Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi page 16

• Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser och
förordningar.
• Minimera mikrobisk kontaminering av reagens annars kan en ökning av ospecifik färgning ske.
• Återvinning, inkubationstider eller temperaturer som avviker mot dem angivna kan ge felaktiga resultat. All sådan ändring måste
bekräftas av användaren.
Bruksanvisning
p16 (6H12) primär antikropp utvecklades för användning i det automatiska BOND-systemet (inkluderar Leica BOND-MAX-systemet
och Leica BOND-III -systemet) i kombination med BOND Polymer Refine Detection. Det rekommenderade färgningsprotokollet för p16
(6H12) primär antikropp är IHC Protocol F. Värmeinducerad epitopåtervinning rekommenderas med användning av BOND Epitope
Retrieval Solution 2 i 20 minuter.
Förväntade resultat
Normala vävnader
Klon 6H12 detekterar p16-proteinet som uttrycks i ett mycket begränsat mönster i vissa celler inom specifika vävnader.
Färgningsmönstret är i kärnan, men cytoplasmisk färgning observeras i de flesta celltyper som uttrycker p16. Immunreaktivitet
observerades i retikulerad kryptypepitel och follikulära dendritiska celler i tonsill, cellöar i bukspottkörteln, Leydig-celler i testiklarna,
utspridda urotelceller och i enstaka glandulära epitelceller i endometriet. Enstaka svag färgning sågs i ankelkörtlar i magen, kirtlet och
myo-epitel i bröstet och i binjuran. Färgning av makrofager och vissa fibroblaster sågs också. Ingen ytterligare färgning observerades i
en mängd andra normala vävnader som utvärderades (Totalt antal normala fall = 149).
Tumörvävnader
Klon 6H12 färgade 30/42 livmoderhalscancer (inklusive 25/31 skvettcellscarcinom i livmoderhalsen, 2/4 adenokarcinom i livmoderhalsen,
2/2 endometriida adenokarcinom, 1/2 endokerviska adenokarcinom, 0/2 intestinaltyp adenokarcinom och 0/1 serösa papillära karcinom),
21/39 oropharyngeal squamouscellkarcinomer, 3/6 brösttumörer (inklusive 2/4 invasiva duktala karcinom och 1/2 fibroadenom), 2/10
tumörer i tarmen (inklusive 2/4 adenokarcinom i tjocktarmen, 0/3 adenokarcinom i rektum, 0/2 adenom i tarmen och 0/1 adenokarcinom i
tunntarmen), 2/5 hepatocellulära karcinom, 2/5 huvud och nacktumörer (inklusive 1/1 adenokarcinom i munhålan, 1/1 spytkärls adenom i
spyttkörteln, 0/1 adenoidcystisk karcinom, 0/1 skorpialcellkarcinom i tungan och 0/1 nasofaryngealkarcinom), 2/4 hjärntumörer (inklusive
1/3 meningiom och 1/1 astrocytom), 2/4 adenokarcinom i magen, 2/4 lungtumörer (inklusive 1/1 adenokarcinom, 1/1 smallcellkarcinom
och 0/2 squamouscellkarcinom), 2/3 adenokarcinom i prostata, 2/2 adenokarcinom i endometriumet, 1/5 sköldkörteltumörer (inklusive
1/1 follikelcarcinom, 0/1 follikelpapillär adenokarcinom och 0 / 3 adenom), 1/5 metastatiska tumörer, 1/4 pladecells karcinomer i
matstrupen, 1/4 ovarie tumörer (inklusive 1/2 endometriida adenokarcinom, 0/1 granulosa celltumör och 0/1 adenokarcinom), 1/2
bentumörer (inklusive 1/1 kondrosarkom och 0/1 osteosarkom) och 1/1 adenokarcinom i bukspottkörteln. Ingen färgning detekterades i
lymfom (0/3), blåstumörer (0/3), njurtumörer (0/3), hudtumörer (0/3), binjurtumörer (0/2), seminom (0/2) och en prostatahyperplasi (0/1).
(Totalt antal utvärderade onormala fall = 162).
p16-6H12 rekommenderas för detektering av humant p16-protein i normala eller neoplastiska vävnader, som tillägg till
konventionell histopatologi med användande av icke-immunologiska histokemiska fläckar.
Produktspecifika begränsningar
p16 (6H12) har optimerats hos Leica Microsystems för användning med BOND Polymer Refine Detection samt BOND-hjälpreagenser.
Användare som avviker från rekommenderade testprocedurer måste ta ansvar för tolkningen av patientens resultat under sådana
omständigheter. Protokolltiderna kan variera beroende på variation i vävnadsfixering och effektiviteten av antigenförstärkning och måste
bestämmas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas vid optimering av hämtningsförhållanden och protokolltider.
Felsökning
Se referens 3 för korrigerande åtgärder.
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.
Mer information
Mer information om immunfärgning med BOND-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändiga materiel, Förbereda
provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av analyser, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i
"Använda BOND-reagens" i din BOND användardokumentation.
Bibliografi
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Utgivningsdatum
02 juli 2019
PA0016
Page 15