Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi page 33

• Consultați reglementările naționale, județene sau locale pentru informații privind eliminarea oricăror componente cu potențial toxic.
• Reduceți la minimum contaminarea microbiană a reactivilor, în caz contrar poate apărea o creștere a colorării nespecifice.
• Timpii sau temperaturile de recuperare, incubare care diferă de valorile specificate pot genera rezultate eronate. Orice astfel de
modificare trebuie validată de către utilizator.
Instrucțiuni de utilizare
Anticorpul primar p16 (6H12) a fost dezvoltat pentru utilizarea pe sistemul automat BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX și
sistemul Leica BOND-III) în combinație cu BOND Polymer Refine Detection. Protocolul de colorare recomandat pentru anticorpul primar
p16 (6H12) este IHC Protocol F. Se recomandă recuperarea indusă de căldură a epitopilor utilizând BOND Epitope Retrieval Solution 2
timp de 20 de minute.
Rezultate așteptate
Țesuturi normale
Clona 6H12 detectează proteina p16 care este exprimată într-un model deosebit de restrâns în anumite celule în țesuturi specifice.
Modelul de colorare este nuclear, dar se observă colorație citoplasmatică în majoritatea tipurilor de celule care exprimă p16. S-a
observat imunoreactivitate în epiteliul criptic reticulat și celulele dendritice foliculare din amigdală, celulele insulare din pancreas, celulele
Leydig din testicul, celule uroteliale împrăștiate și ocazional în celulele epiteliale glandulare din endometru. S-a observat ocazional o
colorație slabă în glandele antrale ale stomacului, epiteliul glandular și mioepiteliul mamar și în glanda suprarenală. S-a observat de
asemenea colorarea macrofagelor și unelor fibroblaste. Nu s-a observat vreo colorare la diverse alte țesuturi normale (Număr total de
cazuri normale = 149).
Țesuturi tumorale
Clona 6H12 a colorat 30/42 canceruri de col uterin (incluzând 25/31 carcinoame cu celule scuamoase ale colului uterin, 2/4
adenocarcinoame ale colului uterin, 2/2 adenocarcinoame endometrioide, 1/2 adenocarcinoame endocervicale, 0/2 adenocarcinoame de
tip intestinal și 0/1 carcinoame papilare seroase), 21/39 carcinoame orofaringiene cu celule scuamoase, 3/6 tumori mamare (incluzând
2/4 carcinoame ductale invazive și 1/2 fibroadenoame), 2/10 tumori intestinale (incluzând 2/4 adenocarcinoame ale colonului, 0/3
adenocarcinoame ale rectului, 0/2 adenoame intestinale și 0/1 adenocarcinoame ale intestinului subțire), 2/5 carcinoame hepatocelulare,
2/5 tumori ale capului și gâtului (incluzând 1/1 adenocarcinom al cavității bucale, 1/1 adenom pleomorfic al glandei salivare, 0/1
carcinom chistic adenoid, 0/1 carcinom cu celule scuamoase al limbii și 0/1 carcinom nasofaringian), 2/4 tumori cerebrale (incluzând
1/3 meningioame și 1/1 astrocitom), 2/4 adenocarcinoame ale stomacului, 2/4 tumori pulmonare (incluzând 1/1 adenocarcinom,
1/1 carcinom cu celule mici și 0/2 carcinom cu celule scuamoase), 2/3 adenocarcinoame ale prostatei, 2/2 adenocarcinoame ale
endometrului, 1/5 tumori tiroidiene (incluzând 1/1 carcinom folicular, 0/1 adenocarcinom papilar folicular și 0/3 adenoame), 1/5 tumori
metastatice, 1/4 carcinoame cu celule scuamoase ale esofagului, 1/4 tumori ovariene (incluzând 1/2 adenocarcinoame endometrioide,
0/1 tumoare cu celule granuloase și 0/1 adenocarcinom), 1/2 tumori osoase (incluzând 1/1 condrosarcom și 0/1 osteosarcom), și 1/1
adenocarcinom al pancreasului. Nu s-a observat vreo colorare în limfoame (0/3), tumori ale vezicii urinare (0/3), tumori renale (0/3),
tumori ale pielii (0/3), tumori suprarenale (0/2), seminoame (0/2) și hiperplazie prostatică (0/1). (Numărul total al cazurilor anormale
evaluate = 162).
p16 (6H12) este recomandat pentru detectarea antigenului p16 uman în țesuturile normale și neoplazice, ca adjuvant al
histopatologiei convenționale, utilizând coloranți histochimici non-imunologici.
Restricții specifice produsului
p16 (6H12) a fost optimizat la Leica Biosystems pentru utilizarea cu BOND Polymer Refine Detection și cu reactivii auxiliari BOND.
Utilizatorii care se abat de la procedurile de testare recomandate trebuie să accepte responsabilitatea pentru interpretarea rezultatelor
pacientului în aceste circumstanțe. Timpii protocolului pot varia, datorită variației în fixarea țesutului și eficacității intensificării antigenului,
și trebuie să fie determinați empiric. Atunci când se optimizează condițiile de recuperare și timpii protocolului, trebuie să fie utilizați
reactivi de control negativ.
Rezolvarea problemelor
Consultați referința 3 pentru acțiuni de remediere.
Contactați distribuitorul dumneavoastră local sau biroul regional al Leica Biosystems pentru raportarea colorării neobișnuite.
Informații suplimentare
Informații suplimentare referitoare la imunocolorarea cu reactivii BOND, sub titlurile Principiul procedurii, Materiale necesare, Pregătirea
specimenului, Controlul calității, Verificarea analizei, Interpretarea colorării, Codul simbolurilor de pe etichete și Limitări generale pot fi
găsite în „Utilizarea reactivilor BOND" din documentația dumneavoastră de utilizare a sistemului BOND.
Bibliografie
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Data publicării
02 iulie 2019
PA0016
Page 32