Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 34

Kvalitetskontroll
Forskjeller i behandlingen av vev og forskjeller i tekniske prosedyrer i brukerens laboratorium kan gi signifikant varierte resultater, og det
kan være nødvendig å foreta kontroller på stedet i tillegg til prosedyrene angitt nedenfor.
Kontrollene skal være nye autopsi-/biopsi-/kirurgiske prøver, formalinfikserte, behandlede og parafinlagrede så snart som mulig, på
samme måte som pasientprøver.
Positiv Vevskontroll
Brukes for å påvise korrekt vevspreparering og fargeteknikker.
Én positiv vevskontroll bør inkluderes for hvert sett med testbetingelser i hver fargerunde.
Svakt positivt farget vev er mer egnet enn kraftig positivt farget vev til optimal kvalitetskontroll og påvisning av små nivåer
reagensnedbrytning.
2
Anbefalt positivt kontrollvev er tykktarm.
Hvis den positive vevskontrollen ikke viser positiv farging, skal resultatene til testprøvene anses som ugyldige.
Negativ Vevskontroll
Skal undersøkes etter den positive vevskontrollen for å sikre at det primære antistoffet merker målantigenet spesifikt.
Anbefalt negativt kontrollvev er cerebellumvev.
Alternativt har de mange ulike celletypene som finnes i de fleste vevssnittene ofte negative kontrollsteder, men dette må verifiseres av
brukeren. Uspesifikk farging, hvis dette er aktuelt, har ofte et diffust utseende.
Sporadisk farging av bindevev kan på samme måte observeres i snitt fra vev som er fiksert for kraftig i formalin. Bruk intakte celler for å
tolke fargeresultatene. Nekrotiske eller degenererte celler kan ofte farges uspesifikt.
3
Falske positive resultater kan skyldes ikke-immunologisk binding av proteiner eller substratreaksjonsprodukter. Dette kan også skyldes
endogene enzymer som pseudoperoksidase (erytrocytter), endogen peroksidase (cytokrom C) eller endogent biotin (f.eks. lever, bryst,
hjerne, nyre), avhengig av anvendt type immunfarge.
For å differensiere endogen enzymaktivitet eller uspesifikk enzymbinding og spesifikk immunreaktivitet kan ytterligere pasientvev
eventuelt farges kun med henholdsvis substratkromogen eller enzymkomplekser (avidin-biotin, streptavidin, merket polymer) og
substratkromogen. Hvis det skjer spesifikk farging i den negative vevskontrollen, må resultatene for pasientprøvene anses som ugyldige.
Negativ reagenskontroll
Bruk en uspesifikk negativ reagenskontroll i stedet for det primære antistoffet på et snitt av hver pasientprøve for å vurdere uspesifikk
farging og for å muliggjøre bedre fortolkning av spesifikk farging på antigenstedet.
Pasientvev
Undersøk pasientprøver farget med NCL-L-CEA-609 sist. Intensiteten av positiv farging bør vurderes i sammenheng med eventuell
uspesifikk bakgrunnsfarging av den negative reagenskontrollen. Som med alle immunhistokjemiske tester, betyr et negativt resultat
at antigenet ikke ble påvist, ikke at antigenet var fraværende i de analyserte cellene/vevet. Om nødvendig kan man bruke et panel av
antistoffer for å identifisere falske negative reaksjoner.
Forventede Resultater
Normalt Vev
Klon COL-1 detekterte det karsinoembryonale antigenet i epitelceller i tykktarmen, rektum, spiserør og strupehode og i den skvamøse
slimhinnen i livmorhalsen. (Totalt antall normale tilfeller = 150.)
Abnormalt Vev
Klon COL-1 farget 58/65 tykktarmtumorer (herunder 20/23 metastatiske adenokarsinomer, 18/22 adenokarsinomer,
6/6 adenomer, 5/5 polypper, 4/4 mucinøse adenokarsinomer, 3/3 metastatiske mucinøse adenokarsinomer og 2/2 metastatiske
signetringcellekarsinomer), 33/77 lungetumorer (herunder 14/28 adenokarsinomer, 12/28 plateepitelkarsinomer, 3/8 småcellede
karsinomer, 1/6 atypiske karsinoider, 1/3 storcellede karsinomer, 1/2 metastatiske plateepitelkarsinomer og 1/2 metastatiske
adenokarsinomer), 10/49 eggstokktumorer (herunder 3/12 endometrioide adenokarsinomer, 3/3 mucinøse adenokarsinomer,
2/6 serøse papillære adenokarsinomer, 1/3 mucinøse cystadenokarsinomer, 1/3 mucinøse cystadenomer, 0/5 serøse adenokarsinomer,
0/4 tekacelletumorer, 0/3 granulosacelletumorer, 0/3 udifferensierte karsinomer, 0/2 endodermale sinuskarsinomer, 0/1 dysgerminom,
0/1 umodent teratom, 0/1 leiomyosarkom, 0/1 borderline mucinøs cystadenom og 0/1 adenokarsinom), 5/11 metastatiske tumorer
(herunder 3/4 metastatiske gastriske karsinomer, 2/4 metastatiske brystkarsinomer, 0/1 metastatisk nasofaryngealt karsinom,
0/1 metastatisk skjoldbruskkjertel-adenokarsinom og 0/1 metastatisk øsofagealt plateepitelkarsinom), 5/5 kronisk kolitt, 4/4 Crohns
sykdom, 3/3 mageadenokarsinomer, 2/2 tumorer i tynntarmen (herunder 1/1 adenom og 1/1 adenokarsinom), 2/2 plateepitelkarsinomer
i livmorhalsen, 1/3 øsofageale plateepitelkarsinomer, 1/2 endometriale adenokarsinomer, 1/1 plateepitelkarsinom i huden og
1/1 plateepitelkarsinom på tungen. Ingen farging ble observert i brysttumorer (0/5), skjoldbruskkjerteltumorer (0/5), hjernetumorer
(0/4), hepatocellulære karsinomer (0/4), lymfomer (0/3), prostatatumorer (0/2), tumorer på hodet og halsen (0/2), binyretumorer (0/2),
blæretumorer (0/2), beintumorer (0/2), spyttkjerteltumorer (0/2), seminomer (0/2), nyretumorer (0/2), en bukspyttkjerteltumor (0/1), en
prostatahyperplasi (0/1) et melanom (0/1), et tilfelle av tuberkulose i tykktarmen (0/1) og et feokromocytom (0/1). (Totalt antall unormale
tilfeller = 267.)
NCL-L-CEA-609 anbefales for deteksjon av karsinoembryonalt antigen i normale og neoplastiske vev, og som tillegg til
konvensjonell histopatologi med bruk av ikke-immunologiske histokjemiske farger.
CEA-609-L-CE
Page 33