Soluzione Problemi; Ulteriori Informazioni - Leica BIOSYSTEMS BOND Mode D'emploi

• I campioni, prima e dopo la fissazione, e tutti i materiali esposti ad essi devono essere manipolati come potenziali vettori di infezione
e smaltiti con le opportune precauzioni
con la pelle e le membrane mucose. Se un reagente o un campione viene a contatto con superfici sensibili, lavare abbondantemente
con acqua. Consultare un medico.
• Consultare la normativa nazionale, regionale o locale vigente per lo smaltimento dei componenti potenzialmente tossici.
• Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti per evitare il rischio di una colorazione non specifica.
• Tempi o temperature di incubazione o di riconoscimento diversi da quelli specificati possono fornire risultati erronei. Ogni eventuale
modifica deve essere validata dall'utente.
Istruzioni per l'uso
L'anticorpo primario Wilms' Tumor (WT49) è stato sviluppato per essere utilizzato con il sistema automatizzato BOND in associazione
con il BOND Polymer Refine Detection. Il protocollo di colorazione consigliato per l'anticorpo primario Wilms' Tumor (WT49) è l'IHC
Protocol F. Per lo smascheramento termoindotto dell'epitopo si consiglia l'uso della BOND Epitope Retrieval Solution 2 per 30 minuti.
Risultati attesi
Tessuti normali
Il clone WT49 ha rilevato l'antigene del tumore di Wilms nei nuclei delle cellule stromali in diversi tessuti, delle cellule deciduali nell'utero,
delle cellule dello stroma e della granulosa nell'ovaio, delle cellule di Sertoli nel testicolo e nei podociti e nei glomeruli nel rene (n=205). Il
clone WT49 non reagisce con le cellule endoteliali.
Tessuti tumorali
Il clone WT49 ha colorato 4/5 tumori di Wilms, 5/5 mesoteliomi maligni, 6/9 tumori ovarici di diversi tipi e 1/3 angiomiolipomi. Non è stata
osservata alcuna colorazione in diversi altri tumori valutati (n=105). Il clone WT49 non reagisce con i tumori desmoplastici a piccole
cellule rotonde (DSRCT, desmoplastic small round cell tumors).
Si raccomanda l'uso del Wilms' Tumor (WT49) per la rilevazione della proteina del tumore di Wilms nei tessuti normali e
neoplastici.
Limitazioni specifiche del prodotto
Il Wilms' Tumor (WT49) è stato ottimizzato da Leica Biosystems per l'uso con il BOND Polymer Refine Detection e con i reagenti ausiliari
BOND. Gli utenti che modificano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilità dell'interpretazione dei risultati relativi
ai pazienti in tali circostanze. I tempi del protocollo possono variare in base alle variazioni nella fissazione del tessuto e nell'efficienza del
potenziamento dell'antigene e devono essere definiti in modo empirico. Nell'ottimizzazione delle condizioni di riconoscimento e dei tempi
del protocollo si devono impiegare dei controlli negativi del reagente.

Soluzione problemi

Per le azioni di rimedio consultare il riferimento bibliografico n. 3.
Per riferire una colorazione inusuale rivolgersi al distributore locale o all'ufficio di zona di Leica Biosystems.

Ulteriori informazioni

Ulteriori informazioni sull'immunocolorazione con i reagenti BOND si trovano in "Uso dei reagenti BOND" nella documentazione per
l'utente BOND, ai titoli Principio della procedura, Materiali necessari, Preparazione del campione, Controllo di qualità, Verifica del saggio,
Interpretazione della colorazione, Leggenda dei simboli e delle etichette e Limitazioni generali.
Bibliografia
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Omeroglu A and Omeroglu G. Pathologic quiz case: a 13-year-old with multiple abdominal masses. Arch Pathol Lab Med. 2003;
127:e347-e348
ProClin™ 950 è un marchio di fabbrica di Supelco, società del gruppo Sigma-Aldrich.
Data di pubblicazione
19 ottobre 2018
PA0562
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2 . Non pipettare mai i reagenti con la bocca ed evitare il contatto dei reagenti e dei campioni
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