Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 37

Kalite Kontrol
Kullanıcının laboratuvarındaki doku işleme ve teknik prosedürlerdeki değişiklikler, sonuçlarda önemli farklılıklara neden olabilir ve
aşağıdaki prosedürlere ek olarak dahili kontrollerin düzenli şekilde yapılmasını gerektirir.
Kontroller, mümkün olan en kısa sürede ve hasta örneği (örnekleri) ile aynı şekilde formalinle fikse edilmiş, işlenmiş ve parafin mumuna
gömülmüş taze otopsi/biyopsi/cerrahi numune olmalıdır.
Pozitif Doku Kontrolü
Doğru hazırlanmış dokuları ve düzgün boyama tekniklerini belirtmek için kullanılır.
Bir pozitif doku kontrolü, her boyama çalıştırmasında test koşullarının her seti için dahil edilmelidir.
Optimal kalite kontrol için ve reagent degradasyonunun minör düzeylerini tespit etmek için zayıf pozitif boyamaya sahip bir doku, güçlü
pozitif boyamaya sahip bir dokudan daha uygundur.
2
Önerilen pozitif kontrol dokusu kolondur.
Pozitif doku kontrolü, pozitif boyamayı göstermezse test numuneleri ile elde edilen sonuçlar geçersiz olarak ele alınmalıdır.
Negatif Doku Kontrolü
Pozitif doku kontrolünden sonra hedef antijenin etiketleme spesifitesini primer antikorla kontrol etmek için gerçekleştirilmelidir.
Önerilen negatif kontrol dokusu serebellumdur.
Pek çok doku seksiyonunda bulunan farklı hücre tiplerinin çeşitliliği, genelde negatif kontrol bölgeleri sağlar ancak bu, kullanıcı
tarafından kontrol edilmelidir. Nonspesifik boyama, mevcutsa genelde difüz bir görünüme sahiptir.
Bağ dokusu sporadik boyama, aşırı formalinle fikse edilmiş dokulardan seksiyonlarda da gözlemlenebilir. Boyama sonuçlarının
yorumlanması için intakt hücreler kullanın. Nekrotik veya dejenere hücreler, genelde belirsiz şekilde boyanabilir.
3
Yanlış pozitif sonuçlar, substrat reaksiyon ürünleri veya proteinlerin immünolojik olmayan protein bağlanması nedeniyle görülebilir.
Bunlar, kullanılan immüno boyamanın tipine bağlı olarak psödoperoksidaz (eritrositler), endojen peroksidaz (sitokrom C) veya endojen
biotin (örn. karaciğer, meme, beyin, böbrek) gibi endojen enzimler nedeniyle de ortaya çıkabilir.
Endojen enzim aktivitesini veya enzimlerin nonspesifik bağlanmasını, spesifik immünreaktiviteden ayırt etmek için ilave hasta dokuları,
sadece sırasıyla substrat kromojen veya enzim kompleksleriyle (avidin biotin, streptavidin, etiketli polimer) ve substrat kromojen ile
boyanabilir. Spesifik boyamanın, negatif doku kontrolünde ortaya çıkması durumunda hasta numuneleri ile elde edilen sonuçlar geçersiz
olarak ele alınmalıdır.
Negatif Reagent Kontrolü
Antijen bölgede nonspesifik boyamanın değerlendirilmesi ve spesifik boyamanın daha iyi yorumlanmasını sağlamak amacıyla her hasta
numunesinin bir seksiyonu ile primer antikorun yerine bir nonspesifik negatif reagent kontrolü kullanın.
Hasta Dokusu
NCL-L-CEA-609 ile boyanmış hasta numunelerini en son inceleyin. Pozitif boyama intensitesi, negatif reagent kontrolünün herhangi
bir nonspesifik arka plan boyamasının kapsamında değerlendirilmelidir. Herhangi bir immünohistokimyasal test ile negatif bir sonuç,
antijenin tespit edilmediği anlamına gelir; antijenin test edilen hücrelerde/dokuda mevcut olmadığı anlamına gelmez. Gerekiyorsa yanlış
negatif reaksiyonları belirlemek için bir antikor paneli kullanın.
Öngörülen Sonuçlar
Normal Dokular
Klon COL-1, kolon, rektum, özofagus ve larinksin epitelyal hücrelerinde ve serviksin skuamöz mukozasında karsinoembriyonik antijeni
saptamıştır. (Toplam normal olgu sayısı = 150).
Abnormal Dokular
Klon COL-1 58/65 kolon tümörü (20/23 metastatik adenokarsinom, 18/22 adenokarsinom, 6/6 adenom, 5/5 polip, 4/4 müsinöz
adenokarsinom, 3/3 metastatik müsinöz adenokarsinom ve 2/2 metastatik taşlı yüzük hücreli karsinom dahil), 33/77 akciğer tümörü
(14/28 adenokarsinom, 12/28 skuamöz hücreli karsinom, 3/8 küçük hücreli karsinom, 1/6 atipik karsinoid, 1/3 büyük hücreli karsinom,
1/2 metastatik skuamöz hücreli karsinom ve 1/2 metastatik adenokarsinom dahil), 10/49 over tümörü (3/12 endometrioid adenokarsinom,
3/3 müsinöz adenokarsinom, 2/6 seröz papiller adenokarsinom, 1/3 müsinöz kistadenokarsinom, 1/3 müsinöz kistadenom, 0/5 seröz
adenokarsinom, 0/4 teka hücreli tümör, 0/3 granulosa hücreli tümör, 0/3 diferansiye olmamış karsinom, 0/2 endodermal sinüs karsinomu,
0/1 disgerminom, 0/1 immatür teratom, 0/1 leiomiyosarkom, 0/1 sınırda müsinöz kistadenom ve 0/1 adenokarsinom), 5/11 metastatik
tümör (3/4 metastatik gastrik karsinom, 2/4 metastatik meme karsinomu, 0/1 metastatik nazofaringeal karsinom, 0/1 metastatik tiroid
adenokarsinomu ve 0/1 metastatik özofageal skuamöz hücreli karsinom), 5/5 kronik kolit, 4/4 Crohn hastalığı, 3/3 mide adenokarsinomu,
2/2 ince bağırsak tümörü (1/1 adenom ve 1/1 adenokarsinom dahil), 2/2 serviksin skuamöz hücreli karsinomu, 1/3 özofageal skuamöz
hücreli karsinom, 1/2 endometriyal adenokarsinom, 1/1 cildin skuamöz hücreli karsinomu ve 1/1 dilin skuamöz hücreli karsinomunu
boyamıştır. Meme tümörleri (0/5), tiroid tümörleri (0/5), beyin tümörleri (0/4), hepatoselüler karsinom (0/4), lenfomalar (0/3), prostat
tümörleri (0/2), baş ve boyun tümörleri (0/2), adrenal bez tümörleri (0/2), mesane tümörleri (0/2), kemik tümörleri (0/2), tükürük bezi
tümörleri (0/2), seminomlar (0/2), böbrek tümörleri (0/2), bir pankreas tümörü (0/1), bir prostat hiperplazisi (0/1), bir melanom (0/1), bir
kolon tüberkülozu vakası (0/1) ve bir feokromositoma (0/1) boyanmamıştır. (Toplam anormal olgu sayısı = 267).
NCL-L-CEA-609, immünolojik olmayan histokimyasal boyamalar kullanılarak yapılan geleneksel histopatolojiye yardımcı olarak
normal ve neoplastik dokularda karsinoembriyonik antijenin saptanması için önerilir.
CEA-609-L-CE
Page 36