•
Potansiyel olarak toksik bileşenlerin atılmasıyla ilgili yerel, ulusal veya bölgesel düzenlemeleri dikkate alın.
•
Reaktiflerin mikrobik kontaminasyonunu minimize edin, aksi takdirde spesifik olmayan boyamada bir artış meydana gelebilir.
•
Belirtilenlerin dışındaki geri kazanım, inkübasyon süreleri veya sıcaklıklar hatalı sonuçlara neden olabilir. Bu tür herhangi bir değişiklik
kullanıcı tarafından doğrulanmalıdır.
Kullanım Talimatları
p16 (6H12) primer antikoru BOND Polymer Refine Detection ile birlikte otomatik BOND sisteminde (Leica BOND-MAX sistemi ve Leica
BOND-III sistemini içeren) kullanılmak üzere geliştirilmiştir. p16 (6H12) primer antikor için önerilen boyama protokolü IHC Protocol F'tir.
BOND Epitope Retrieval Solution 2 kullanılarak 20 dakika ısı indüklü epitop alımı önerilir.
Öngörülen Sonuçlar
Normal Dokular
6H12 klonu, spesifik dokular içinde belirli hücrelerde çok kısıtlı bir paternde eksprese edilen p16 proteinini saptar. Boyama paterni
nükleerdir, ancak sitoplazmik boyama, p16 eksprese eden çoğu hücre tipinde gözlemlenir. Tonsildeki retiküler kript epitelyum ve foliküler
dendritik hücrelerde, pankreastaki adacık hücrelerinde, testisteki Leydig hücrelerinde, dağılmış ürotelyal hücrelerde ve endometriumdaki
az rastlanan glandüler epitelyal hücrelerde immünoreaktivite gözlemlendi. Midedeki antral bezlerde, memedeki glandüler ve miyo-
epitelyumda ve adrenal bezinde az sıklıkla zayıf boyanma görüldü. Aynı zamanda makrofajlar ve bazı fibroblastlarda boyama görüldü.
Diğer çeşitli normal dokularda boyanma gözlenmedi (Toplam normal olgu sayısı =149).
Tümör Dokuları
6H12 klonu, 30/42 serviks kanserini (25/31 servikal skuamöz hücreli karsinom, 2/4 serviks adenokarsinomu, 2/2 endometrioid
adenokarsinomu, 1/2 endoserviks adenokarsinomu, 0/2 intestinal tip adenokarsinom ve 0/1 seröz papiler karsinom dahil), 21/39
orofarengeal skuamöz hücreli karsinomunu, 3/6 meme tümörünü (2/4 invaziv duktal karsinom ve 1/2 fibroadenom dahil), 2/10 bağırsak
tümörünü (2/4 kolon adenokarsinomu, 0/3 rektum adenokarsinomu, 0/2 bağırsak adenomu ve 0/1 ince bağırsak adenokarsinomu dahil),
2/5 hepatoselüler karsinomu, 2/5 baş ve boyun tümörünü (1/1 oral kavite adenokarsinomu, 1/1 salya bezi pleomorfik adenomu, 0/1
adenoid sistik karsinom, 0/1 dil skuamöz hücreli karsinomu ve 0/1 nazofarengeal karsinom dahil), 2/4 beyin tümörünü (1/3 meninjiyom
ve 1/1 astrositom dahil), 2/4 mide adenokarsinomunu, 2/4 akciğer tümörünü (1/1 adenokarsinom, 1/1 küçük hücreli karsinom ve
0/2 skuamöz hücreli karsinom dahil), 2/3 prostat adenokarsinomunu, 2/2 endometrium adenokarsinomunu, 1/5 tiroid tümörünü (1/1
foliküler karsinom, 0/1 foliküler papiler adenokarsinom ve 0/3 adenom dahil), 1/5 metastatik tümörü, 1/4 özofagus skuamöz hücreli
karsinomunu, 1/4 yumurtalık tümörünü (1/2 endometrioid adenokarsinomu, 0/1 granüloza hücre tümörü ve 0/1 adenokarsinom dahil),
1/2 kemik tümörünü (1/1 kondrosarkom ve 0/1 osteosarkom dahil) ve 1/1 pankreas adenokarsinomunu boyadı. Lenfomalarda (0/3),
mesane tümörlerinde (0/3), renal tümörlerde (0/3), cilt tümörlerinde (0/3), adrenal tümörlerde (0/2), seminomlarda (0/2) ve bir prostatik
hiperplazide (0/1) boyama görülmedi. (Değerlendirilen toplam anormal olgu sayısı = 162).
p16 (6H12), immünolojik olmayan histokimyasal boyamalar kullanılarak yapılan geleneksel histopatolojiye yardımcı olarak
normal ve neoplastik dokularda CD79A proteininin saptanması için önerilir.
Ürüne Özgü Sınırlamalar
p16 (6H12), BOND Polymer Refine Detection'la ve BOND yardımcı reaktiflerle kullanılmak üzere Leica Biosystems'ta optimize edilmiştir.
Önerilen test prosedürlerinden sapan kullanıcılar bu şartlar altında hasta sonuçlarının yorumlanmasının sorumluluğunu almalıdır. Doku
fiksasyonu ve antijen alımının etkinliğindeki değişkenlikler nedeniyle protokol süreleri değişiklik gösterebilir ve bu süreler ampirik olarak
belirlenmelidir. Geri kazanım koşulları ve protokol süreleri optimize edilirken negatif reaktif kontrolleri kullanılmalıdır.
Sorun Giderme
İyileştirici işlem için referans 3'e bakın.
Olağan dışı bir boyamayı bildirmek için yerel distribütörünüzle veya Leica Biosystems bölge ofisiyle iletişime geçin.
Daha Fazla Bilgi
BOND reaktifleri ile immün-boyama hakkında daha fazla bilgi BOND kullanıcı belgelerinizde "BOND Reaktiflerinin Kullanımı"
bölümündeki İşlem Prensipleri, Gereken Materyaller, Numune Hazırlama, Kalite Kontrol, Tahlil Doğrulama, Boyanmanın Yorumlanması,
Etiketlerdeki Semboller için Anahtar ve Genel Sınırlamalar başlıkları altında bulunabilir.
Bibliyografya
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Yayın Tarihi
02 Temmuz 2019
PA0016
Page 26