Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 22

Kvalitetskontroll
Skillnader i vävnadsbehandling och tekniska metoder i användarens laboratorium kan ge stor variation i resultaten vilket kan
göra det nödvändigt att genomföra regelbundna interna kontroller utöver följande metoder.
Kontroller bör vara färska obduktions-/biopsi-/kirurgiprover som snarast möjligt formalinfixeras, bearbetas och paraffininbäddas på
samma sätt som patientprover.
Positiv Vävnadskontroll
Används för att ange korrekt förberedda vävnader och rätt färgningstekniker.
En positiv vävnadskontroll bör ingå i varje uppsättning av testförhållanden vid varje färgningskörning.
En vävnad med svag positiv färgning är mer lämplig för optimal kvalitetskontroll och för att upptäcka låga nivåer av reagensdegradering
än en vävnad med stark positiv färgning.
2
Rekommenderad positiv kontrollvävnad är kolon.
Om den positiva vävnadskontrollen inte uppvisar positiv färgning bör resultat med testproverna anses vara ogiltiga.
Negativ Vävnadskontroll
Bör undersökas efter den positiva vävnadskontrollen för att fastställa specificiteten för märkningen av målantigenet med den primära
antikroppen.
Rekommenderad negativ kontrollvävnad är cerebellum.
Alternativt ger ofta en mängd olika celltyper som finns i de flesta vävnadssnitt negativa kontrollområden men detta bör kontrolleras av
användaren.
Ospecifik färgning, om det förekommer, har ofta ett diffust utseende. Sporadisk färgning av bindväv kan också observeras i snitt från
överflödigt formalinfixerade vävnader. Använd intakta celler för tolkning av färgningsresultat. Nekrotiska eller degenererade celler färgar
ofta ospecifikt. Falskt positiva resultat kan uppstå p.g.a. icke-immunologisk bindning av proteiner eller substratreaktionsprodukter. De
3
kan också orsakas av endogena enzymer som pseudoperoxidas (erytrocyter), endogent peroxidas (cytokrom C) eller endogent biotin
(t.ex. lever, bröst, hjärna, njure) beroende på typ av immunfärgning som används. För att skilja endogen enzymaktivitet eller ospecifik
enzymbindning från specifik immunreaktivitet kan ytterligare patientvävnader färgas exklusivt med respektive substratkromogen
eller enzymkomplex (avidin-biotin, streptavidin, märkt polymer) och substrat-kromogen. Om specifik färgning sker i den negativa
vävnadskontrollen bör resultat med patientprover anses vara ogiltiga.
Negativ Reagenskontroll
Använd en ospecifik negativ reagenskontroll istället för den primära antikroppen med ett snitt från varje patientprov för att utvärdera
ospecifik färgning och tillåta bättre tolkning av specifik färgning på antigenområdet.
Patientvävnad
Undersök patientprover färgade med NCL-L-CEA-609 sist. Positiv färgningsintensitet bör utvärderas inom ramen för all ospecifik
bakgrundsfärgning av den negativa reagenskontrollen. Som vid alla immunhistokemiska tester betyder ett negativt resultat att antigenet
inte upptäcktes och inte att det inte förekom i de analyserade cellerna/vävnaderna. Använd vid behov en antikroppspanel för att
identifiera falskt negativa reaktioner.
Förväntade Resultat
Normal vävnad
Klon COL-1 detekterade karcinoembryonalt antigen i epitelceller i kolon, rektum, matstrupe och struphuvud, samt i cervix skvamösa
mucosa. (Totalt antal normala fall = 150).
Onormal vävnad
Klon COL-1 färgade 58/65 kolontumörer (inklusive 20/23 metastaserande adenokarcinom, 18/22 adenokarcinom, 6/6 adenom,
5/5 polyper, 4/4 mucinösa adenokarcinom, 3/3 metastaserande mucinösa adenokarcinom och 2/2 metastaserande signet-
ringcellskarcinom), 33/77 lungtumörer (inklusive 14/28 adenokarcinom, 12/28 skvamösa cellkarcinom, 3/8 småcelliga karcinom,
1/6 atypiska karcinoider, 1/3 storcelliga karcinom, 1/2 metastaserande skvamösa cellkarcinom och 1/2 metastaserande adenokarcinom),
10/49 äggstockstumörer (inklusive 3/12 endometrioida adenokarcinom, 3/3 mucinösa adenokarcinom, 2/6 serösa papillära
adenokarcinom, 1/3 mucinösa cystadenokarcinom, 1/3 mucinösa cystadenom, 0/5 serösa adenokarcinom, 0/4 tekacelltumörer,
0/3 granulosa celltumörer, 0/3 odifferentierade karcinom, 0/2 endodermala sinuskarcinom, 0/1 dysgerminom, 0/1 omogen
teratom, 0/1 leiomyosarkom, 0/1 gränsfall av mucinöst cystadenom och 0/1 adenokarcinom) 5/11 metastaserande tumörer
(inklusive 3/4 metastaserande magsäckskarcinom, 2/4 metastaserad bröstcancer, 0/1 metastaserande nasofaryngealt karcinom,
0/1 metastaserande adenokarcinom i sköldkörtel och 0/1 metastaserande esofagus skivepitelcancer), 5/5 kronisk kolit, 4/4 Chrons
sjukdom, 3/3 adenokarcinom i magsäcken, 2/2 tumörer i tunntarm (inklusive 1/1 adenom och 1/1 adenokarcinom) 2/2 skvamösa
cellkarcinom i cervix, 1/3 skvamösa cellkarcinom i matstrupe, 1/2 endometrieadenokarcinom, 1/1 skvamöst cellkarcinom i huden och
1/1 skvamöst cellkarcinom i tungan. Ingen infärgning observerades i brösttumörer (0/5), sköldkörteltumörer (0/5), hjärntumörer (0/4),
hepatocellulära karcinom (0/4) lymfom (0/3), tumörer i prostata (0/2), tumörer i huvud och hals (0/2), tumörer i binjuren (0/2), tumörer i
urinblåsan (0/2), bentumörer (0/2), tumörer i salivkörteln (0/2), seminom (0/2), njurtumörer (0/2), en tumör i pankreas (0/1), en hyperplasi
i prostata (0/1), ett melanom (0/1), ett fall av tuberkulos i kolon (0/1) och ett feokromocytom (0/1). (Totalt antal onormala fall = 267).
NCL-L-CEA-609 rekommenderas för detektering av karcinoembryonalt antigen i normala och neoplastiska vävnader, som
tillägg till konventionell histopatologi med användande av icke-immunologiska histokemiska färgstoffer.
CEA-609-L-CE
Page 21