Leica BIOSYSTEMS BOND PA0016 Mode D'emploi page 40

• Sledite zveznim, državnim ali lokalnim predpisom za odstranjevanje katerih koli morebitno strupenih sestavin.
• Pazite, da ne pride do mikrobne okužbe reagentov, saj lahko povzroči nespecifično barvanje.
• Če uporabite čas ali temperature razkrivanja in inkubacije, ki se razlikujejo od navedenih, lahko pridobite napačne rezultate.
Uporabnik mora validirati morebitne spremembe.
Navodila za uporabo
Primarno protitelo p16 (6H12) je bilo razvito za uporabo na avtomatiziranem sistemu BOND (vključuje sistem Leica BOND-MAX in
sistem Leica BOND-III) skupaj s sistemom BOND Polymer Refine Detection. Priporočeni protokol barvanja za primarno protitelo p16
(6H12) je protokol IHC Protocol F. Za toplotno pridobivanje epitopa se priporoča uporaba raztopine BOND Epitope Retrieval Solution 2
za 20 minut.
Pričakovani rezultati
Normalna tkiva
Klon 6H12 zazna protein p16, ki se v nekaterih celicah določenih tkiv izraža z zelo omejenim vzorcem. Vzorec barvanja vključuje
barvanje jedra, barvanje citoplazme pa opazimo pri večini vrst celic, ki izražajo p16. Imunsko reaktivnost so opazili pri mrežastem
epiteliju kripte in folikularnih dendritičnih celicah tonzile, celicah otočkov trebušne slinavke, Leydigovih celicah testisov, razpršenih
urotelijskih celicah ter občasno v žleznih epitelijskih celicah endometrija. Občasno šibko obarvanje so zaznali v antralnih žlezah želodca,
žleznem epiteliju in mioepiteliju dojk ter v nadledvični žlezi. Opazili so tudi obarvanje makrofagov in nekaterih fibroblastov. V številnih
drugih ocenjenih normalnih tkivih (skupno število normalnih primerov = 149) ni bilo opaziti dodatnega obarvanja.
Tumorska tkiva
Klon 6H12 je obarval 30/42 rakov materničnega vratu (vključno s 25/31 karcinomov ploščatih celic materničnega vratu, 2/4
adenokarcinomov materničnega vratu, 2/2 endometrioidnih adenokarcinomov, 1/2 endocervikalnih adenokarcinomov, 0/2
adenokarcinomov črevesnega tipa in 0/1 hudega papilarnega karcinoma), 21/39 orofaringealnih adenokarcinomov, 3/6 tumorjev dojke
(vključno z 2/4 invazivnih duktalnih karcinomov in 1/2 fibroadenomov), 2/10 črevesnih tumorjev (vključno z 2/4 adenokarcinomov kolona,
0/3 adenokarcinomov rektuma, 0/2 adenomov črevesa in 0/1 adenokarcinoma tankega črevesa), 2/5 hepatocelularnih karcinomov,
2/5 tumorjev glave in vratu (vključno z 1/1 adenokarcinoma ustne votline, 1/1 pleomorfnega adenoma žleze slinavke, 0/1 adenoidnega
cističnega karcinoma, 0/1 ploščatoceličnega karcinoma jezika in 0/1 nazofaringealnega karcinoma), 2/4 možganskih tumorjev (vključno
z 1/3 meningiomov in 1/1 astrocitoma), 2/4 adenokarcinomov želodca, 2/4 pljučnih tumorjev (vključno z 1/1 adenokarcinoma, 1/1
drobnoceličnega karcinoma in 0/2 ploščatoceličnih karcinomov), 2/3 adenokarcinomov prostate, 2/2 adenokarcinomov endometrija,
1/5 tumorjev ščitnice (vključno z 1/1 folikularnega karcinoma, 0/1 folikularnega papilarnega adenokarcinoma in 0/3 adenomov),
1/5 metastatskih tumorjev, 1/4 ploščatoceličnih karcinomov požiralnika, 1/4 tumorjev jajčnikov (vključno z 1/2 endometrioidnih
adenokcarcinomov, 0/1 tumorja granuloznih celic in 0/1 adenokarcinoma), 1/2 kostnih tumorjev (vključno z 1/1 hondrosarkoma in 0/1
osteosarkoma) in 1/1 adenokarcinoma trebušne slinavke. Obarvanja niso zaznali pri limfomih (0/3), tumorjih sečnega mehurja (0/3),
ledvičnih tumorjih (0/3), kožnih tumorjih (0/3), tumorjih nadledvične žleze (0/2), seminomih (0/2) in hiperplaziji prostate (0/1). (Skupno
število ocenjenih anomalnih primerov = 162).
Izdelek p16 (6H12) se priporoča za zaznavanje proteina p16 v normalnih in neoplastičnih tkivih kot dodatna analiza ob
konvencionalni histopatologiji z uporabo neimunskih histokemičnih barvil.
Specifične omejitve izdelka
Družba Leica Biosystems je protitelo p16 (6H12) optimizirala za uporabo s sistemom BOND Polymer Refine Detection in pomožnimi
reagenti BOND. Uporabniki, ki odstopijo od priporočenih preizkusnih postopkov, morajo prevzeti odgovornost za razlago bolnikovih
rezultatov pod temi pogoji. Trajanje protokola se lahko spremeni zaradi razlik pri fiksiranju tkiv in učinkovitosti izboljšave antigena ter se
mora določiti empirično. Uporabiti morate negativne kontrolne reagente, kadar optimizirate pogoje razkrivanja in trajanje protokola.
Odpravljanje težav
Glejte 3. navedbo za ukrep za odpravljanje napake.
Če želite poročati o nenavadnem obarvanju, se obrnite na svojega lokalnega distributerja ali regionalno pisarno družbe Leica
Biosystems.
Dodatne informacije
Dodatne informacije o imunološkem barvanju z reagenti BOND lahko najdete v priloženi dokumentaciji za uporabnike sistema BOND
»Uporaba reagentov BOND« v poglavjih Načelo postopka, Potrebni materiali, Priprava vzorcev, Kontrola kakovosti, Verifikacija testa,
Tolmačenje obarvanja, Legenda za simbole na oznakah in Splošne omejitve.
Literatura
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Schache AG, Powell NG, Cuschieri KS et al. HPV-Related Oropharynx cancer in the United Kingdom: An Evolution in the
understanding of disease etiology. Cancer Research. 2016; 76(22): 6598-6606.
5. Klaes R, Friedrich T, Spitkovsky D et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial
cells of the cervix uteri. Int J Cancer. 2001 Apr 15;92(2):276-84.
Datum izdaje
02 julij 2019
PA0016
Page 39