνει το σύστημα
Leica BOND-MAX και το σύστημα Leica BOND-III) σε συνδυασμό με το σύστημα ανίχνευσης BOND Polymer Refine Detection. Το
συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης για το πρωτογενές αντίσωμα p16 (6H12) είναι το IHC Protocol F. Συνιστάται ανάκτηση επιτόπου
επαγόμενη με θερμότητα χρησιμοποιώντας το BOND Epitope Retrieval Solution 2 για 20 λεπτά.
Αναμενόμενα αποτελέσματα
Φυσιολογικοί ιστοί
Ο κλώνος 6H12 ανιχνεύει την πρωτεΐνη p16 που εκφράζεται με έναν εξαιρετικά περιορισμένο μοτίβο σε ορισμένα κύτταρα εντός
συγκεκριμένων ιστών. Το μοτίβο χρώσης είναι πυρηνικό, αλλά η κυτταροπλασματική χρώση παρατηρείται στους περισσότερους τύπους
κυττάρων που εκφράζουν το p16. Παρατηρήθηκε ανοσοαντιδραστικότητα σε δικτυωμένο κρυπτικό επιθήλιο και σε θυλακοειδή δενδριτικά
κύτταρα στις αμυγδαλές, στα νησίδια κύτταρα στο πάγκρεας, τα κύτταρα Leydig των όρχεων, διασκορπισμένα επιθηλιακά κύτταρα και
σε περιστασιακά αδενώδη επιθηλιακά κύτταρα στο ενδομήτριο. Παρατηρήθηκε περιστασιακή ασθενής χρώση σε κοιλοτικούς αδένες του
στομάχου, αδενώδη και μυοεπιθηλιακά στον μαστό , και στο επινεφρίδιο. Παρατηρήθηκε επίσης χρώση των μακροφάγων και ορισμένων
ινοβλαστών. Δεν παρατηρήθηκε επιπλέον χρώση σε μία ποικιλία άλλων φυσιολογικών ιστών που αξιολογήθηκαν (Συνολικός αριθμός
φυσιολογικών περιστατικών = 149).
Όγκοι ιστών
Ο κλώνος 6H12 παρουσίασε χρώση για 30/42 καρκίνους του τραχήλου (μεταξύ άλλων 25/31 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα του
τραχήλου της μήτρας, 2/4 αδενοκαρκινώματα του τραχήλου της μήτρας, 2/2 ενδομητριοειδή αδενοκαρκινώματα, 1/2 ενδοτραχηλικά
αδενοκαρκινώματα, 0/2 αδενοκαρκινώματα εντερικού τύπου και 0/1 ορώδη θηλώδη καρκινώματα), 21/39 στοματοφαρυγγικά
ακανθοκυτταρικά καρκινώματα, 3/6 όγκους του μαστού (μεταξύ άλλων 2/4 πορογενή διηθητικά καρκινώματα και 1/2 ιναδενώματα), 2/10
όγκους του εντέρου (μεταξύ άλλων 2/4 αδενοκαρκινώματα του παχέος εντέρου, 0/3 αδενοκαρκινώματα του ορθού, 0/2 αδενώματα του
εντέρου και 0/1 αδενοκαρκινώματα του λεπτού εντέρου), 2/5 ηπατοκυτταρικά καρκινώματα, 2/5 όγκους της κεφαλής και του τραχήλου
(μεταξύ άλλων 1/1 αδενοκαρκίνωμα της στοματικής κοιλότητας, 1/1 πλειομορφικό αδένωμα του σιελογόνου αδένα, 0/1 αδενοειδές κυστικό
καρκίνωμα, 0/1 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα της γλώσσας και 0/1 ρινοφαρυγγικό καρκίνωμα), 2/4 όγκους εγκεφάλου (μεταξύ άλλων 1/3
μηνιγγιώματα και 1/1 αστροκύτωμα), 2/4 αδενοκαρκινώματα του στομάχου, 2/4 όγκους πνεύμονα (μεταξύ άλλων 1/1 αδενοκαρκίνωμα,
1/1 μικροκυτταρικό καρκίνωμα και 0/2 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα), 2/3 αδενοκαρκινώματα του προστάτη, 2/2 αδενοκαρκινώματα του
ενδομητρίου, 1/5 όγκους του θυρεοειδούς (μεταξύ άλλων 1/1 θυλακοειδές καρκίνωμα, 0/1 θυλακοειδή θηλώδη αδενοκαρκίνωμα και 0/3
αδενώματα), 1/5 μεταστατικούς όγκους, 1/4 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα του οισοφάγου, 1/4 όγκους των ωοθηκών (μεταξύ άλλων 1/2
ενδομητριοειδή αδενοκαρκινώματα, 0/1 καρκίνος των κυττάρων της κοκκώδους στοιβάδας και 0/1 αδενοκαρκίνωμα), 1/2 όγκους των
οστών (μεταξύ άλλων 1/1 χονδροσάρκωμα και 0/1 οστεοσάρκωμα) και 1/1 αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος. Δεν ανιχνεύθηκε χρώση
σε λεμφώματα (0/3), όγκους ουροδόχου κύστεως (0/3), νεφρικούς όγκους (0/3), δερματικούς όγκους (0/3), επινεφριδιακούς όγκους (0/2),
σεμινώματα (0/2) και υπερπλασία του προστάτη (0/1). (Συνολικός αριθμός μη φυσιολογικών περιστατικών που αξιολογήθηκαν = 162).
Το p16-6H12 συνιστάται για την ανίχνευση της ανθρώπινης πρωτεΐνης p16 σε φυσιολογικούς και νεοπλασματικούς ιστούς, ως
συμπλήρωμα της συμβατικής ιστοπαθολογίας χρησιμοποιώντας μη ανοσολογικές ιστοχημικές χρώσεις.
Περιορισμοί που αφορούν ειδικά το προϊόν
Το p16 (6H12) έχει βελτιστοποιηθεί στην Leica Biosystems για χρήση με το BOND Polymer Refine Detection και τα βοηθητικά
αντιδραστήρια BOND. Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις προτεινόμενες διαδικασίες εξέτασης πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη
για την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω
της διαφοροποίησης στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και συνεπώς πρέπει
να προσδιορίζονται εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να
χρησιμοποιούνται αντιδραστήρια ως αρνητικοί μάρτυρες.
Αντιμετώπιση προβλημάτων
Ανατρέξτε στην παραπομπή 3 για διορθωτικές ενέργειες.
Επικοινωνήστε με τον τοπικό διανομέα ή το τοπικό γραφείο της Leica Biosystems για να αναφέρετε ασυνήθιστη χρώση.
Πρόσθετες πληροφορίες
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια BOND, υπό τους τίτλους «Αρχή της
διαδικασίας», «Απαιτούμενα υλικά», «Προετοιμασία δείγματος», «Ποιοτικός έλεγχος», «Επαλήθευση προσδιορισμού», «Ερμηνεία της
χρώσης», «Υπόμνημα για τα σύμβολα στις ετικέτες» και «Γενικοί περιορισμοί» στην ενότητα «Χρήση αντιδραστηρίων BOND» στο υλικό
τεκμηρίωσης χρήσης της BOND.
PA0016
Page 17